16例妇科恶性肿瘤治疗后患者的辅助生殖结局

目的:探讨妇科恶性肿瘤治疗后患者行辅助生殖助孕的有效性及安全性。方法:回顾性分析2014年2月至2022年8月于山东大学齐鲁医院妇产科生殖中心行体外受精(IVF)/胞浆内单精子注射(ICSI)助孕的16例妇科恶性肿瘤保留生育能力治疗后患者的基本资料、妊娠结局及随访资料。结果:16例患者年龄26~43岁,平均(32.06±3.714)岁,其中1例43岁,其余15例患者年龄均在35岁以下(26~34岁);不孕时间0.17~7.83年,平均(3.40±2.48)年;抗缪勒管激素(AMH)水平0.3~12.49 ng/mL,平均(4.54±3.77)ng/mL;体质指数(BMI)19~28.6 kg/m^(2),平均(23.52±3.03)kg/m^(2);卵泡刺激素(FSH)水平2.37~11.79 mIU/mL,平均(6.37±2.23)mIU/mL;促性腺激素(Gn)使用总量600~4050 IU,平均(1838.46±740.85)IU;Gn使用天数4~14 d,平均(7.69±2.26)d;获卵数0~42个,平均(9.92±10.17)个;获卵率87.46%(258/295);移植胚胎数1~2个,平均(1.29±0.46)个;移植日子宫内膜厚度6~17 mm,平均(9.43±2.54)mm。新鲜周期移植占比21.43%(6/28),复苏周期移植占比78.57%(22/28);卵裂期移植周期占比28.57%(8/28),囊胚移植周期占比71.43%(20/28)。临床妊娠率为35.71%,流产率为50.00%,活产率为17.86%。首次辅助生殖助孕至今9~102个月,平均(35.56±25.55)个月。16例患者中1例失访,3例肿瘤复发病例均为子宫内膜癌患者,所有活产子代均身体健康。结论:妇科恶性肿瘤治疗后的患者行辅助生殖助孕具有较高的安全性及有效性,其中子宫内膜癌患者行辅助生殖助孕后肿瘤的复发率较高,应告知其肿瘤复发风险并密切监测子宫内膜情况。

IVF-ET周期中GnRH-a、FSH、hMG配伍方案的比较研究

目的:探讨IVF周期中采用不同促排卵方案时,卵泡液及血清中FSH、LH、E2水平的变化及对胚胎发育、受精、妊娠的影响;单用国产hMG促排卵的效果。方法:120例分成4组。测定卵泡液及取卵日血清中FSH、LH、E2水平,比较四种方案的取卵数、受精率、Ⅰ级、Ⅱ级胚胎形成率和每移植周期妊娠率。结果:四种促排卵方案的卵泡液和血清FSH、E2水平没有差别（P>0.05）,不同垂体降调节者,卵泡液和血清LH水平明显升高（P<0.0001）,四种促排卵方案的取卵数、受精率、优质胚胎形成率、移植周期妊娠率经统计学处理均无显著性差异。结论:卵泡液和血清中LH水平升高可能与应用垂体降调节有关,而与选择纯FSH还是hMG促排卵无关。轻度LH升高并不影响卵泡发育、卵子质量和以后的胚胎发育。IVF周期首选垂体降调节加FSH或FSH/hMG促排卵方案,单用hMG促排卵也可以作为选择。

介绍一种LHRH脉冲式静脉给药促排卵新方法

介绍一种ＬＨＲＨ脉冲式静脉给药促排卵新方法邓晓惠许燕雪康曼华（山东医科大学附属医院）黄体生成素释放激素（ｌｕｔｅｉｎｉｚｉｎｇｈｏｒｍｏｎｅｒｅｌｅａｓｉｎｇｈｏｒｍｏｎｅ，ＬＨＲＨ）脉冲式静脉给药（ｐｕｌｓａｔｉｌｅｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓａｄｍｉｎ...

