胶体金免疫层析法检测SARS-CoV-2血清抗体的临床价值探讨

目的通过对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)免疫球蛋白(Ig)M和总抗体(即IgM/IgG)的检测,探讨应用胶体金免疫层析法(GICA法)在新型冠状病毒肺炎(COVID-19)诊断中的应用价值。方法收集76例患者共计83份血清,其中32例为SARS-CoV-2核酸阳性患者(确诊组),44例为SARS-CoV-2核酸阴性患者(对照组)。确诊组中7例患者为两次时间点采集标本。采用GICA法检测SARS-CoV-2 IgM和总抗体。结果GICA法检测SARS-CoV-2 IgM的灵敏度50.00%(16/32),特异度90.91%(40/44),符合率73.68%(56/76),阳性预测值80.00%(16/20)、阴性预测值71.43%(40/56);SARS-CoV-2总抗体检测的灵敏度68.75%(22/32)、特异度97.73%(43/44)、符合率85.53%(65/76)、阳性预测值95.65%(22/23)、阴性预测值81.13%(43/53)。GICA法检测SARS-CoV-2 IgM和总抗体的特异度均大于90%,符合率均大于70%,满足临床需求。结论GICA法检测SARS-CoV-2 IgM和总抗体,标本采集易标准化,报告时间快,灵敏度不高,但特异度较高,有辅助诊断的价值。

2012-2016年鲍曼不动杆菌季度性耐药规律分析

目的了解我院鲍曼不动杆菌耐药率,从时间角度分析鲍曼不动杆菌的耐药规律变化,可为合理应用抗菌药物和预防控制医院感染提供数据。方法采用VITEK-2 compact全自动微生物鉴定仪对细菌进行鉴定及药敏,选择我院2012年1月至2016年12月从临床分离的鲍曼不动杆菌8196株(研究组),铜绿假单胞菌6656株(对照组)为研究对象。按季度为时间单位,统计分析鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌对亚胺培南,哌拉西林/他唑巴坦,头孢吡肟,庆大霉素,妥布霉素,环丙沙星,左氧氟沙星的耐药规律。结果鲍曼不动杆菌对常用抗生素的耐药率随季度变化而改变,呈现一定的规律性,第一季度最高(27. 6%～86. 2%),第三季度最低(18. 3%～60. 0%)。第一季度耐药率和第三季度耐药率比较差异有统计学意义(P<0. 05)。对照组铜绿假单胞菌耐药率无季度变化规律。结论鲍曼不动杆菌对亚胺培南,哌拉西林/他唑巴坦,头孢吡肟,庆大霉素,妥布霉素,环丙沙星,左氧氟沙星抗菌药物耐药率存在明显的季度性变化规律,鲍曼不动杆菌耐药性变化可能与季节气温气压有关。

念珠菌IgG抗体与1-3-β-D葡聚糖检测对侵袭性念珠菌病的诊断价值

目的探讨念珠菌IgG抗体检测与1-3-β-D葡聚糖检测对侵袭性念珠菌病(IC)的诊断价值。方法收集56例血清,其中34例为IC确诊病例(确诊组),22例为排除深部真菌感染的住院患者血清(对照组)。56例血清标本均采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测念珠菌IgG抗体浓度,用动态显色法检测1-3-β-D葡聚糖含量(真菌G实验),分析两种方法诊断IC的效能。结果念珠菌IgG抗体检测的敏感性为70.6%,特异性为95.5%,准确度为80.4%;真菌G实验敏感性为38.2%,特异性为77.3%,准确度为53.6%。结论念珠菌IgG抗体检测对IC的诊断性能优于真菌G实验;联合两种检测方法,能提高检测的敏感性。

