不同化疗药物对乳腺癌细胞MGMT表达水平的影响及其药物敏感性分析

目的探讨不同化疗药物对O 6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(O 6-methyl-guanine DNA methyltransferase,MGMT)表达水平的影响及其药物敏感性。方法采用Western Blotting检测环磷酰胺作用后MCF-7和MDA-MB-231细胞中MGMT蛋白水平变化;采用免疫荧光检测MGMT表达水平及其在乳腺癌细胞中内的定位情况;构建含MGMT启动子片段的荧光素酶报告载体转染入乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231,应用荧光素酶报告基因检测试剂盒检测经不同化疗药物(环磷酰胺、紫杉醇、吉西他滨)作用24 h后MGMT的转录活性;通过RT-qPCR检测化疗药物作用后MCF-7和MDA-MB-231细胞内MGMT mRNA水平变化;采用CCK8实验检测MCF-7和MDA-MB-231细胞对上述化疗药物的敏感性。结果环磷酰胺作用后两种细胞的MGMT蛋白水平均下降;荧光素酶报告的实验结果显示与对照组相比,经环磷酰胺处理后检测到MDA-MB-231细胞的发光强度增强,MCF-7细胞的发光强度减弱,具有统计学差异;RT-qPCR结果显示环磷酰胺作用后,MDA-MB-231细胞的MGMT mRNA水平升高,而MCF-7细胞的MGMT mRNA水平下降;CCK8实验结果显示在化疗药物作用下,MDA-MB-231细胞比MCF-7细胞的IC 50值高。结论在三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞中环磷酰胺造成肿瘤细胞耐药与促进MGMT的转录上调密切相关。

MGMT和p-ERK表达在恶性黑色素瘤中的临床病理价值

目的探讨MGMT和p-ERK在恶性黑色素瘤组织中的表达及其在恶性黑色素瘤中的临床病理价值。方法根据恶性黑色素瘤组织中p-ERK和MGMT免疫组化检测表达的评分结果,将恶性黑色素瘤患者分组,分析恶性黑色素瘤组织中p-ERK和MGMT的表达与恶性黑色素瘤患者临床病理因素(年龄、性别、病理类型、分化程度、肿瘤大小、病理分级分期、淋巴结转移)的关系。结果48例恶性黑色素瘤患者分为p-ERK和MGMT均阳性组(19例)、p-ERK阳性和MGMT阴性组(11例)、p-ERK阴性和MGMT阳性组(1例)、p-ERK和MGMT均阴性组(17例)4组。p-ERK与MGMT在恶性黑色素瘤组织中的表达水平呈正相关,p-ERK和MGMT的表达与恶性黑色素瘤的病理分级分期、淋巴结转移不具相关性(P>0.05)。结论恶性黑色素瘤组织中p-ERK与MGMT的表达水平呈正相关,p-ERK与MGMT的表达可能参与了恶性黑色素瘤的恶性进展。