不同冷冻保护剂和冷冻方法对小鼠耳皮肤成纤维细胞冻存效果的影响

通过比较不同冷冻保存方法和冷冻保护剂对小鼠耳皮肤成纤维细胞冷冻-解冻复苏后细胞存活率、48h贴壁率和细胞生长曲线的影响,筛选适宜的小鼠耳皮肤成纤维细胞冷冻保存方法和冷冻保护剂。结果表明,以100mL/L二甲基亚砜(DMSO)作为冷冻保护剂进行小鼠耳皮肤成纤维细胞冷冻保存时,方法3处理组解冻复苏后细胞存活率和培养48h细胞贴壁率均高于方法2处理组(P>0.05),并分别极显著高于方法1和方法4。采用方法3进行冷冻保存时,以100mL/L DMSO作为冷冻剂的细胞贴壁率显著高于100mL/L甘油(GL)组(P<0.05),且冷冻解冻后的细胞呈现正常的分裂增殖生长模式。因此,宜选择100mL/L胎牛血清(FBS)+100mL/L DMSO+DMEM作为冷冻保护液,采用方法3进行小鼠耳皮肤成纤维细胞的冷冻保存。

苏云金芽孢杆菌aiiA基因的克隆及植物表达载体构建

N-酰基高丝氨酸内酯(N-acyl-homoserine lactones,AHLs)是革兰氏阴性细菌致病过程中的关键信号分子,芽孢杆菌中广泛存在的aiiA基因编码AHL-Lactonase能够水解信号分子AHLs。利用PCR方法从苏云金芽孢杆菌中克隆了aiiA基因,序列分析表明该基因由753个碱基组成,编码含有250个氨基酸残基的蛋白质,核苷酸序列与已报道aiiA的同源性为89%～97%。将该基因连接到植物表达载体pCAMBIA1301中,成功构建了aiiA基因的植物表达载体pCAM-aiiA,为进一步通过转基因技术研究该基因的功能奠定了基础。

黑龙江省主导产业的模糊模式选择模型

根据主导产业的特点，从其定义下手设计了三大方面的指标体系作为选择黑龙江省主导产业模型的基础。

张弛有度,提升管理效能

幼儿园是儿童迈入社会的第一步,为带给儿童全方位的成长体验,幼儿园应形成良好的氛围与完善的管理制度。笔者从园长管理、教师管理、幼儿管理等角度入手,分析幼儿园管理的现状及存在的问题,提供有效的解决方法,为幼儿的全面发展奠基。幼儿园管理中产生的问题。第一,教师职业倦怠严重,职业认同感低。随着年龄增长,幼儿园教师的职业倦怠越发严重。而且,幼儿园教师的地位偏低,工作压力大,对职业缺乏认同感,使得他们在工作中缺少动力、缺乏热情,导致频频离职。第二,教师团队意识不够,师资力量不足。

热可逆自修复聚氨酯及其复合材料的研究进展

随着现代工业发展对材料性能的要求不断地提高,聚氨酯也正朝着智能化、功能化等方向发展,其中赋予聚氨酯材料自修复功能是推进其智能化方向的一个重要课题之一。目前自修复聚氨酯材料研究已取得一系列卓有成效的研究成果,其中在聚氨酯材料分子链主链引入热可逆Diels-Alder(DA)共价键以及在传统聚氨酯材料中引入纳米碳材料(如碳纳米管、石墨烯)成为研究热点。然而,目前热可逆DA反应的自修复聚氨酯还存在力学性能稍差、修复效率不高且修复效率随修复次数的增加迅速下降等问题,以及纳米碳材料需经改性才能引入等复杂工艺过程。从光可逆共价键修复体系和热可逆共价键修复体系两个方面简述本征型自修复体系,再从热可逆DA自修复聚氨酯体系和热可逆DA自修复聚氨酯复合材料体系两个方面综述国内外研究进展。

