血清甘油三酯水平与急性胰腺炎病情严重程度及预后相关性分析

目的探讨血清甘油三酯(triglyceride,TG)水平与急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)患者病情严重程度及预后的相关性。方法收集2012年1月至2015年9月期间本科466例AP患者资料,按血清TG值是否高于1.70 mmol/L分为正常组与升高组,升高组再分为轻、中、重组,比较病情严重程度及预后有无差异,以是否合并全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome,SIRS)为因变量,进行Logistic回归分析。比较重度血脂升高组血液净化治疗前后指标。结果 466例AP患者中血脂升高组271例(58.2%),血脂正常组195例(41.8%),血脂升高组SIRS(42.8%vs23.6%,P<0.01)、胸腔积液(55.0%vs 43.1%,P<0.05)、病情程度(30.6%vs 19.5%,P<0.01)明显高于正常组;组间器官功能障碍(13.7%vs 13.8%)差异无统计学意义(P>0.05);随着TG升高,各组并发SIRS风险越高(P<0.01)。Logistic回归分析TG与SIRS独立相关(OR=1.157,95%CI:1.102~1.215,P<0.01)。重度血脂升高组中使用血液净化(29例)治疗后,TG水平、白细胞计数、APACHEⅡ评分与治疗前比较明显降低(P<0.01)。结论 TG升高的AP患者预后更差,血清TG水平越高,SIRS发生率越高,但合并器官功能障碍无差异。血液净化能有效缓解血脂重度升高患者的病情。

腺苷酸活化蛋白激酶在重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障损伤机制中的作用

目的探讨腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)在重症急性胰腺炎SD大鼠肠道紧密连接损伤中的作用。方法给予SD大鼠腹腔注射不同剂量的20%L-精氨酸溶液,分别制备大鼠重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)及轻症急性胰腺炎(mild acute pancreatitis,MAP)模型,通过检测血清淀粉酶水平、胰腺病理改变以证实胰腺炎模型构建成功。对SAP大鼠分别给予AMPK抑制剂Compound C和谷氨酰胺灌胃处理,小肠组织切片染色观察大鼠小肠组织损伤情况;FITC-Dextran通透实验检测肠道通透性;免疫组化和Western blot方法分别检测肠黏膜细胞αSNAP、AMPK和紧密连接蛋白occludin的表达情况。结果病理切片证实胰腺炎模型构建成功,并且抑制AMPK后明显降低重症急性胰腺炎的病理损伤;SAP大鼠肠黏膜损伤明显,而加入AMPK抑制剂Compound C或肠黏膜保护剂谷氨酰胺可明显抑制SAP大鼠肠黏膜损伤;SAP组建模48 h(410.25±7.80)的肠道通透性相对于对照组(0.51±0.61)显著增强(P<0.05),而加入AMPK抑制剂Compound C 48 h的Com组(372.95±9.33)或肠黏膜保护剂谷氨酰胺的Gln组(367.93±18.90)(P<0.05),可明显降低SAP大鼠肠道通透性;重症急性胰腺炎时,αSNAP表达下调(P<0.05),而AMPK表达明显增强(P<0.05),加入AMPK抑制剂可以明显上调occludin的表达(P<0.01),提示AMPK对occludin蛋白存在负性调控。结论 AMPK信号在大鼠重症急性胰腺炎肠黏膜损伤中过度活化,可通过负性调控occludin蛋白的表达导致肠黏膜损伤,从而促进肠黏膜通透性增强。

端粒酶逆转录酶线粒体转位促进肝癌细胞干性及耐药的研究

目的探讨人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse enzyme,hTERT)线粒体转位对肝癌细胞干性及耐药的影响。方法采用大剂量顺铂(CDDP)冲击、间歇诱导的方法诱导肝癌细胞HepG2、Huh7耐药,构建耐药细胞株HepG2/CDDP、Huh7/CDDP,CCK-8检测细胞耐药能力;Western blot检测细胞线粒体hTERT表达情况;激光共聚焦显微镜观察细胞线粒体膜电位;流式细胞术检测耐药细胞干性相关蛋白CD133、EpCAM表达情况;克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;Western blot检测耐药细胞干性相关因子OCT-4蛋白表达水平变化。结果与亲本细胞HepG2[耐药指数(7.69±0.86)μg/m L及Huh7(7.18±0.35)μg/m L]相比,耐药细胞株对CDDP耐药指数明显增加[HepG2(41.16±0.42)μg/m L,Huh7(33.48±0.33)μg/m L,P<0.01],经顺铂(CDDP)诱导耐药细胞线粒体hTERT表达显著升高,线粒体膜电位增强,CD133^+细胞比例[HepG2(1.44±0.41),HepG2/CDDP(23.15±1.55),P<0.01]及EpCAM^+细胞比例[HepG2(0.85±0.10),HepG2/CDDP(3.96±0.10),P<0.01]增加,克隆形成能力增强,干性相关因子OCT-4蛋白表达水平增加。结论经顺铂诱导的肝癌耐药细胞线粒体hTERT转位显著增加,且具有明显的肿瘤干细胞特征。