囊胚期胚胎培养和移植

常规体外受精一胚胎移植过程胚胎种植率很少超过 2 5 % ,妊娠率国内报道为 15 %～ 38% ,国外报道为 2 0～ 47% ,采用序贯培养一囊胚移植的方法可以提高种植率和妊娠率。综合各生殖中心的报道 ,序贯培养的囊胚形成率为 35 %～ 70 % ,囊胚种植率为 45 %～ 5 0 % ,妊娠率达到 6 3%～ 71%。囊胚期胚胎培养和移植通过无创手段选择最具生命力的胚胎进行移植 ,淘汰具有遗传缺陷的胚胎 ,由于减少了移植胚胎数 ,降低了多胎妊娠的发生率。

Ⅱ、Ⅲ级胚胎活检后体外发育能力的研究

目的:探讨形态学评价质量较差的胚胎有无活检价值,活检后能否正常发育。方法: 160个IVF和ICSI周期剩余的Ⅱ级、Ⅲ级胚胎,来自同一例患者分级相同的胚胎配对,随机分为实验组和对照组。实验组采用喷酸透明带打孔法取出1个卵裂球,对照组继续培养,对比两组囊胚的形成率、孵化率、囊胚细胞总数,并观察不同形态学特征的胚胎活检后的发育情况。结果:活检组胚胎囊胚形成率,囊胚总细胞数与对照组相比没有差别,但囊胚第6天孵出率活检组明显高于对照组;Ⅲ级胚胎活检后囊胚形成率、第6天孵化率、囊胚总细胞数均明显低于Ⅱ级胚胎;活检前细胞数少于7个的胚胎,活检后发育能力显著降低。结论:活检不影响胚胎体外继续发育的能力;Ⅱ级胚胎活检后具有较好的发育潜力,Ⅲ级胚胎活检后囊胚形成率较低,即使形成囊胚,细胞数也较少,不能正常发育;第3天活检时具有7个或7个以上卵裂球的胚胎具有较好的继续发育能力。

辅助生殖技术在肿瘤患者中的应用

辅助生殖技术的迅速发展 ,使得年轻尚未生育的肿瘤患者在经治疗后仍可获得生育的机会。对肿瘤患者如何进行辅助生殖技术治疗 ,辅助生殖技术应用与肿瘤发生的关系 ,是临床迫切需要探讨和解决的问题。综述 10余年的文献报道 ,旨在为临床医师提供一些理论指导和经验帮助。

家兔手术中三氯化铁的止血效果

３５％三氯化铁溶液具有收敛及止血作用，一般用于体表的局部止血。现用兔作为对象，将它用于手术中盆腔、腹腔不同出血部位，观察其止血效果，并以明胶海绵止血、电凝止血方法作为对照。结果显示，３５％三氯化铁溶液止血迅速、效果可靠，且对兔血清氯及肝功能均无影响，对局部组织亦无损伤。

剖宫产手术方式的探讨

1998年1月至4月行周氏剖宫产术120例,随机选择腹膜外剖宫产术和腹膜內剖宫产术各120例作对照,比较三组的手术时间、新生儿Apgar评分、术中出血量、术后病率等项目。结果表明,周氏剖宫产所需手术时间平均为25±2.5min。明显短于其它二组;从开腹到切开子宫所需时间,周氏剖宫产组和腹膜內组均短于腹膜外组;其它几项指标三组无差别。作者认为,周氏剖宫产术手术时间短、术后恢复快、并发症少、刀口美观、易于掌握,可作为首选。

脉冲式静脉注射促黄体激素释放激素对不孕症促排卵的疗效观察

自八十年代初开始,采用脉冲式促黄体激素释放激素(LHRH)诱导排卵,迄今已有许多成功的报道。Asch[1]作了统计,这种疗法的排卵周期率为90％,妊娠周期率为30～15％。国内于1973年人工合成了LHRH并已生产自动注射泵,脉冲式给药方法的应用在国内亦正方兴未艾。本研究采用LHRH脉冲式静脉给药方法,旨在探讨各种内分泌原因所致大孕症对LHRH脉冲治疗的反应性,为LHRH广泛用于临床提供实践基础。

