抑制EB病毒阳性弥漫性大B细胞淋巴瘤增殖的抗TMD5单克隆抗体的筛选和效果评价

目的:筛选抗爱泼斯坦—巴尔病毒(EBV)潜伏期膜蛋白-1中跨膜结构域5(TMD5)单克隆抗体并评价其抑制EB病毒阳性弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的效果。方法:人工合成TMD5肽段,用此TMD5肽段免疫BALB/c小鼠;PEG法制备杂交瘤;ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞;有限稀释法制备单克隆;使用阳性孔单克隆细胞免疫小鼠制备腹水;western blotting法和ELISA法分别对腹水中的单克隆抗体进行鉴定和效价测定;体外CCK-8法测定腹水对Sp2/0细胞存活能力的影响;Annexin VFITC/PI双标记流式细胞术测定腹水对Sp2/0细胞凋亡率的影响;在体内裸鼠荷瘤实验测定腹水对裸鼠荷瘤生长的影响。结果:成功备制13个杂交瘤,其中3个为阳性杂交瘤,分别为2B11、5D07和6F04,阳性率为23%。以5D07孔单克隆细胞制备的腹水以1∶105稀释后,阳性/阴性腹水单克隆抗体抗TMD5效价比为6.763,阳性/Sp2/0的效价比为5.952,效价最高。与PBS组相比,2B11组和5D07组DB细胞48 h和72 h增殖能力降低,凋亡率升高,裸鼠荷瘤较小(P<0.05),6F04组上述测定指标无明显差异(P>0.05)。与2B11组相比,5D07组DB细胞48 h和72 h增殖能力降低,凋亡率升高,裸鼠荷瘤较小(P<0.05)。结论:通过杂交瘤法筛选出的5D07单克隆抗体抗TMD5效价高,在体外和在体裸鼠荷瘤实验抗EBV+DLBCL淋巴瘤活性良好。

靶向EBV潜伏膜蛋白1的单克隆抗体促进HIV相关EBV阳性伯基特淋巴瘤细胞凋亡的分子机制

目的制备和筛选抑制伯基特淋巴瘤(Burkitt lymphoma,BL)的抗EBV潜伏膜蛋白1(latent membrane protein-1,LMP1)单克隆抗体。方法人工合成EBV潜伏膜蛋白1的跨膜结构域5(transmembrane domain 5,TMD5),并以此为抗原,采用杂交瘤法制备抗TMD5单抗。ELISA法测定小鼠腹水中的抗体效价。7-氨基放线菌素D(7-Aminoactinomycin D,7-AAD)/Annexin V-PE双标记流式细胞术和JC-1染色联合流式细胞术测定线粒体膜电势评估单抗对BL细胞系Daudi细胞的促凋亡活性。蛋白质印迹法测定Daudi细胞内促存活信号通路p38-MAPK/IKK/NF-κB相关蛋白的表达水平。结果经过2轮筛选,获得R2-2-5E-6C和R2-2-8D-3A两种单抗,这2种单抗均能与TMD5发生抗体-抗原特异性结合,而与GAPDH无免疫反应。与NC组相比,R2-2-5E-6C组和R2-2-8D-3A组处理后的Daudi细胞中Annexin V+7-AAD+细胞所占百分比增加;JC-1荧光强度<104的细胞所占百分比增加;胞内p38-MAPK、IKK和NF-κB的表达水平降低(P<0.05)。结论筛选获得的抗TMD5单抗R2-2-5E-6C和R2-2-8D-3A可通过抑制LMP1介导的p38-MAPK/IKK/NF-κB信号通路的活性促进BL凋亡。