氯化锶对去透明带卵母细胞孤雌激活效果及孤雌胚胎体外发育体系的研究

本实验以昆明小鼠为研究对象,探讨了5 mmoL/L、10 mmoL/L及20 mmoL/L氯化锶(SrCl2)激活去透明带MⅡ期卵母细胞的效果,并比较了孤雌激活卵母细胞在普通DMEM培养液与添加有10 ng/mL有白血病抑制因子(LIF)的DMEM培养液中的体外发育率,旨在探讨去透明带卵母细胞适宜的SrCl2孤雌激活浓度及孤雌胚胎体外培养体系。结果表明:10 mmoL/L与5 mmoL/L SrCl2作用6 h所得激活率差异不显著(46.00%vs 40.38%,P>0.05),但显著高于20 mmoL/L SrCl2的激活率(46.00%vs 24.62%,P<0.05);将10 mmoL/L SrCl2激活处理6 h后得到的激活胚胎分别以DMEM培养液和LIF+DMEM培养液培养48 h,其桑葚胚分化率分别为44.00%及84.62%,组间差异显著(P<0.05)。因此,宜采用10 mmoL/L SrCl2激活去透明带MⅡ期卵母细胞,并移入到10 ng/mL LIF+DMEM培养液进行体外培养。

不同体细胞共培养体系对小鼠胚胎早期发育的影响

为研究小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)、颗粒细胞及子宫内膜细胞共培养体系对小鼠胚胎早期发育的影响,试验采用将小鼠体内受精2-细胞与这些体细胞共培养的方法。结果表明,第3代MEF共培养组的桑囊胚发育率、囊胚孵化率及囊胚细胞数显著高于第1或第6代MEF共培养组(P<0.05);颗粒细胞、子宫内膜细胞或第3代MEF共培养组的过2-细胞阻滞率和桑囊胚发育率均显著高于对照组(P<0.05);子宫内膜细胞或第3代MEF共培养组的囊胚孵化率和囊胚细胞数均显著高于颗粒细胞共培养组和对照组(P<0.05),但前两共培养组的上述指标差异不显著(P>0.05)。

针刺夹脊穴联合运动疗法为主治疗中风后偏瘫痉挛状态的效果观察

目的：探讨针刺夹脊穴联合运动疗法为主对中风偏瘫痉挛状态的影响。方法：选择我院2010年1月~2013年2月收治入院的中风后偏瘫痉挛的患者100例,随机分为两组,对照组50例予以脑卒中内科治疗及常规康复治疗方法,治疗组50例在常规治疗基础上针刺华佗夹脊穴。4周后进行Ashworth肌张力量表评分和Barthel指数评定表评分,观察两组患者治疗效果,并进行统计学分析。结果：治疗组患者治疗后痉挛程度、运动功能障碍、日常生活活动能力与治疗前比较明显改善,差异有统计学意义（P〈0.05）;与治疗前相比,治疗后对照组患者的日常生活活动能力、运动功能障碍均得到显著改善,且差异具有统计学意义（P〈0.05）;治疗后,与对照组相比,治疗组患者的痉挛程度、运动功能障碍和日常生活活动能力均明显改善,两组差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：针刺夹脊穴联合运动疗法为主缓解中风患者肢体痉挛效果显著。

挂牌责任督学,贵在责任担当——浅谈深圳市龙华区挂牌责任督学

地方政府挂牌责任督学制度的建立,对于督促、指导学校、幼儿园依法办学,专业管理,提高办学水平,促进落实国家"管""办""评"分离的指导方针,有着极其重要的意义。就指导民治幼儿园接受市一级幼儿园复评的经历,对"挂牌责任督学"的成长与乐趣进行了阐述。

七年级班主任对单亲学生阳光心态的培养

培养七年级单亲学生的阳光心态,班主任要以诚心、耐心、爱心和真心对待他们,抓住刚入学的教育契机,引导他们走出心理阴影,实现自我超越。

牵住家长工作的“牛鼻子”

