肠炎沙门菌种特异性PCR及对感染鸭快速检测

根据GenBank登录的肠炎沙门菌(SE)种特异性DNA序列,设计合成了1对能特异性扩增293 bp DNA片段的引物,首次建立了SE的种特异性聚合酶链式反应(PCR)诊断方法。该方法仅需10 h即可获得结果且只能特异性扩增SE,而对照菌株的扩增结果均为阴性;检测SE的最低DNA模板量为50 ng/L,最少检测到的细菌数为19CFU/mL。对10只SE人工感染死亡雏鸭的心、肝和粪便的检测结果与细菌分离的结果符合率为100%,而对脾、脑、法氏囊的检测阳性率极显著(P<0.01)高于细菌分离率;应用该技术对临床送检的228只疑似SE感染死亡鸭病例检测结果也显著高于细菌分离法。研究结果表明,建立的PCR方法检测SE具有较好的特异性和敏感性,比传统的细菌分离鉴定更加快捷、准确,可用于SE感染疑似病例的检测及其分子流行病学调查。

沙门氏菌耐药机制研究进展

综述了沙门氏菌耐药机制的研究进展。

肠炎沙门氏菌种特异性FQ-PCR快速检测方法的建立

根据肠炎沙门氏菌（SE）种特异性DNA序列，设计合成了一对能特异性扩增130bp片段的引物和TaqMan探针，首次建立了SE的种特异性荧光定量聚合酶链式反应（FQ-PCR）诊断方法。该法在SEDNA含量为9×10^8-9X104拷贝有较好的线性关系；检测SEDNA模板的灵敏度为4拷贝／μL，检测SE细菌数的灵敏度为6CFU／mL；特异性试验表明只对SE基因组呈阳性反应。分别应用该技术和传统细菌分离法检测60份来自人工感染鸭、小白鼠和肉兔的心、肝、脑和直肠粪便，结果显示两种方法对心、肝、直肠粪便的阳性检测结果符合率为100％，而FQ-PCR对脑的阳性检测率极显著（P〈0．01）高于细菌分离。研究结果表明，该方法快速、灵敏、特异、重复性好且能实时定量检测，可用于SE分离鉴定、SE感染疑似病例检测、SE体内动态分布规律研究及其分子流行病学调查。

DNA疫苗研究进展

DNA疫苗的研究已成为疫苗研究领域的热点,被称为疫苗的第3次革命。分析了DNA疫苗的优缺点、免疫机制、优化策略等。

广东省东莞地区农贸市场肉鸡屠宰过程中肠炎沙门氏菌污染情况调查

农贸市场简易宰杀的鸡胴体存在被肠炎沙门氏菌污染的风险,对消费者的健康构成威胁。为了监测广东省东莞市肉鸡在屠宰过程中被沙门氏菌污染的情况,在东莞市某镇随机抽取来自10个农贸市场经三鸟档主宰杀的100份鸡肉,对其进行了肠炎沙门氏菌检测,调查结果表明,该镇农贸市场宰杀的鸡胴体肠炎沙门氏菌检出率仅为1%,其肠炎沙门氏菌污染情况处于极低水平。

应用正向间接血凝试验检测山羊痘抗体

采用硫酸铵盐析、Sephadex G-200柱层析的方法纯化山羊痘病毒,以病毒抗原致敏绵羊红细胞建立了山羊痘正向间接血凝试验,并进行了最佳试验条件的摸索。结果表明,试验所制备的诊断液能与山羊痘参考阳性血清发生特异性凝集,其凝集现象能被山羊痘阳性抗原特异性抑制,与其它常见的动物病阳性血清无交叉反应。用本方法及琼脂扩散试验对山羊痘血清进行检测,IHA阳性检出率为89.1%(41/46);而AGP阳性检出率为34.8%(16/46)。表明正向间接血凝试验比琼脂扩散试验敏感性高。本次试验制备的正向间接血凝试验诊断液可用于兽医临床上进行快速诊断。

