内镜下高频电刀治疗气管-支气管结核的初步临床观察

目的评价高频电刀治疗支气管结核的临床疗效和安全性。方法支气管结核13例,全身常规抗结核治疗及雾化治疗的同时,加用内镜下高频电刀治疗,观察治疗效果。结果8例溃疡型/或增殖型患者支气管内干酪样坏死物和肉芽组织被清除。2例管壁可见散在的小瘢痕。X线胸片显示10例患者肺结核病灶有明显吸收,无1例出现病灶增多或播散。3例肺不张患者肺复张。高频电刀治疗前后病人的心率和血氧饱和度无明显变化。结论高频电刀治疗支气管结核效果好,对正常组织损伤小,创面恢复快,并发症少,值得推广。

GATA-3在大鼠哮喘模型气道炎症中作用的实验研究

目的:探讨GATA-3在Wistar大鼠哮喘模型气道炎症中的作用。方法:按常用方法复制大鼠哮喘模型并分为哮喘组(A组),地塞米松治疗组(D组),反义寡核苷酸治疗组(AS组),无意义寡核苷酸治疗组(NS组)和正常对照组(N组)5组,每组10只。反义寡核苷酸和无意义寡核苷酸经鼻气管内给药,地塞米松腹腔注射给药。HE染色方法观察气道炎症变化。免疫组化方法观察GATA-3阳性细胞数。用RT-PCR方法观察大鼠肺组织GATA-3mRNA表达。用Western蛋白印迹法检测肺组织中GATA-3蛋白质表达。结果:A组GATA-3 mRNA和蛋白质的表达量及气道嗜酸性粒细胞浸润数量明显大于N组(P<0.01)。AS组和D组GATA-3 mRNA和蛋白质表达量及气道嗜酸性粒细胞浸润数量均明显低于A组(P<0.01)。NS组GATA-3 mRNA和蛋白质表达量和嗜酸性粒细胞浸润数量与A组相比差异无显著(P>0.05)。GATA-3的表达与大鼠支气管肺组织中嗜酸性粒细胞浸润数量呈正相关,r=0.995(P<0.01)。结论:GATA-3反义寡核苷酸能特异性地抑制GATA-3基因的表达,减轻气道炎症反应。GATA-3在Wistar大鼠哮喘模型效应阶段气道炎症中具有重要作用。

我院229株结核分枝杆菌耐药情况分析

目的探讨深圳市东湖医院结核菌株耐药情况。方法用MB/Bact240进行结核分枝杆菌分离培养,改良罗氏法进行药物敏感性测定。结果痰结核分枝杆菌培养阳性561例,耐药229例,总耐药率40.82%。初始耐药率27.23%,耐多药率8.40%,其中4种药全耐者占4.83%;获得性耐药率72.62%,4药全部耐药者占30.95%。结论深圳市结核病耐药情况仍然十分严峻,加强结核病临床治疗的管理,制定合理化疗方案至关重要。

反义GATA-3治疗哮喘气道炎症的实验研究

目的:观察反义GATA-3治疗大鼠哮喘模型气道炎症的作用。方法:按常用方法制作大鼠哮喘模型并分为哮喘组(A组),地塞米松治疗组(D组),GATA-3反义寡核苷酸治疗组(AS组),GATA-3无意义寡核苷酸治疗组(NS组)和正常对照组(N组)5组,每组10只。反义寡核苷酸和无意义寡核苷酸经鼻气管内给药,地塞米松腹腔注射给药。用HE染色的方法观察气道炎症变化。免疫组化方法观察GATA-3阳性细胞数。用RT-PCR方法观察大鼠肺组织GATA-3mRNA表达。用Western蛋白印迹法检测肺组织中GATA-3蛋白质表达。结果:与N组相比,A组GATA-3mRNA和蛋白质的表达量及气道炎性细胞浸润数量明显增加(P<0.01)。AS组和D组GATA-3mRNA和蛋白质表达量及气道炎性细胞浸润数量与A组相比均明显降低(P<0.01)。NS组GATA-3mRNA和蛋白质表达量和炎性细胞浸润数量与A组相比差异无显著性(P>0.05)。GATA-3的表达与大鼠支气管肺组织中嗜酸性粒细胞浸润数量呈正相关,相关系数为0.995(P<0.01)。结论:GATA-3反义寡核苷酸能特异性地抑制GATA-3基因的表达,减轻气道炎症反应。GATA-3在Wistar大鼠哮喘模型效应阶段气道炎症中具有重要作用。