化学发光法检测SARS-CoV-2抗体试剂诊断效能比较及抗体筛查策略探讨

目的研究新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者特异性抗体免疫球蛋白(Ig)M、免疫球蛋白(Ig)G及总抗体动态变化规律,评价应用化学发光在COVID-19诊断中的可靠性及诊断效能,并通过抗体血清学转化探讨普通人群筛查策略,为科学地防治COVID-19提供理论依据。方法收集我院2020年1月25日至3月17日就诊患者89例,共计142份血清,其中16例确诊COVID-19患者的不同采血时间点共69份血清作为病例组,73例核酸阴性的排除患者共73份血清作为对照组。采用全自动化学发光免疫分析技术对收集血清进行新型冠状病毒(SARS-CoV-2)IgM、IgG和总抗体检测。结果IgM检测的敏感度为40.58%(28/69),特异度为98.63%(72/73),符合率为70.42%(100/142);IgG检测的敏感度为89.86%(62/69),特异度为98.63%(72/73),符合率为94.37%(134/142);总抗体检测的敏感度为95.65%(66/69);特异度为98.63%(72/73);符合率为97.18%(138/142)。所有抗体在发病1周内检测阳性率较低,从第2周开始,抗体阳性率逐步升高。IgM抗体在第5周阳性率达70%的峰值,从第6周开始逐渐降低;IgG从第3周开始阳性率持续维持在100%,总抗体从第2周开始阳性率持续维持在100%。结论化学发光法检测SARS-CoV-2抗体可作为COVID-19感染的有效筛查和诊断指标,相比较而言总抗体检测效能优于单独检测IgM或IgG。作为普通人群筛查时,抗体检测结果应进行动态监测及跟踪随访。

脑脊液ECLIA与FTA-ABS检测在NS诊断中的应用价值研究

目的探讨脑脊液(CSF)梅毒特异性抗体在神经梅毒(NS)诊断中的应用价值。方法选择2018年1月至2020年1月于该院确诊的梅毒患者124例作为研究对象,以梅毒性病研究实验室试验(VDRL)结果作为诊断NS金标准,将患者分为NS组(36例)和非NS组(88例),收集患者相关临床资料,评价电化学发光免疫分析(ECLIA)和荧光螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)对NS的诊断效能。结果ECLIA检测CSF梅毒特异性总抗体诊断NS的最佳临界值为19.1,AUC为0.964(95%CI:0.914~0.989),灵敏度为92.05%,特异度为94.44%;FTA-ABS检测CSF免疫球蛋白G(IgG)诊断NS的AUC为0.878(95%CI:0.810~0.930),灵敏度为97.22%,特异度为78.41%;FTA-ABS检测CSF免疫球蛋白M(IgM)诊断NS的AUC为0.650(95%CI:0.560~0.730),灵敏度为30.56%,特异度为98.86%。结论FTA-ABS检测CSF IgG诊断NS的灵敏度最高,但其操作复杂,可考虑作为NS的阴性排除试验;FTA-ABS检测CSF IgM诊断NS的灵敏度低但特异度较高,可以考虑作为NS活动感染指标;ECLIA检测CSF anti-TP诊断NS的灵敏度和特异度较好,而且操作简便及自动化程度高,可考虑作为筛查试验。

电化学发光免疫法测定梅毒螺旋体抗体指数在神经梅毒诊断中的应用

目的探讨梅毒螺旋体(Treponema pallidum,Tp)特异性抗体指数对神经梅毒(neurosyphilis,NS)诊断及分期、分型的应用价值。方法选取2020年3月—2022年12月于四川大学华西医院诊断为NS的患者50例为实验组,另选取同期非NS的梅毒患者50例为对照组,收集患者脑脊液/血清样本对和临床资料。应用美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP06-Ed2文件评估电化学发光免疫法检测Tp特异性抗体的线性范围,并计算纳入样本的抗体指数。使用相关系数评价Tp抗体指数、IgG指数、IgG合成率、白蛋白商与其他临床指标的相关性,运用受试者工作特征(ROC)曲线比较上述指标对NS的诊断效能。结果所有血清和脑脊液样本的线性偏差均在允许线性偏差内,线性验证通过。与非NS组相比,Tp抗体指数在NS组中显著升高(P<0.05),但在不同分型、不同严重程度和是否接受治疗的NS组间,其差异无统计学意义(P>0.05)。Tp抗体指数、IgG指数、IgG合成率与血清Tp抗体、脑脊液Tp抗体、微量蛋白、有核细胞计数均呈正相关关系(P<0.05)。以14.99作为NS诊断的临界值,Tp抗体指数的诊断敏感度为74.0%(95%CI:60.5%~84.1%),特异度可达94.0%(95%CI:83.8%~98.4%),ROC曲线下面积为0.897,高于白蛋白商、IgG指数和IgG合成率的曲线下面积。结论本研究发现Tp抗体指数在NS患者中显著升高,具有较好的诊断敏感度和特异度,可为NS的诊断提供参考。