南昌市抗病毒治疗艾滋病患者生存状况及影响因素分析

目的探讨南昌市抗病毒治疗艾滋病患者的生存状况及影响因素,为提高艾滋病抗病毒治疗工作的效果提供参考依据。方法从中国疾病预防控制信息系统-艾滋病综合防治信息系统中,选取2004年5月—2012年10月南昌市所有接受免费抗病毒治疗的符合纳入与排除标准的艾滋病患者599例为研究对象。收集患者基本情况（如性别、年龄、婚姻状况等）、患者临床相关资料（如感染途径、WHO临床分期、抗病毒治疗方案、机会性感染的种类、CD4＋细胞计数等）、患者的生存结局（分为继续治疗、死亡、停药、失访）、生存时间。采用寿命表法计算患者的生存率,采用Cox比例风险回归模型分析患者生存时间的影响因素。结果 599例患者感染途径以性传播〔473例（79.0%）〕为主;WHO临床分期以Ⅲ期〔232例（38.7%）〕、Ⅳ期〔191例（31.9%）〕为主;抗病毒治疗方案以3种抗病毒药物联用〔472例（78.8%）〕为主;机会性感染排在前3位的种类为持续或间断发热122例（20.4%）、结核病100例（16.7%）、持续腹泻（〉1个月）41例（6.8%）;CD4＋细胞计数为（125.8±105.1）个/μl。随访截止时,共有490例（81.8%）继续治疗,80例（13.4%）死亡,12例（2.0%）停药,17例（2.8%）失访;生存时间为（6.7±0.2）年,95%CI为（6.4,7.1）年。第1~5年累积生存率分别为90.24%、85.21%、82.80%、79.65%、76.92%。Cox比例风险回归分析结果显示,年龄、血源传播（与其他传播相比）、WHO临床分期、持续腹泻（〉1个月）、反复严重的细菌性肺炎、脑淋巴瘤或B细胞非霍奇金淋巴瘤是艾滋病患者生存时间的影响因素（P〈0.05）。结论南昌市抗病毒治疗艾滋病患者5年后生存率较为稳定。宜早发现、早诊断、早纳入抗病毒治疗;加强年龄较大者、血源传播者、WHO临床分期Ⅲ期及以上者、有机会性感染患者的治疗和管理,确保抗病毒治疗效果,有效提高艾滋病患者的生存率。

腰大池和脑室外引流术在艾滋病合并隐球菌性脑膜炎患者颅内高压治疗中的应用

目的探讨腰大池和脑室外引流术对获得性免疫缺陷综合征（亦称艾滋病）合并隐球菌性脑膜炎患者颅内高压的治疗效果。方法共138例隐球菌性脑膜炎合并颅内高压患者[人类免疫缺陷病毒（HIV）阳性36例、HIV阴性102例]，抗隐球菌治疗的同时，76例行腰大池引流术、改良腰大池引流术或脑室外引流术（HIV阳性17例、HIV阴性59例），62例行腰椎穿刺鞘内给药（HIV阳性19例、HIV阴性43例），比较引流组与鞘内给药组以及两组HIV阳性亚组与H1V阴性亚组患者引流管留置时间、眩脊液隐球菌培养转阴时间、并发症情况，并进行疗效评价。结果引流组患者治疗1周内颅内高压症状即明显改善。首次引流管置管中位时间30（17，35）d，其中HIV阳性者与HIV阴性者差异无统计学意义[28（15，32）d对30（18，35）d；U=-1．459，P=0．144]。引流组脑脊液隐球菌培养转阴中位时间41（26，58）d，其中HIV阳性者与HIV阴性者差异无统计学意义[46（28，66）d对36（21，45）d；U=-1．608，P=0．108]；鞘内给药组脑脊液隐球菌培养转阴中位时间42（32，65）d，其中HIV阳性者与HIV阴性者差异无统计学意义[52（38，68）d对39（30，62）d；U=-0．401，P=0．688]；而引流组与鞘内给药组差异有统计学意义（U=-2．117，P=0．034）。引流组治疗总有效率为86．84％（66／76），其中HIV阳性者与HIV阴性者差异无统计学意义[14／17对89．83％（53／59）；x2=0．172，P=0．678]；鞘内给药组为72．58％（45／62），其中HIV阳性者与HIV阴性者差异无统计学意义[8／19对86．05％（37／43）；x2=0.023，P=0．880]；而引流组与鞘内给药组差异有统计学意义（x2=4．413，P=0．036）。结论早期采用腰大池或脑室外引流术治疗艾滋病合并隐球菌性脑膜炎患者能够有效控制颅内高压、缩短有症状病程、提高临床疗效。