磷酸化信号转导和转录激活因子3(Y705)在子宫腺肌症中的表达及其临床意义

目的通过检测磷酸化信号转导和转录激活因子3(p-STAT3)(Y705)和血管内皮生长因子(VEGF)在正常子宫内膜与子宫腺肌症在位内膜中的定位与表达,探讨p-STAT3(Y705)和VEGF在子宫腺肌症中发生发展中的作用。方法免疫组织化学SP法检测14例正常子宫内膜和14例子宫腺肌症在位内膜中p-STAT3(Y705)和VEGF的定位和表达情况;Real-time PCR检测正常子宫内膜与子宫腺肌症在位内膜组织中STAT3 mRNA表达情况;Western blotting检测正常子宫内膜与子宫腺肌症在位内膜组织中p-STAT3(Y705)、STAT3和VEGF蛋白的表达水平。结果 p-STAT3(Y705)主要在正常子宫内膜和子宫腺肌症在位内膜腺上皮细胞核中表达,子宫腺肌症在位内膜蛋白表达高于正常子宫内膜(P<0.05),正常子宫内膜和子宫腺肌症在位内膜相应的增殖期和分泌期p-STAT3(Y705)的表达无显著性差异(P>0.05)。正常子宫内膜和子宫腺肌症在位内膜中,STAT3在mRNA和蛋白表达水平差异均无显著性(P>0.05)。VEGF主要表达在腺上皮细胞中,子宫腺肌症在位内膜蛋白表达高于正常子宫内膜(P<0.05),正常子宫内膜和子宫腺肌症在位内膜相应的增殖期和分泌期VEGF的表达差异无显著性(P>0.05)。结论 p-STAT3(Y705)促进血管生成对子宫腺肌症的发生发展有一定的作用。

Th1/Th2细胞平衡及NK细胞对胚胎种植的影响

目的:通过研究反复种植失败(RIF)患者与首次移植妊娠成功患者种植窗口期外周血中Th1、Th2型细胞因子及自然杀伤(NK)细胞的表达差异,探讨Th1/Th2细胞平衡及NK细胞对胚胎种植的影响及调节机制。方法:选取2020年3月至2020年9月于山东大学齐鲁医院不孕不育诊疗中心就诊的35例RIF患者(RIF组)和首次行体外受精(IVF)或卵细胞浆内单精子注射(ICSI)助孕即成功妊娠的29例不孕症患者(对照组)。于胚胎移植治疗前的黄体中期采集患者外周血,流式细胞术检测Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ、TNF-α,Th2型细胞因子IL-4、IL-6、IL-10以及NK细胞水平。结果:种植窗口期RIF组患者外周血中IL-6及IL-2/IL-10、IFN-γ/IL-10和TNF-α/IL-10比值明显高于对照组,IL-10水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。RIF组患者外周血中IL-2、IL-4水平及TNF-γ含量高于对照组,TNF-α含量低于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者血清中NK细胞比例无明显统计学差异(P>0.05)。结论:IL-6、IL-10可能参与种植窗口期外周血中Th1/Th2细胞平衡调节,从而影响胚胎的种植。

体外受精-胚胎移植后反复种植失败的相关因素分析

目的探讨体外受精/卵细胞浆内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)后胚胎反复种植失败(RIF)发生的相关危险因素,为预防和降低RIF的发生寻找临床管理策略。方法回顾性研究2018年8月至2020年2月于山东大学齐鲁医院妇产科生殖医学中心常规行IVF/ICSI治疗的不孕症患者789例,根据胚胎移植后妊娠结局分为RIF组(222例)和正常妊娠组(567例)。比较两组患者的一般临床资料及相关自身免疫抗体等,采用logistic回归分析相关危险因素,绘制ROC曲线评价预测模型价值。结果RIF组的年龄、不孕年限、继发性不孕比例、人工流产次数、基础FSH、宫腔镜检查异常比例均高于对照组,AMH、移植日内膜厚度均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。RIF组的TG-Ab阳性比例、ANA阳性比例、β2-GPΙ-Ab阳性比例均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,两组患者的不孕年限(OR=1.098)、继发性不孕比例(OR=1.763)、AMH(OR=0.932)、宫腔镜检查异常比例(OR=1.648)、ANA阳性比例(OR=2.176)、β2-GPΙ-Ab阳性比例(OR=2.682)比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,曲线下面积(AUC)为0.737(95%CI为0.697~0.777,P<0.001)。结论不孕年限增加、继发性不孕、低AMH水平、宫腔镜检查异常、ANA阳性、β2-GPΙ-Ab阳性等因素与RIF密切相关,临床上可综合考虑上述危险因素采取针对性的干预措施,以获得良好的临床妊娠结局。