支气管肺泡灌洗液半乳甘露聚糖试验对侵袭性肺曲霉菌病的诊断价值

目的评价支气管肺泡灌洗液(BALF)半乳甘露聚糖(GM)质量浓度对侵袭性肺曲霉病的诊断价值。方法参照欧洲癌症研究和治疗组织/侵袭性真菌感染协作组(EORTC/IFICG)和美国真菌病研究组(MSG)标准、美国感染病学会(IDSA)指南,将我校华西医院295例高危感染侵袭性肺曲霉病(IPA)患者分为IPA确诊组(42例)、临床诊断组(68例)、拟诊组(61例)和排除组(124例)。采用酶联免疫吸附法试剂盒检测患者BALF中GM质量浓度(BALF GM试验)、血清中GM的质量浓度(血清GM试验),以临床确诊和临床诊断侵袭性肺真菌感染(invasive pulmonary fungal infection,IPFI)为金标准(+),以排除为金标准(-),以GM试验中GM值≥拟定的GM阈值为诊断性试验阳性,并绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线),了解BALF GM检测在不同阈值下对IPFI的诊断效率,以约登指数最大确定本研究BALF GM的最佳诊断点。结果以BALF GM结果做ROC曲线,曲线下面积为0.932,当BALF GM值为1.5ng/mL时,以此为最值诊断点,其敏感性为87.5%,特异性96.7%,阳性预测值为87.5%,阴性预测值为96.7%。BALF GM值和血清GM值均为确诊组>临床诊断组>排除组,差异有统计学意义(P<0.05);血清GM阈值以0.5ng/mL为临界值,BALF的GM阈值以1.5ng/mL为临界值,计算阳性率,发现BALF GM在确诊组、临床诊断组的阳性率高于血清组(P<0.05);并且血清GM中存在较高的假阳性及假阴性。结论测定BALF的GM浓度具有快速、准确、高灵敏度和特异性的优点,有助于IPA的早期诊断。

产单核细胞李斯特菌感染的临床和实验室检查分析

目的分析产单核细胞李斯特菌感染的临床和实验室特点,以期为李斯特菌感染的临床诊断和治疗提供一定的依据。方法回顾性分析2012年1月至2016年10月间四川大学华西医院收治的26例产单核细胞李斯特菌败血症和脑膜炎患者的临床资料和实验室检查,同时收集26例其他细菌性脑膜炎患者的脑脊液检查结果作为对照。结果 26例产单核细胞李斯特菌感染的患者中,14例为败血症,12例为脑膜炎。年龄大于50岁的患者居多,占46.2%。22例住院患者中18例(81.8%)患有基础疾病,9例(40.9%)患者曾接受过糖皮质激素或者免疫抑制剂治疗。20例确诊后经治疗的患者中,17例好转出院,3例预后不佳,30.0%(共6例,好转患者4例,预后不佳2例)的患者接受了不恰当的经验性治疗。脑脊液检查结果显示产单核细胞李斯特菌脑膜炎患者脑脊液白细胞和蛋白质升高,葡萄糖降低,58.3%以多个核细胞增多为主。与其他细菌性脑膜炎相比,产单核细胞李斯特菌脑膜炎患者脑脊液白细胞、蛋白质和氯水平差异无统计学意义(P>0.05),但葡萄糖水平更高(P=0.001)。结论产单核细胞李斯特菌的感染主要发生在免疫低下和老年人中。产单核细胞李斯特菌脑膜炎脑脊液检查可能缺乏典型的细菌性脑膜炎改变,脑脊液葡萄糖水平较正常水平降低不明显。

三种SARS-CoV-2抗体胶体金试剂诊断效能评价及假阳性控制策略探讨

目的探讨胶体金免疫层析法(GICA)在新型冠状病毒(SARS-CoV-2)检测中的价值。方法收集四川大学华西医院2020年1至2月期间12例SARS-CoV-2感染患者的33份血清,以及45例排除SARS-CoV-2感染患者的45份血清,采用三种不同厂家的GICA检测试剂盒进行检测。结果三种GICA试剂的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为66.7%~90.9%、73.3%~100.0%、71.4%~100.0%和80.4%~91.7%。漏诊率为9.1%~33.3%,误诊率为0~26.7%,约登指数为0.64~0.79。检出率随样本稀释滴度的增加而降低,1∶4及以上滴度水平时所有试剂的阳性检出率均超过50%。检测干扰因素主要包括人类免疫缺陷病毒感染、高类风湿因子、溶血。结论临床实验室应注意不同试剂的检测能力和潜在交叉反应的差异,或使用多种抗体的组合。