艾滋病合并肺结核的临床特点分析和治疗

目的探讨艾滋病合并肺结核病的临床特点以及治疗方法,为今后的临床诊治工作提供可靠的参考依据。方法抽取临床明确诊断的艾滋病合并肺结核患者32例作为观察组,另抽取同期获得临床明确诊断的HIV阴性单纯肺结核患者32例作为对照组,对2组患者的临床资料展开回顾性对比分析。结果经统计发现,观察组患者发热发生率为90.63%,对照组发热发生率为56.25%,2组差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者体质量减轻发生率为100.00%,对照组为28.13%,2组差异有统计学意义(P<0.05);2组咳嗽、咯血和贫血比较差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者与对照组患者粟粒样改变、浸润灶等影像学特征比较差异无统计学意义;2组患者在合并空洞、合并胸腔积液和淋巴结转移上差异有统计学意义(P<0.05);观察组PPD反应阳性率较对照组发生显著降低(P<0.05)。结论艾滋病合并结核病的临床表现复杂多样,不具有典型性,临床应对其早期筛查工作给予重视。

HIV/AIDS合并结核分枝感染的发病率的分析

目的对HIV/AIDS合并结核分枝感染的发病率的分析,为今后的TB/HIV双重感染临床诊治及防控工作提供可靠的参考依据。方法抽取在2013年5月-2015年5月间我院收治获得明确诊断的HIV/AIDS患者200例,对其进行结核分枝杆菌感染的筛查。结果 HIV/AIDS合并结核病时临床表现具有多样性、混合型、播散性等特点,主要为发热,咳嗽,腹胀腹痛腹泻,全身淋巴结肿大以及体重减轻等症状;传播途径以性传播为主;并发活动性结核感染时患者CD4+T淋巴细胞水平明显降低;200例HIV/AIDS患者中确诊合并结核病57例,感染率28.5%,死亡率5例,病死率2.5%,结核潜伏感染21例,结核潜伏感染率10.5%。结论 HIV/AIDS并发结核分枝杆菌感染患者的临床表现较为复杂,患者免疫力低下,治疗难度大,特别是耐药结核菌的感染,需要较长时间的抗结核治疗,在今后的临床工作中应加强该类患者的临床筛查,为临床的早期诊断和治疗提供可靠的参考依据。

艾滋病合并结核病72例临床分析

目的探讨艾滋病合并结核病的临床特点,以提高对艾滋病合并结核病的诊断治疗水平。方法对72例艾滋病合并结核病患者的临床资料进行回顾性分析。结果艾滋病合并结核病临床表现复杂多样,全身症状明显,常有淋巴结肿大(浅表或纵膈或腹腔淋巴结),往往是多种结核病类型重叠,影像学表现肺部阴影无明显好发部位,痰检、结核抗体、T-SPOT及PPD试验阳性率均偏低,诊断困难,结核病大多出现在艾滋病患者出现其他机会性感染之前,对于CD4+T淋巴细胞计数极低的患者常常有多种机会性感染并存,且HAART治疗过程中易出现免疫重建结核病,治疗难度大。结论艾滋病合并结核病患者应做到早发现、早治疗,减少传播,以获得较好的疗效和转归,延长患者寿命和改善生活质量。