抗卵巢抗体对体外受精-胚胎移植过程及结局的影响

目的 :研究抗卵巢抗体对体外受精 胚胎移植 (IVF ET)的影响。方法 :接受IVF ET治疗的患者 80例 ,在施行IVF治疗前抽取静脉血 3ml ,测定血清中抗卵巢抗体(AOAb)阳性率 ,并分别计算阳性组和阴性组患者的取卵数、受精率、卵裂率、优质胚胎率、冷冻胚胎率、临床妊娠率及胚胎种植率。结果 :AOAb的阳性率为 2 8.8% (2 3/ 80 )。AOAb阳性患者中平均取卵数、胚胎种植率和临床妊娠率均低于抗体阴性组。结论 :抗卵巢抗体的存在影响了IVF ET的诸过程 ,降低了临床妊娠率。

兔卵巢组织冷冻移植后卵母细胞成熟及受精发育能力的研究

目的探讨兔卵巢组织冷冻复苏后移植对卵母细胞生长、成熟、受精发育潜能的影响。方法25只性成熟新西兰雌兔随机分为对照组(5只)、新鲜移植组(10只)及冷冻复苏移植组(10只),卵巢组织均自体多点移植于子宫系膜内。卵巢移植90d后对兔联合使用促排卵、体外成熟培养和卵泡浆内单精子注射技术,观察卵子的成熟情况以及体内和体外成熟卵子的受精率、卵裂率和囊胚形成率。结果新鲜移植组和冷冻复苏移植组获卵数均低于对照组(P<0.05),而两移植组间获卵数差异无显著性;各组未成熟卵子所占比率以及未成熟卵子体外成熟后的成熟率间均无显著性差异;各组间体内成熟卵子、体外培养成熟卵子的受精率、卵裂率和囊胚形成率的差异不明显;各组内体内成熟卵子与体外培养成熟卵子相比受精率、卵裂率间无显著性差异,但体外培养成熟卵子囊胚形成率明显低于体内成熟卵子(P<0.05)。结论兔卵巢经冷冻复苏自体移植后,其卵泡能够重新生长发育;通过体外成熟和受精技术,体内和体外成熟卵子均可产生正常的胚胎。提示卵巢组织冻融移植结合辅助生殖技术可作为一种生育力保存的方法。

兔卵巢组织玻璃化冷冻的实验研究

目的:探讨玻璃化冷冻法保存兔卵巢组织的效果。方法:随机将25只新西兰雌兔分为对照组(5只)、慢速冷冻组(10只)和玻璃化冷冻组(10只),比较各组冻融前后卵巢组织学、超微结构、卵泡凋亡(原位末端标记法,TUNEL)和子宫系膜内移植后卵巢功能的恢复情况。结果:新鲜组织、慢速冷冻复苏组织和玻璃化冷冻复苏组织中正常形态卵泡比例分别为87.36%、81.96%和82.72%,两冷冻组正常卵泡比例均低于对照组,差异有统计学意义?P(0.05),但玻璃化冷冻组与慢速冷冻组差异无统计学意义(P>0.05)。3组间卵泡凋亡比率分别为21.4%、13.5%和17.1%,差异无统计学意义(P>0.05);3组移植后兔动情周期出现率均为100%,动情周期出现天数差异无统计学意义?P>0.05);移植存活的卵巢组织内可见各级形态正常的卵泡发育。结论:玻璃化冷冻可有效保存卵巢组织的结构和功能,是一种简单、可行的兔卵巢组织冷冻保存法。