心血管外科术后血流感染的病原学特征分析

目的分析心血管外科术后血流感染的病原学特征,为该类疾病的预防和治疗提供参考。方法回顾性分析2015年1月至2016年12月四川大学华西医院行心血管外科手术后发生血流感染61例患者的临床资料和病原学资料,其中男36例、女25例,平均年龄(48.2±17.1)岁,65.6%(40/61)的患者基础疾病是风湿性心脏病。结果从61例患者血培养标本共分离到病原菌65株,革兰阳性菌、革兰阴性菌和真菌分别占56.9%(37/65)、35.4%(23/65)和7.7%(5/65),菌株以链球菌属最多(19/65,29.2%),其次是表皮葡萄球菌(8/65,12.3%)、金黄色葡萄球菌(6/65,9.2%)、鲍曼/醋酸钙不动杆菌复合体(5/65,7.7%)和大肠埃希菌(5/65,7.7%)。链球菌属对红霉素和克林霉素的耐药率分别为73.4%(14/19)和63.2%(12/19),对头孢吡肟、万古霉素和利奈唑胺均敏感,葡萄球菌属对苯唑西林耐药率为71.4%(10/14),鲍曼/醋酸钙不动杆菌复合体均为多重耐药株(5/5,100.0%),对亚胺培南耐药率为80.0%(4/5);大肠埃希菌中产超广谱内酰胺酶菌株占80.0%(4/5)。结论心血管外科术后血流感染的常见病原菌是链球菌属。葡萄球菌属和革兰阴性杆菌耐药性较高。

四川地区多中心血流感染中非发酵菌的流行病学研究

目的回顾分析四川地区住院患者血流感染(bloodstream infection,BSI)中非发酵菌的病原菌分布和常见抗生素敏感性结果,探讨四川地区血流感染中非发酵菌的病原学特征。方法收集2015年1月1日至2017年12月31日四川地区9家三甲医院所有血培养分离的非发酵菌,回顾性分析其菌种分布和耐药情况。结果共纳入分离出病原菌6 291株。其中,革兰阴性菌3 674株(58.4%),革兰阳性菌2 617株(41.6%),革兰阳性菌中葡萄球菌属1 895株(30.1%),链球菌372株(5.9%),肠球菌317株(5.1%),其他革兰阳性菌33株(0.5%)。革兰阴性菌中肠杆菌科3 191株(50.7%),非发酵菌389株(6.2%),其他革兰阴性菌94株(1.5%)。非发酵菌中分离率前三位的菌株依次为铜绿假单胞菌(136株,35.0%)、鲍曼不动杆菌(126株,32.4%)、嗜麦芽窄食单胞菌(33株,8.5%);非发酵菌在内科、ICU和外科中的分布为167株(42.9%)、112株(28.8%)和82株(21.1%)。铜绿假单胞菌对头孢吡肟、环丙沙星、庆大霉素的耐药率分别为16.5%、10.7%、9.9%,耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌(carbapenems-resistant Pseudomonas aeruginosa,CR-PA)分离率为13.6%,未见对多黏菌素耐药菌株;鲍曼不动杆菌对除米诺环素和多黏菌素之外的抗生素耐药率均超过30%,耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌(carbapenems-resistant Acinetobacter baumannii,CR-AB)分离率为75.7%。嗜麦芽窄食单胞菌对左旋氧氟沙星、复方新诺明和头孢他啶的耐药率分别为0%、0%和37.0%,洋葱伯克霍尔德菌对左旋氧氟沙星、复方新诺明和头孢他啶的耐药率分别为10.5%、4.2%、19%,均未超过30%。结论四川地区血流感染中非发酵菌的分离率为6.2%,以铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌为主,多分离于内科患者。非发酵菌在临床科室间分布的差异较大,鲍曼不动杆菌多重耐药菌检出率高,其他非发酵菌抗生素敏感性较好。

新型冠状病毒肺炎疫情防护措施下某三甲医院流感病毒抗原阳性率分析

流感是由流感病毒引起的急性呼吸道传染疾病,一般暴发于春季和冬季,其中甲型流感病毒具有很强的变异性,是引起人类、家畜及禽类流感流行的主要病毒[1],乙型流感病毒次之,丙型流感病毒相对稳定。目前常用的流感快速诊断方法是胶体金免疫层析法(GICA),相较于作为金标准的核酸检测,有速度快、费用低、便携性好的特点。本研究使用GICA法对四川大学华西医院2018—2020年门诊、急诊及住院共23888例有呼吸道症状患者进行甲型/乙型流感病毒抗原检测,以了解在新型冠状病毒肺炎(以下简称"新冠肺炎")疫情下,执行以佩戴口罩为主要防护方式的高人群覆盖率的呼吸道防护措施对普通流感流行率的影响,现报告如下。