全程护理干预在耐多药肺结核患者中的应用

目的:探讨全程护理干预在耐多药肺结核患者中的应用效果。方法:选取收治的耐多药肺结核患者130例,根据护理方式分为观察组和对照组各65例,两组均采用电子气管镜介入治疗,对照组采取常规护理,观察组采取全程护理干预,对比两组护理效果。结果:观察组治疗依从性、生活质量明显好于对照组(P<0.05),并发症发生率低于对照组(P<0.05),第6、9、12个月的痰菌阴转率、病灶吸收率高于对照组(P<0.05)。结论:在电子气管镜介入治疗耐多药肺结核过程中采取全程护理干预,可促进介入治疗顺利实施,提高治疗依从性,提升患者生命质量。

心理干预对耐药肺结核患者T淋巴细胞亚群的影响

将45例确诊为耐药肺结核的患者随机分为干预组和治疗组,干预组患者化疗开始即接受心理干预,心理干预持续2个月。两组患者分别于抗结核治疗前及抗结核治疗后2个月测定T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+。结果抗结核治疗2个月后两组患者的CD3+、CD4+、CD8+均明显升高,与治疗前相比差异有显著性(P<0.05),干预组的升高程度高于对照组,差异有显著性(P<0.05)。认为心理干预可以提高耐药肺结核患者T淋巴细胞亚群的免疫功能。

江西省艾滋病成年治疗患者分布及临床特征

目的了解江西省艾滋病（acquired immunodeficiency syndrome,AIDS）成年治疗患者的分布与临床特征,为制订合理的AIDS防治方案与政策提供依据。方法收集江西省2004—2012年开展的2 194例AIDS成年治疗患者的基本情况及临床状态资料,采用描述性流行病学方法分析其分布规律与临床特征。结果 2 194例AIDS成年治疗患者的分布规律为：性别以男性为主占71.4%,年龄以30~40岁为主占31.7%,婚姻状况以已婚或同居者为主占60.8%。WHO临床分期分布：Ⅰ期35.2%、Ⅱ期23.0%、Ⅲ期22.4%、Ⅳ期19.4%。感染途径以性传播为主占79.6%。临床特征为：患者机会性感染率为31.9%,不同临床分期患者的机会性感染率有所不同（P〈0.001）;其中前5位机会性感染疾病分别为持续或间断发热17.2%、皮肤损害5.7%、持续腹泻5.6%、带状疱疹5.2%、鹅口疮3.6%。有37.5%患者出现发热、咳嗽咳痰、夜间盗汗、腹泻、恶心、视力下降、皮疹、淋巴结肿大等1种或几种症状体征。7.9%最近1年患有肺结核。乙、丙肝阳性率分别为16.8%、7.5%。结论江西省AIDS成年治疗患者以男性、青壮年、性传播途径为主;机会性感染率较高,机会性感染与临床分期关联性强,特征性临床症状较多且伴随较多乙、丙肝合并感染。宜针对AIDS治疗患者的特征建立健全相关AIDS的综合防治措施,以控制AIDS的播散。

噬菌体生物扩增法检测痰标本中结核分枝杆菌在涂阴肺结核诊断中的应用价值

目的对噬菌体生物扩增法检测痰标本中的结核分枝杆菌在涂阴肺结核诊断中的应用价值进行评价分析,为今后的临床及检验工作提供可靠的理论依据。方法抽取在2009年1月~2013年12月间我院收治的临床确诊涂阴肺结核患者200例,对其痰液标本分别展开噬菌体生物扩增法和罗氏培养法进行结核分枝杆菌检测,并对检测结果进行对比分析。结果经对比发现,噬菌体生物扩增法对结核分枝杆菌的检出率较罗氏培养法检出率显著升高（p〈0.05）。结论采取噬菌体生物扩增法检测痰标本中的结核分枝杆菌的临床价值显著,可使肺结核诊断率得到显著提高,降低误诊和漏诊发生率。

