降钙素原在慢性阻塞性肺疾病急性加重期抗感染治疗中的临床应用

目的探讨降钙素原(PCT)在慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)抗感染治疗中的临床应用价值。方法以本院为单位,在2019年1-12月间,选取AECOPD患者50例,将其随机分为两组,观察组依据血清PCT水平明确是否使用抗生素,对照组则依据患者症状来明确是否使用抗生素,对比两组抗生素使用时间及住院时间。结果观察组抗生素使用时间、住院时间均短于对照组(P<0.05)。结论在AECOPD治疗中,PCT具有指导作用,不仅能缩短住院时间,而且还能减少抗生素使用,临床应用价值突出。

人miR-100-3p抑制序列慢病毒载体及其稳定表达的小鼠胚胎成纤维细胞的建立

目的构建携带针对人miR-100-3p抑制序列的慢病毒载体,建立稳定表达的该载体的小鼠胚胎成纤维(MEF)细胞。方法设计并合成特定的miR-100-3p抑制序列克隆入载体h U6-MCS-Ubiquitin-EGFP-IRES-puromycin构建重组载体,将该载体与p Helper1.0载体和p Helper2.0载体三质粒共感染293T细胞得到所需的病毒液,最后感染MEF细胞,并通过嘌呤霉素筛选出稳定感染的细胞株。检测MEF细胞中绿色荧光蛋白(GFP)的表达和hsa-miR-100-3p在MEF细胞中的表达水平,验证慢病毒在MEF细胞中的抑制表达效果。结果测序结果证明成功构建了重组质粒,并成功的包装成慢病毒,所得病毒液感染MEF细胞并筛选出稳定细胞株。流式分析提示,带有绿色荧光蛋白的目的重组质粒在小鼠胚胎成纤维细胞细胞中的表达(显著抑制miR-100表达)达到了97.4%和95.1%,PCR进一步验证这一结果。结论 hsa-MiR-100-3p抑制序列慢病毒沉默载体及抑制miR-100-3p表达的MEF细胞可被成功构建,为后续miR-100的功能研究奠定基础。