胸膜间皮瘤病理学诊断研究进展

胸膜间皮瘤是一种少见肿瘤，但近年其发病率有逐年增加趋势。由于间皮的多潜能分化功能致使恶性间皮瘤细胞形态多种多样，在光镜下与胸膜转移性腺癌、反应性间皮细胞及其它梭形细胞肿瘤不易鉴别，给临床和病理诊断工作带来困难。近年由于对胸膜间皮瘤认识水平的提高和电镜...

Th1/Th2分化的转录调节

Th1/Th2平衡在机体免疫反应调节中具有关键性作用。许多普遍性转录因子和细胞特异性转录因子参与了对Th1/Th2分化的转录调节 ,对这些转录因子在Th1/Th2分化中作用的研究 ,将有助了解免疫性疾病的发病机理和探索新的治疗方法。

初治涂阳肺结核诊治延迟230例分析

目的了解初治涂阳肺结核患者诊治延迟的时间及原因。方法对我院2003年至2005年接诊的初治涂阳肺结核病人诊治延迟时间和原因进行分析。结果230例初治涂阳肺结核就医、确诊、发现诊断延迟的中位时间分别为60.6d、31.5d和96d。就医延迟主要原因是病人出现症状不去就医或自行服药。确诊延迟与病人临床表现不典型、医生对结核病认识不足有关。结论涂阳肺结核病人诊治延迟的现象仍然比较严重,应大力宣传和普及防痨知识,加强公共卫生机构筛查和检出肺结核患者的力度。

γ-干扰素释放试验在活动性结核病临床诊断中的应用价值

1γ-干扰素释放试验（interferon-γrelease assays,,IGRAs））原原理理IGRAs是体外检测T细胞经结核特异性抗原刺激后产生和释放γ-干扰素能力的免疫学检测技术,籍以判断T细胞介导的对结核分枝杆菌（mycobacterium tuberculosis,MTB）特异抗原的免疫反应。目前国际上比较成熟的IGRAs有两种,即澳大利亚产的Quanti FERON-TB Gold In-Tube（QFT-GIT）和英国产的T-SPOT.TB。

p21 ras和CD_(44)在非小细胞肺癌中的表达及其与淋巴结转移的关系

ａｓ癌基因和ＣＤ４４基因异常表达与非小细胞肺癌的发生及转移行为有关。作者应用免疫组化ＳＰ法检测非小细胞肺癌中ｐ２１ｒａｓ和ＣＤ４４的表达情况，并探讨它们表达的相关性及其与淋巴结转移的关系。１材料和方法１１标本６６例非小细胞肺癌原发灶及其２０例转移...

结核分枝杆菌IFN-γ酶联免疫斑点检测的建立和初步应用

目的建立结核分枝杆菌特异性IFN-γ酶联免疫斑点(Elispot)检测技术,初步评价其在诊断结核分枝杆菌感染的敏感性和特异性。方法采用以早期分泌抗原靶6 kDa蛋白(ESAT-6)抗原为主的重组蛋白库、多肽库为抗原,建立结核分枝杆菌特异性IFN-γElispot检测技术(简称Elis-pot);应用该技术对32例肺结核病患者、205例健康对照者和18例肺部其他疾病对照的外周血结核菌特异性IFN-γ水平进行检测;结核病人和部分健康对照同时采用全血干扰素试剂(Quantiferon-TB-Gold,QFT-G)进行平行检测。结果采用Elispot检测,结核患者的阳性率最高(75.0%),显著高于健康对照(7.3%)和其他肺部疾病患者(11.1%),结核患者反应水平与其他两组比较均差异有统计学意义(P<0.05,P<0.05)。采用QFT-G在结核病人中的IFN-γ应答阳性率为78.1%,与Elis-pot检测结果进行配对比较无显著性差别(χ2=1.6,P>0.05)。结论建立了结核菌特异性IFN-γElispot检测技术,该技术在诊断结核菌感染的初步应用显示出较好的特异性和敏感性,但仍需进一步扩大样本数观察。