家长工作是幼儿园工作的重要内容,也是教师专业能力的现实体现。我们在管理实践中,见识过形形色色的家长,深知营造家园互动良好环境、发挥家长热情与积极性参与幼儿园管理的重要性。要解决好家长工作中存在的问题,必须学会牵住家长工作的"牛鼻子"。帮助家长树立三个观念第一个观念:陪孩子一起成长。孩子的生活,涵盖了家庭、校园和社会三个维度。而孩子的社会生活和家庭生活,大都在家长的身边度过,孩子的成长不仅仅是教师的事情。

新课程下中考数学复习课选例的“八性”

复习课的目的是通过反刍、消化、巩固，加深对所学知识的理解与记忆，弥补过去学习过程中的知识缺漏，使学生平时所学的零碎知识系统化、条理化，串成网，形成知识结构；并且通过复习获取新知识，提高能力．根据几年来从事新课程教学的实践与研究，笔者认为，要提高复习效率，精心选编复习课中的例题至关重要，并且复习课中例题的选取最好能具备以下八个性质：

推进“幼有善育”高质发展

《中国教育现代化2035》和《加快推进教育现代化实施方案(2018-2022年)》的提出,使普及有质量的学前教育成为国家战略。广东省深圳市致力于建设中国特色社会主义先行示范区,将实现幼有善育列为深圳先行示范的重要目标。作为一线园长,深度思考"幼有善育"具有重要的指导意义。

关爱学生学习、关注学生发展

从眼前学生的情况看,学生的学习成绩、学习能力、学习态度、学习习惯是管理的重点,而从长远的目标上看,促使学生发挥 出自我价值,促使学生树立健全观念、促使学生对社会有所贡献是教育的最终目的。所谓教育应教书育人,教书是关爱学生学习的基础活 动,育人是关注学生终身发展的最终目标,从关爱学生学习情况出发,继而去关注学生的发展,有助于学生摒弃社会不良风气,消除家庭 不良影响,而全神贯注的参与学习,结合国家提供的教育资源获得自我发展。

针灸配合中药治疗原发性痛经的疗效观察

目的：探究针灸配合中药治疗原发性痛经的效果。方法：原发性痛经按辨证分型分成气滞血瘀型、寒凝血瘀型、气虚血瘀型、肝肾不足型四种。用针灸配合中药治疗。结论：现代医学认为，原发性痛经与月经时子宫内膜释放的前列腺素有关。而中医认为是经络不通，气血运行不畅，瘀阻冲任，不通则痛。针灸配合中药治疗均取得了明显的效果。

原位合成纳米银线-还原氧化石墨烯复合材料研究

采用改进的多元醇法,以氧化石墨烯(GO)作为石墨烯前驱体,硝酸银(AgNO_(3))为银源,聚乙烯吡咯烷酮为表面修饰剂,三氯化铁为抑制剂,乙二醇为溶剂和还原剂,在溶剂热条件下原位合成纳米银线(AgNWs)-还原氧化石墨烯(RGO)复合材料,研究反应溶液中GO∶AgNO_(3)质量比、反应温度和时间对合成产物形貌的影响,并对AgNWs-RGO复合材料的形成机理进行了分析。研究表明:当反应溶液中GO∶AgNO_(3)质量比在1∶98.5~1∶32.4内,产物以AgNWs-RGO复合材料为主;当反应溶液中GO∶AgNO_(3)质量比在1∶15.7~1∶7.3内,产物以银纳米颗粒和RGO复合材料为主;随着反应温度从150℃增加到170℃,产物中纳米银颗粒增多,纳米银线的平均长度减小;随着反应时间从3 h延长到5 h,产物中纳米银线的平均长度减小,数量增多。当反应溶液中GO∶AgNO_(3)质量比为1∶63.5时,溶液在160℃反应3 h,产物主要是AgNWs-RGO复合材料,其中纳米银线的长度在20~35μm,直径在80~110 nm,RGO覆盖在AgNWs上。