沙门氏菌检测方法研究进展

沙门氏菌是一种重要的人畜共患病,建立一种快速而准确的检测方法一直是沙门氏菌检验研究的核心问题。笔者对沙门氏菌的检测进展进行了概述。

肠炎沙门氏菌感染与宿主的关系

肠炎沙门氏菌病是一种重要的人畜共患病,其危害性备受关注。笔者就感染该菌与宿主关系进行了分析,旨在提高对该病的认识,以便减少该病的发生,保障人畜健康。

沙门氏菌耐药性研究进展

沙门氏菌的耐药机制不是独立存在的,其耐药程度的高低是由2种或多种不同的耐药机制共同作用的结果,对沙门氏菌的耐药研究进展进行了概述。

实时定量PCR试验设计原则及应用

笔者对实时定量PCR试验设计原则及其在医学、分子生物学、食品检测的应用上进行了概述。

禽流感病毒研究进展

依据禽流感病毒的致病特性、抗原蛋白特性和宿主细胞受体特点,笔者从分子水平上就禽流感病毒基因组、宿主特异性和致病性等方面进行了综述。

肠炎沙门氏菌感染及其检测方法研究进展

该文主要介绍了宿主对肠炎沙门氏菌(SE)的防御能力、SE感染与宿主细胞的关系、SE在禽类中多呈隐性感染的原因分析,并对当前SE检测方法的研究进展作了一综述。

整合子耐药机制研究进展

细菌对抗菌药物的耐药问题日趋严重,而且对这一问题的研究也成了目前的热点。整合子是细菌耐药机能的重要内容。对整合子耐药机制的研究进展进行了综述,并对其发展方向作了展望。

干扰素研究进展

干扰素具有抗病毒和抗肿瘤等功能,对一些疾病具有较好的治疗效果,已成为一个研究热点。笔者对干扰素的研究进展进行了概述。

皂角刺总黄酮对肝癌HepG2细胞增殖、凋亡和侵袭能力影响的实验研究

目的:研究皂角刺总黄酮对肝癌HepG2细胞增殖、凋亡和侵袭的影响,探讨其抗肿瘤作用机制.方法:通过体外培养人肝癌HepG2细胞,用不同浓度的皂角刺总黄酮处理后,采用WST-1法检测皂角刺总黄酮对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用,琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段化,流式细胞仪AnnexinV/PI双染法检测细胞的凋亡率,划痕实验和Transwell小室检测皂角刺总黄酮对HepG2细胞侵袭、转移的影响.结果:不同浓度的皂角刺总黄酮作用于细胞48 h后,能显著抑制HepG2细胞的增殖,随着药物浓度的增加,抑制作用增强,IC50为(190.62±0.89)mg/L;流式AnnexinV/PI双染法检测显示,不同浓度的皂角刺总黄酮均可诱导HepG2细胞凋亡;不同浓度的皂角刺总黄酮处理组发现凋亡细胞所特有的DNA ladder条带;皂角刺总黄酮可降低HepG2细胞的黏附能力,使Tr-answell小室膜上的肝癌细胞明显减少,并且呈剂量依赖性.结论:皂角刺总黄酮能明显抑制肝癌HepG2细胞的增殖、侵袭能力和诱导其凋亡.

竹叶青蛇毒L-氨基酸氧化酶(LAAO)基因的克隆及序列分析

为进一步研制新型的抗肿瘤药物打基础,试验以竹叶青蛇毒毒腺的RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增L-氨基酸氧化酶(LAAO)基因,经克隆和测序并通过Blast分析。结果表明:LAAO基因与GenBank中公布序列编码的竹叶青蛇毒L-氨基酸氧化酶基因的序列(AY277739)同源性达98.23%。

对东莞市大岭山食品公司猪旋毛虫病的情况调查

笔者通过30d的时间，每天随机抽取150条来自东莞市大岭山食品公司的待宰生猪，通过临床症状判断、旋毛虫抗体金标检测条、显微镜检测等方法进行猪旋毛虫病调查。结果4500份样品均未检出猪旋毛虫病，日抽检数量约占日均屠宰量的30%。

农贸市场肉鸭屠宰过程中肠炎沙门氏菌污染的调查

近年来,肠炎沙门氏菌污染的禽产品问题已引起公共卫生界的高度重视。本文作者通过对来自东莞市某镇的10个农贸市场的200份经三鸟档主宰杀的肉鸭肉进行了肠炎沙门氏菌检测,旨在加强肉鸭在屠宰过程中的肠炎沙门氏菌污染的监测。结果显示,鸭肉中肠炎沙门氏菌污染阳性率为1%,表明某镇农贸市场宰杀的肉鸭胴体肠炎沙门氏菌检测率处于较底水平,但存在食品安全隐患。

东莞地区一株鸡白痢沙门氏菌的分离鉴定及药敏试验

2011年12月,广东省东莞市某镇一养殖场内部分10日龄雏鸡发病死亡,无菌操作采集组织病料进行细菌的分离培养与血清型鉴定。结果表明,分离菌株为鸡白痢沙门氏菌,结合雏鸡发病情况、临床症状和病理变化等确诊雏鸡死于鸡白痢沙门氏菌感染。对分离菌株进行药敏试验,发现该分离菌对丁胺卡那、庆大霉素和呋喃妥因敏感。