合并糖尿病肺结核的CT影像分析

目的探讨合并糖尿病肺结核的CT影像表现特征,提高影像诊断水平。方法对1年来收集的75例合并糖尿病肺结核患者,以及随机抽取的75例非糖尿病肺结核患者进行回顾性对比分析。结果合并糖尿病肺结核组与非糖尿病肺结核组在发病部位上差异无统计学意义,P>0.05;糖尿病合并肺结核病变局限在单一肺段及单一肺叶上较非糖尿病肺结核组发生率低,2组差异有统计学意义,P<0.05;病变形态:空洞、肿块及浸润于合并糖尿病肺结核组中发生率较高,P<0.05。结论合并糖尿病肺结核患者组病变相对广泛,呈多个肺叶肺段分布,空洞、肿块及浸润发生率较高。

利福平和异烟肼结核分枝杆菌药敏表型和基因型的关系

目的对利福平(RFP)和异烟肼(INH)进行药敏检测,分析相应的结核分枝杆菌药敏表型与基因型的关系。方法对2009年至2012年深圳市第三人民医院结核病门诊和住院的137例结核病患者晨痰标本进行结核分枝杆菌培养,利用膜基因芯片法检测结核分枝杆菌耐药基因的突变情况(基因型检测),同时以绝对浓度法进行异烟肼和利福平药敏试验(表型检测),计算两种方法检测结果间的符合率,验证膜基因芯片方法的准确性,用Kappa检验分析两种方法的一致性。结果137株结核分枝杆菌标本,表型检测利福平和异烟肼耐药率分别为27.01%(37/137)和22.63%(31/137);基因型检测利福平和异烟肼耐药率分别为26.28%(36/137)和23.36%(32/137);以绝对浓度法药敏结果为金标准,膜基因芯片检测利福平耐药的敏感度为83.78%(31/37),特异度为94.06%(95/101),符合率为91.97%(126/137),Kappa值为0.79,P<0.05;异烟肼耐药的敏感度为80.65%(25/31),特异度为94.29%(99/105),符合率为90.51%(124/137),Kappa值为0.73,P<0.05;两种药物药敏结果总符合率为91.24%(250/274)。结论结核分枝杆菌耐药性基因型检测和表型检测结果高度一致,且基因型的检测方法能快速准确地检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药性,有望在临床治疗中广泛应用。

γ干扰素释放试验在肺结核和非结核分枝杆菌肺病鉴别诊断中的应用价值

目的 探讨结核分枝杆菌特异性γ干扰素释放试验（interferon gamma release assays,IGRAs）在鉴别诊断肺结核和非结核分枝杆菌（non-tuberculous mycobacteria,NTM）肺病中的应用价值.方法 选择深圳市第三人民医院2011年1月至2013年5月334例收住于肺科住院部感染了分枝杆菌的肺病患者.采用反向斑点杂交技术对334例分枝杆菌感染的肺病患者痰培养分离的分枝杆菌进行菌种鉴定;采用IGRAs测定患者外周血结核分枝杆菌抗原特异性γ干扰素（IFN-γ）应答;采用结核分枝杆菌特异性荧光定量PCR技术检测痰标本中结核分枝杆菌DNA.结果 在334例分枝杆菌感染的患者中,240例的菌株为结核分枝杆菌,94例为NTM; 240例肺结核患者中痰结核分枝杆菌DNA PCR检测阳性率为74.58％（179/240）,IGRAs检测阳性率为77.08％（185/240）;94例NTM肺病患者中,结核分枝杆菌DNA PCR检测阳性率为10.64％（10/94）,IGRAs检测阳性率为20.21％（19/94）.结核分枝杆菌DNA PCR和IGRAs检测鉴别诊断肺结核和NTM肺病的敏感度分别为74.58％（179/240）、77.08％（185/240）,特异度分别为89.36％（84/94）、79.79％（75/94）;两种方法联合检测肺结核的敏感度为%.75％（225/240）、特异度为77.66％（73/94）.结论 IGRAs对于鉴别肺结核和NTM肺病具有较好的应用价值,联合应用结核分枝杆菌DNA PCR和IGRAs可以显著增加鉴别诊断的准确性,对于早期抗结核药物的选择具有重要的指导意义.