两种冷冻方法对人大块卵巢组织卵泡活性的影响

目的探讨两种冷冻方法冻融人类大块卵巢组织的冷冻效果及对卵泡活性的影响。方法收集15例人卵巢组织,每例修剪成3块卵巢组织(约15 mm×15 mm×2mm),分别随机分配到新鲜对照组(A组)、玻璃化冷冻组(B组)、两步法冷冻组(C组),组织学分析3组卵泡形态学变化,并进行卵巢组织体外培养后测定培养液上清中雌激素、孕激素浓度,免疫组织化学染色测定培养后的卵巢组织细胞核增殖相关抗原Ki67及B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)表达水平,评估卵泡增殖及凋亡活性。结果 A组正常形态卵泡比率(91.9%)显著高于B组(71.3%)和C组(82.9%),差异有统计学意义(P<0.05),C组高于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。C组的始基卵泡和初级卵泡的正常形态率分别为86.8%、54.4%,均分别高于B组73.8%、44.4%,差异有统计学意义(P<0.05)。同一时期3组激素测定结果差异不显著(P>0.05)。C组Ki67的阳性率为73%,分别显著高于A组50%和B组55%(P<0.05),A组低于B组(P<0.05)。Bcl-2阳性率,A组为57%和C组61%相比无差异(P>0.05),但B组42%阳性率分别低于A组和C组(P<0.05)。结论人体大块卵巢组织冻融后仍具有活性,并且两步法冻存效果优于玻璃化冷冻法。

GRIM-19在小鼠植入前胚胎中的表达及其作用

目的通过研究干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关基因(GRIM-19)在小鼠植入前胚胎中的表达及其与胚胎质量之间的相关性,探讨GRIM-19在小鼠植入前胚胎发育中的作用。方法采用实时定量PCR,检测小鼠植入前胚胎(2-细胞期、4-细胞期、8-细胞期、桑葚胚和囊胚)中GRIM-19 mRNA水平(n=16);将小鼠8-细胞期胚胎按卵裂球大小、形态、透明带、胞质碎片分为优胚组和非优胚组,分别检测两组胚胎GRIM-19mRNA水平,并分析其相关性(n=13);制作假孕鼠(23只),并随机分为A组(12只)和B组(11只),采用移植器将优质和非优质8-细胞期胚胎移入假孕鼠的子宫内,观察两组雌鼠妊娠率及产仔率。结果 GRIM-19在小鼠植入前各期胚胎中均有表达,其mRNA水平从2-细胞期逐渐增高,至8-细胞期达高峰,随后呈下降趋势。优质8-细胞胚胎的GRIM-19 mRNA水平明显高于非优胚组(P<0.05)。两组8-细胞胚胎移植后,A组雌鼠妊娠率及产仔率显著高于B组雌鼠(P<0.05)。结论小鼠植入前胚胎中GRIM-19的表达量随发育时程的改变而变化,且与胚胎质量密切相关。

人胎儿卵巢组织异种移植后卵母细胞的发育及成熟能力

目的探讨人胎儿卵巢组织冷冻复苏、体外培养和异种移植后卵母细胞的发育和成熟情况。方法取5例胎龄20周引产的胎儿卵巢,采用丙二醇慢速冷冻保存,复苏后在组织培养条件下进行体外培养,6d后移植到免疫缺陷小鼠的肾被膜下,应用卵泡刺激激素作用23周后取出卵巢组织,机械法取出窦卵泡内的卵母细胞,结合体外成熟培养,观察卵子成熟情况,并通过移植前后组织学和增殖细胞核抗原(PCNA)表达变化观察卵泡发育情况。结果冷冻复苏组织和新鲜卵巢组织中各期卵泡的构成比之间差异无显著性(P>0.05);培养组织与新鲜组织和冻融组织相比,增殖期卵泡的比例显著增加(P<0.05);移植组织与新鲜组织、冻融组织和培养组织相比,增殖期卵泡比例亦显著增加(P<0.05)。各组织中原始卵泡均未见PCNA阳性表达,其表达最早出现于初级卵泡,新鲜组织和冻融组织中偶可见PCNA阳性表达,而培养组织和移植组织中可见明显的PCNA阳性表达。从移植卵巢的窦卵泡中获得未成熟卵子42个,经体外成熟培养有21.43%的卵子可发育到MII期。结论人胎儿卵巢组织能耐受冻融、组织培养和移植过程,其卵泡能够重新生长发育,恢复内分泌功能,且不影响卵母细胞的发育及成熟能力。