小鼠胚胎附植前后瘦素长型受体在下丘脑及消化器官的表达

目的对长型瘦素受体在雌性昆明鼠生殖周期中的表达情况进行研究。方法采用蛋白免疫印迹实验方法对下丘脑、胃、十二指肠组织中的瘦素受体进行了分析,并用免疫组织化学染色法对雌性KM鼠生殖周期不同阶段的下丘脑、胃、十二指肠组织中表达的瘦素长型受体进行定位分析。结果与结论瘦素受体六个亚型的分子量大约分别为(120、90、77、66.2、54、47)×103;下丘脑神经元胞质中有棕褐色阳性颗粒,且数目随妊娠日龄增加而增加;胃底腺中下部分胞质和细胞核有棕褐色阳性颗粒,且阳性率随妊娠日龄的增加而增加;十二指肠腺中胞质和细胞核有棕褐色阳性颗粒,且阳性率随妊娠日龄的增加而增加。

小鼠胚胎附植前后瘦素水平与胃瘦素长型受体相关性研究

为了对小鼠胚胎附植前后瘦素与脂肪细胞变化的相关性进行研究,本研究采用ELISA方法对小鼠生殖周期不同阶段的血清中的瘦素浓度进行了检测,皮下脂肪组织冰冻切片用苏丹(Ⅲ)染色计量脂肪细胞数量和大小的变化,用免疫组织化学染色法对胃瘦素长型受体进行定位分析。结果显示:妊娠期血清瘦素浓度高于间情期,且瘦素浓度从间情期到妊娠4日龄,呈上升趋势,妊娠5日龄稍下降,然后随妊娠日龄逐渐增加,与单位面积内脂肪细胞数量的变化趋势一致。妊娠7日龄,单位面积内脂肪细胞比间情期少,单个细胞面积大。胃底腺中下部部分胞质和细胞核有棕褐色阳性颗粒且阳性率随妊娠日龄的增加而增加。表明小鼠胚泡附植前后脂肪组织越多血清瘦素水平越高,瘦素及其长型受体可能通过影响胃的消化吸收达到调节机体能量平衡的目的。

瘦素受体在小尾寒羊消化系统的表达

试验通过HE、免疫组织化学SABC染色和Western Blot方法对瘦素受体(ob-R)在小尾寒羊消化系统的表达进行研究。HE染色结果显示,各组织结构正常,细胞形态清晰可见;SABC染色结果显示,在皱胃胃体部固有层胃底腺的主细胞和壁细胞及十二指肠黏膜上皮细胞和固有层肠腺的柱状细胞中均可见大小数量不等的棕黄色颗粒;Western Blot检测发现,在皱胃和十二指肠均检测到120、110和98 ku三条带。120 ku长型瘦素受体蛋白在胃中表达量显著高于小肠中的表达;110 ku的短型瘦素受体蛋白在小肠和皱胃中表达量接近;98 ku短型受体蛋白在胃和小肠表达均较弱。试验结果表明,瘦素受体在小尾寒羊消化系统中表达,对调节能量平衡和饲料摄入具有重要作用。

瘦素受体在小尾寒羊组织中的表达

为了研究瘦素受体在小尾寒羊组织中的表达,试验采用H.E.和免疫组织化学SABC染色方法对小尾寒羊下丘脑、垂体、皱胃和十二指肠的瘦素受体(OB-R)进行定位研究。结果表明:H.E.染色显示各组织结构正常,细胞形态均清晰可见;SABC染色可见在下丘脑的神经元胞质、脑垂体的腺垂体细胞、皱胃胃体部固有层的壁细胞和十二指肠固有层肠腺的柱状细胞均可见大小不等的棕黄色颗粒,呈阳性表达。表明瘦素对小尾寒羊的消化系统具有调节作用,瘦素受体对小尾寒羊的生长发育起着重要作用。

瘦素及其长型瘦素受体在雌性小鼠体内的表达

采用免疫组织化学SP染色法对长型瘦素受体在雌性小鼠生殖周期不同阶段的下丘脑、卵巢、子宫中细胞定位和分布进行了研究,并用ELISA方法对小鼠血清中的瘦素浓度进行了检测。结果显示,下丘脑神经元胞质中有棕褐色阳性颗粒,且阳性细胞数量随妊娠日龄增加逐渐增加,妊娠期与间情期阳性细胞数差异显著(P<0.05);在卵巢中,卵母细胞胞质中有长型瘦素受体表达,随卵泡的发育,卵泡细胞中免疫反应阳性细胞数量逐渐增加;在胚泡附植期,瘦素受体在子宫腺和子宫内膜上皮细胞中大量表达。妊娠期血清瘦素浓度均高于间情期,且瘦素浓度从间情期到妊娠4日龄,呈上升趋势,妊娠5日龄稍下降,后随妊娠日龄逐渐增加。结果表明,瘦素及其长型受体能够促进卵泡发育,有利于小鼠胚泡的附植。