不同中医证型肺结核患者外周血CD14+单核细胞IL-1β、IL-1Ra表达水平的差异

目的探讨肺结核患者不同中医证型与CD14+单核细胞白介素-1β(interleukine-1β,IL-1β)、白介素-1受体拮抗剂(interleukine-1 receptor anlagenist,IL-1Ra)表达水平的相关性。方法选取104例肺结核确诊患者为研究对象,其中肺阴亏虚33例,阴虚火旺36例,气阴两虚35例。采集抗凝血并利用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,与CD14+免疫磁珠孵育后获得单核细胞,使用结核杆菌裂解物刺激单核细胞,同时设立空白对照。12小时后收集细胞上清通过酶联免疫吸附法测定IL-1β、IL-1Ra水平,同时裂解细胞提取总RNA,利用实时定量PCR技术测定IL1B、IL1RN基因相对表达量。通过方差分析比较不同证型肺结核患者IL-1β、IL-1Ra表达水平的差异。结果(1)成功建立检测IL1B、IL1RN基因的实时定量PCR技术,靶基因可以被有效扩增,并且引物具有良好特异性;(2)结核菌刺激后IL-1β蛋白表达水平显著升高,其中肺阴亏虚组显著高于阴虚火旺组和气阴两虚组(P<0.05),阴虚火旺组IL-1β分泌水平又显著高于气阴两虚组(P<0.05)。IL-1B mRNA表达趋势与蛋白表达趋势一致,肺阴亏虚、阴虚火旺、气阴两虚三组中IL-1B基因表达水平依次降低,组与组之间差异均有统计学意义(P<0.05、P<0.01);(3)结核菌刺激能够显著增加IL-1Ra分泌水平,气阴两虚组显著高于其它两组(P<0.05),而肺阴亏虚组和阴虚火旺组差异无统计学意义(P>0.05)。同时,在mRNA层面气阴两虚组IL1RN表达水平显著高于其它两组,差异有统计学意义(P<0.05、P<0.01);(4)在结核菌刺激后,IL-1β/IL-1Ra比值在肺阴亏虚和阴虚火旺组中明显增高,显著高于气阴两虚组(P<0.01、P<0.05)。结论 IL-1β、IL-1Ra表达水平与肺结核中医病机演变密切相关,由此推测它们不仅可以作为肺结核中医微观辨证的生物标识,也可以作为未来结核病治疗的有效分子靶点。

CD4^+CD25^+调节性T细胞对肺结核患者特异细胞免疫的调节作用

目的探讨调节性T细胞对结核患者特异性细胞免疫的调节作用及其在结核病发生中的意义。方法采用免疫磁珠从健康对照和结核患者外周血单个核细胞中分离CD4+CD25+调节性T细胞,观察其对结核患者外周血免疫反应,包括细胞增殖反应和细胞因子IFN-γ及IL-10分泌的影响。结果体外消除CD4+CD25+调节性T细胞没有显著影响健康对照PBMC对BCG抗原的增殖反应,但可以显著增强结核患者PBMC对BCG抗原的细胞增殖反应、细胞因子IFN-γ及IL-10的分泌。分离的CD4+CD25+调节性T细胞能显著抑制结核患者CD4+CD25-T细胞对BCG抗原及抗-CD3的细胞增殖和细胞因子IFN-γ分泌;CD4+CD25+调节性T细胞也抑制BCG刺激的CD4+CD25-T细胞IL-10的分泌,但不影响抗-CD3刺激的IL-10分泌。结论CD4+CD25+调节性T细胞可能通过抑制结核患者特异性细胞免疫应答促进肺结核病的发生发展。