四川大学华西医院2016年—2018年结核分枝杆菌耐药情况分析

目的了解四川大学华西医院结核分枝杆菌复合群耐药情况,分析其耐药特点,为耐药结核病的监测提供参考。方法采用结核分枝杆菌药物敏感性(药敏)试剂盒对2016年1月—2018年3月四川大学华西医院实验医学科微生物室结核培养阳性的菌株进行利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素4种一线抗结核药物和卷曲霉素、氧氟沙星、乙硫异烟胺、对氨基水杨酸、左氧氟沙星、莫西沙星、利福布丁、阿米卡星、卡那霉素、氯苯吩嗪10种二线抗结核药物的敏感性试验。结果共纳入患者130例(菌株130株),其中初治患者82例(菌株82株),复治患者48例(菌株48株),结核分枝杆菌复合群总耐药率为37.69%,初治患者耐药率(28.05%)明显低于复治患者(54.17%),差异有统计学意义(χ2=8.794,P=0.003)。初治患者多重耐药率(6.10%)明显低于复治患者(25.00%),差异均有统计学意义(χ2=9.517,P=0.002)。初治患者对一线抗结核药物异烟肼、利福平和链霉素的耐药率(23.17%、8.54%、7.32%)明显低于复治患者(45.83%、41.67%、29.17%),差异有统计学意义(P<0.05)。初治患者对二线抗结核药物氧氟沙星、莫西沙星、利福布丁和乙硫异烟胺的耐药率(9.76%、8.54%、7.31%、4.88%)明显低于复治患者(39.58%、27.08%、25.00%、22.92%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论应加强结核初治患者的规范化治疗,加大对复治结核患者的治疗和管理,预防耐药患者尤其是耐多药患者的产生和传播。

2001～2017年某大型综合医院新发HIV/AIDS患者的临床流行病学分析

目的分析2001～2017年新发现人类免疫缺陷病毒(HIV)/获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者在某大型综合医院的临床流行病学特征和趋势,为综合医院的HIV/AIDS防治工作提供科学依据。方法回顾性纳入四川大学华西医院2001～2017年新发HIV/AIDS病例的临床流行病学资料,分析确证阳性率及新发HIV/AIDS患者的分层分布,并分析及其传播途径的分布特征。结果 2001～2017年于四川大学华西医院接受HIV筛查的患者共1 520 228例,其中门急诊患者285 983例,住院患者1 234 245例。共确证新发HIV/AIDS患者4 037例,总确证阳性率为0.27%,门急诊患者和住院患者2001～2013年确证阳性率增加,2014～2017年略有下降。男性、女性新发HIV/AIDS患者分布整体比例为3.49∶1,历年比例在1.65∶1和5.08∶1之间波动;以汉族(88.23%)、低学历(58.66%)、已婚者(54.75%)、农民/牧民(26.33%)为主要人群;青少年(15～29岁)、中老年群体(≥50岁),高学历群体(高中以上),未婚群体分布均呈增长趋势。传播途径分析显示,17年间,异性传播比例稳定在60%左右,同性传播途径增长明显(χ~2_(趋势)=14.436,P<0.005),从2008年开始增长后稳定在15%左右。注射毒品(χ~2_(趋势)=71.633,P<0.005)和血液传播(χ~2_(趋势)=16.672,P<0.005)途径均明显下降。899例女性新发HIV/AIDS患者中77.20%为异性传播,无同性传播;3138例男性中61.41%为异性传播,18.10%为同性传播。同性传播随年龄的增大而下降,异性传播随着年龄的增大而上升。母婴传播则集中在0～15岁(100%)。结论 17年来,四川大学华西医院新发HIV/AIDS经历长期增长后渐入平缓期,青少年、中老年,高中以上学历,未婚群体增长明显。注射毒品和血液传播HIV/AIDS的途径得到控制,异性传播仍为主要传播途径。

区分抗原抗体HIV检测策略的临床应用

人体感染HIV后,各种HIV检测试剂的检出能力通常以检测窗口期来评价,HIV RNA是目前检测HIV感染最敏感的指标。p24抗原在感染10天左右即可在血浆中检测到,并常在50天左右被清除,这也是HIV p24抗原检测作为早期感染指标的重要原因。