不同性别胎鼠生殖嵴表观特征差异性研究

在应用小鼠胚胎干细胞(ESCs)裂解液诱导异性小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)为诱导性多能干细胞(iPSCs)的过程中,通过性别鉴定的方法筛选特定性别的被诱导的MEFs,能够快速简易的鉴定出iPSCs的生成材料是否来源于被诱导的体细胞。利用妊娠13.5天雄性和雌性胎鼠生殖嵴在形态学上存在明显差异的特性,识别出不同性别昆明系小鼠13.5天的胚胎,并从中分离培养出大量不同性别的MEFs,用于iPSCs的实验研究。根据雄性小鼠特异性的Y染色体性别决定区(SRY基因)的核心序列,设计一对引物,并对获得的不同性别MEFs的DNA样本进行PCR扩增,验证不同性别胎鼠生殖嵴在形态学上存在的差异。结果表明,PCR性别鉴定结果与MEFs来源胚胎的性别一致。不同性别的MEFs均具有典型的成纤维细胞特性,两者在形态学上并没有差异。因此,利用雄性与雌性胚胎在生殖嵴形态学上的差异可以快速分离获得大量不同性别的MEFs。

公费定向师范生教师胜任力跟踪调查——以湖南第一师范学院为例

采用徐建平编制的《教师胜任力行为自评问卷》对2008级湖南第一师范学院第一届公费定向师范毕业生的教师胜任力进行调查。调查结果显示:公费定向师范毕业生教师胜任力整体水平较高,在尊重他人、培养学生、班级管理、人际沟通、认知能力、团队合作方面表现更好。同时,教师胜任力水平还受学校类别及学校所在地等因素的影响:在城镇任教的教师其胜任力明显高于在农村任教的;在小学的明显高于在初中任教的。要提高教师胜任力水平,需要继续秉持师范院校优良文化传统,帮助师范生为从事教育活动作好充足的准备。任教学校也要为教师特别是新教师的专业成长、提升其教育教学胜任力创造一定的条件。地方高师院校与农村学校联合起来,共同为提高师范毕业生的教育教学胜任力作出贡献。

不同浓度链球菌溶血素O对小鼠胎儿成纤维细胞生长状态的影响

本研究比较了0、10、25、50 U或100 U链球菌溶血素O(SLO)处理下的小鼠胎儿成纤维细胞(MEFs)的细胞密度、存活率、贴壁率,并绘制了适宜浓度SLO下MEFs的生长曲线。结果表明:25 U SLO处理组的细胞密度与10 U SLO处理组间差异不显著(P>0.05),但极显著高于50 U和100 U SLO处理组(P<0.01)。0、10 U和25 USLO处理组的细胞存活率差异不显著(P>0.05),但显著高于50 U处理组(P<0.05)。25 U SLO处理组的贴壁率极显著高于50 U和100 U SLO处理组(P<0.01)。25 U SLO处理组MEFs具有正常分裂增殖生长模式。因此,为了既能达到SLO对MEFs细胞膜的渗透化效果,又尽可能减少对细胞的损伤,宜选用25 U SLO进行MEFs的渗透化处理。

小鼠胚胎干细胞裂解液诱导鸡胚成纤维细胞发生重编程的研究

本研究采用小鼠胚胎干细胞(ESCs)裂解液与鸡胚成纤维细胞共孵育,通过形态学观察和多能性检测,旨在探讨小鼠ESCs裂解液逆转化鸡胚成纤维细胞为多能干细胞的可行性。结果表明:与小鼠ESCs裂解液共孵育的鸡胚成纤维细胞均变为圆形细胞,形成了42.33个细胞集落;经AKP染色以及Oct-4和SSEA-1免疫细胞化学染色,均呈阳性反应,表现出一定的多能干细胞特性;经核型分析表明这些细胞来源于鸡胚成纤维细胞。单独的重编程操作过程和与鸡胚成纤维细胞裂解液共孵育均无法将鸡胚成纤维细胞重编程为具有ESCs特征的细胞,说明参与重编程鸡胚成纤维细胞的物质来源于小鼠ESCs裂解液。因此,ESCs裂解液诱导体细胞重编程逆转化为多能干细胞的作用能够在小鼠和鸡之间发生。