超声电导仪经皮局部透药治疗结核性胸膜炎的临床效果观察

目的探讨超声电导仪经皮局部透药治疗结核性胸膜炎的疗效。方法将我院60例结核性胸膜炎患者随机分成A、B、C三组,各20例,A组采用常规抗结核治疗,B组在A组基础上给予胸腔内注药治疗,C组在A组基础上给予超声电导仪靶向药物治疗,评估三种治疗方法的疗效。结果 B组、C组总有效率明显高于A组,差异有统计学意义(P<0.05),B组、C组间无统计学意义(P>0.05)。C组胸水抽出总量、胸水消失时间、胸膜肥厚程度明显优于A组、B组,差异均有统计学意义(P<0.05))。B组不良反应发生率明显高于A组、C组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论超声电导仪经皮局部透药治疗结核性胸膜炎,疗效好,不良反应小,值得临床推广。

艾滋病合并结核分枝杆菌感染人群治疗方案的分析

目的分析艾滋病(AIDS)合并结核分枝杆菌(TB)感染人群治疗方案。方法选择2013年2月至2015年10月收治的100例艾滋病合并结核分枝杆菌感染患者为研究对象。入院后患者均进行CD4^+T淋巴细胞计数检查。按CD4^+T淋巴细胞计数结果将患者分为4组:A组(CD4^+T淋巴细胞计数≤50μL^(-1),n=25)、B组(50μL^(-1)<CD4^+T淋巴细胞计数≤200μL^(-1),n=26)、C组(200μL^(-1)<CD4^+T淋巴细胞计数≤350μL^(-1),n=24)和D组(CD4^+T淋巴细胞计数>350μL^(-1),n=25)。按照随机数字表法将这4组另分为2个亚组,即A、B、C、D组分别分为对照一组(n=12)和观察一组(n=13)、对照二组(n=13)和观察二组(n=13)、对照三组(n=12)和观察三组(n=12)、对照四组(n=12)和观察四组(n=13)。最后将对照一、二、三、四组共49例患者归为对照组,观察一、二、三、四组共51例患者归为观察组。对照组予抗结核治疗2周后再同时予抗病毒治疗,观察组抗结核治疗4周后再同时予抗病毒治疗,2组具体用药相同,抗结核治疗疗程均为1年,抗病毒药物则一直服用。比较不同方案的治疗效果。结果治疗8周后,对照组与观察组患者治愈率、病死率、治疗失败率及不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05),对照组总医疗费用明显高于观察组(P<0.05)。治疗4周,对照组与观察组病毒抑制率比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗8周,对照组病毒抑制率低于观察组(P<0.05)。结论 AIDS合并TB感染患者抗结核治疗2周后进行ART治疗与抗结核治疗4周后进行ART治疗疗效无明显差异性,临床应针对患者实际情况择优选择治疗方案。

噬菌体检测技术(PhaB)检测抗结核药物乙胺丁醇的耐药性

目的探讨噬菌体检测技术(PhaB)在检测抗结核药物乙胺丁醇耐药性中的价值。方法应用PhaB测定30株结核分枝杆菌(MTB)临床分离株对乙胺丁醇(E)的耐药性,并与罗氏药敏结果比较。结果PhaB检测E药敏结果与罗氏药敏结果符合率为90%。如以绝对浓度法为判断标准,则PhaB检测E药敏的敏感性为95.6%,特异性为71.4%,阳性预测值(PPV)为91.6%,阴性预测值(NPV)为83.2%,准确性为90%。结论PhaB检测E药敏结果与绝对浓度法符合率较高,可作为结核分枝杆菌耐药性的快速筛选方法。

甘利欣联合硫普罗宁治疗抗结核药物性肝炎的疗效观察

目的：探讨甘利欣联合硫普罗宁抗结核药物性肝炎的临床疗效。方法：将2003年1月～2004年12月诊断为抗结核药物性有炎60洲住院患者随机分为治疗组和对照组，前者给予甘利欣联合硫普罗宁治疗，后者单埘常规护肝治疗，对两组疗效进行统计分析，结果；甘利欣联合硫普罗宁的疗效显著优于对照组。结论；甘利欣联合硫普罗宁治疗1周内可明显改善药物性肝炎表现及恢复肝功能作用，对于抗结核药物性肝炎有较高疗效。