结核病患者血浆和胸水中白介素6水平及其临床意义

目的通过检测结核病患者血浆及胸水中白细胞介素6(IL-6)的浓度变化情况,探讨IL-6与结核菌感染的临床转归、疾病严重程度的关系。方法用ELISA法检测30例健康体检者、30例潜伏感染者、30例活动性肺结核患者、20例结核性脑膜炎患者及20例结核性胸膜炎患者血浆和胸水中的IL-6的浓度。结果肺结核患者血浆中IL-6水平明显高于健康对照组及结核潜伏感染者(P<0.01,P<0.01);结核性胸膜炎患者血浆中IL-6水平明显高于肺结核患者(P=0.0029);结核性胸膜炎患者胸水中的IL-6显著高于相应血浆中IL-6水平(P<0.0001)。结论 IL-6与结核菌感染的临床转归、结核病严重程度相关,是局部病灶炎症反应的重要作用因子。

HRCT检查在泌尿系结核影像诊断与指导治疗中的应用价值

目的探讨36例泌尿系结核高分辨率计算机体层摄影术(high resolution computed tomography,HRCT)表现特点以及影像学在指导治疗中的价值,以期提高诊断符合率和为规范治疗提供依据。方法回顾性分析36例经病理及临床证实的泌尿系结核患者的病例资料,研究HRCT在泌尿系结核中的扫描技术、CT平扫及增强的影像学表现特点。同时评价HRCT在泌尿系结核治疗方案选择中的作用。结果1)36例泌尿系结核患者的HRCT平扫与增强中发现3例早期肾结核,表现为肾实质内小低密度病灶。2)肾内多发花瓣状低密度区25例,肾弥漫性钙化即肾自截2例,肾皮质局限萎缩变薄4例,肾萎缩10例,肾盂或肾盏壁普遍增厚4例。3例腹膜后可见多发性大小不一的淋巴结。3)HRCT平扫加增强,对病灶侵犯脏器和周围组织的范围和程度及肿大淋巴结等进行评价,据此决定手术方式和手术时间。结论肾实质内较小的低密度病灶,肾内多发花瓣状低密度区增强扫描后病变区瓣壁呈环状中度延迟强化,并有不规则钙化是肾结核的影像学特点。依据HRCT影像表现特点可为临床治疗方案的选择提供客观依据。

肺结核患者结核分支杆菌EIS抗原特异性细胞免疫的临床研究

目的探讨肺结核患者结核分支杆菌EIS抗原特异性细胞免疫水平与病情的关系。方法选择30例初治、痰涂片结核杆菌阳性的活动性肺结核患者,采用比色法测定其外周血淋巴细胞对结核分支杆菌EIS抗原的增殖反应,酶联免疫吸附法测定细胞分泌的γ干扰素(IFNγ)及白细胞介素10(IL10)的水平,并与20名健康对照者和16例康复的肺结核患者进行比较。结果康复者对EIS的细胞免疫最为强烈,其外周血淋巴细胞的细胞增殖强度显著高于健康对照者和活动性肺结核患者(P均<0.01)。活动性肺结核患者外周血淋巴细胞在受到EIS刺激时分泌的IFNγ显著低于康复者(P<0.05)。EIS抗原刺激主要诱导细胞分泌Th2型细胞因子IL10。结论活动性肺结核患者对EIS抗原的细胞免疫水平低下,经抗结核治疗康复后,细胞免疫维持在较高水平。EIS抗原诱导Th1/Th2免疫失衡可能是EIS参与结核发病的机制之一。