艾滋病合并结核病患者抗结核药物血药浓度的研究

目的:比较艾滋病合并结核病人同单纯结核病人抗结核药物血药浓度是否存在差异;比较艾滋病合并结核病病人CD4+T淋巴细胞水平与抗结核药物血药浓度是否存在相关性。方法:高效液相色谱法测定28例艾滋病合并结核病患者及28例单纯结核病人血清中利福平,异烟肼及吡嗪酰胺血药浓度,比较两组病人抗结核药物血药浓度是否存在差异。用流式细胞仪测定艾滋病合并结核病病人CD4+T淋巴细胞水平,比较其与抗结核药物血药浓度是否存在相关性。结果:艾滋病合并结核病组病人利福平血药浓度低于单纯结核病人(t=-6.563,P=0.000)。两组病人异烟肼血药浓度对比无统计学差异(t=-0.675,P=0.506)。两组病人吡嗪酰胺血药浓度对比无统计学差异(t=0.063,P=0.951)。CD4+T淋巴细胞水平与血清中利福平浓度无相关性(r=0.38,P=0.099),CD4+T淋巴细胞水平与血清中异烟肼浓度无相关性(r=0.081,P=0.681),CD4+T淋巴细胞水平与血清中吡嗪酰胺浓度无相关性(r=0.125,P=0.527)。结论:艾滋病合并结核病病人利福平血药浓度低于单纯结核病人。两组病人异烟肼及吡嗪酰胺血药浓度无差异。CD4+T淋巴细胞水平与血清中利福平,异烟肼,吡嗪酰胺血药浓度无相关性。

复治痰菌阳性肺结核264例疗效观察

目的探讨复治痰菌阳性肺结核的临床疗效。方法264例复治痰菌阳性肺结核患者，其中50例未做药敏测定，采用国家制定的标准复治方案；214例已做药敏测定，根据既往用药史和药敏测定结果采用个体化化疗方案。观察264例患者治疗后第3、5、9个月末痰菌阴转率及胸部x线表现情况。结果治疗后第9个月，未做药敏测定的50例患者中痰菌阴转率为66．0％，已做药敏测定的214例患者中痰菌阴转率为58．3％～82．5％。193例患者治疗后胸部x线病灶明显吸收好转，41例病灶无变化，30例病灶恶化。结论对复治肺结核患者，特别是耐单药的肺结核患者采用个体化化疗方案可获得较好的疗效。

HIV感染者/AIDS患者抗病毒治疗后免疫效果及其影响因素分析

目的回顾性分析HIV感染者/艾滋病(AIDS)患者接受抗病毒治疗1年后的免疫效果及其影响因素。方法利用国家艾滋病综合防治信息系统筛选2014年1月至2017年12月于江西省胸科医院接受HIV抗病毒治疗者(≥18周岁)的基线资料和随访信息,使用Epidata3.1软件建立并整理数据库,利用SPSS21.0软件进行数据处理。结果入组379例HIV感染者/AIDS患者经抗病毒治疗1年后CD4^(+)T细胞数从基线(176.88±150.57)个·μL^(-1)上升至(282.86±148.66)个·μL^(-1),差异有统计学意义(t=13.671,P<0.05);基线CD4^(+)T细胞数低水平组的免疫功能恢复好于高水平组(F=42.89,P<0.05);单因素分析显示基线WHO临床分期、基线CD4^(+)T细胞数(CD4^(+)T细胞增长≥100个·μL^(-1))是影响抗病毒治疗后免疫重建的因素(均P<0.05),而性别、婚姻状况、初治年龄、确诊到开始治疗间隔(月)、最近一年是否患有结核、感染途径等均不影响免疫重建。结论HIV感染者/AIDS患者经抗病毒治疗1年后免疫效果恢复较好;基线WHO临床分期、基线CD4^(+)T细胞数是影响免疫重建的因素。