人脑内一含有ACP样结构域新基因的发现

为寻找脑内新基因 ,以正常成人全脑cDNA为模板 ,采用锚定PCR方法进行扩增 ,将经琼脂糖DNA电泳鉴定获得的一约 12 0 0bp大小的特异性条带回收 ,并克隆入Teasy载体 .用 310GeneticAnalyzer进行自动测序 .所得序列进行生物信息学分析 :BLAST相似性分析结果证明所得序列为新序列 ,读框分析表明 ,该序列中存在一完整编码区 ,编码含 35 7个氨基酸的蛋白质 .ProDom软件分析发现其含有酰基携带蛋白 (ACP)样结构域 .随后 ,经 3′RACE法克隆到该基因的全长cDNA ,其全长为 2 0 2 4bp ,染色体定位在 14q11 2 ,含有 16个外显子 ,15个内含子 ,该基因已登录到GenBank .经设计编码区引物 ,从Teasy载体扩增出编码区后再克隆入pGEX 4T1表达载体 ,经异丙基硫代 D 乳糖苷 (IPTG)化学诱导表达 .其编码区克隆入 pGEX 4T1表达载体后 ,转入JM10 9宿主菌 ,经IPTG诱导已得到表达 .点杂交及RNA印迹表明 ,该基因在正常成人脑内广泛高表达 .

基于PCR的消减杂交法克隆脑胶质瘤肿瘤相关基因和抑癌基因

背景与目的:脑胶质瘤是神经系统常见肿瘤,其发病机制尚不清楚。本研究运用基于PCR的消减杂交法克隆脑胶质瘤肿瘤相关基因和抑癌候选基因,并探讨胶质瘤的分子生物学发病机制。方法:从人脑胶质瘤组织标本中提取mRNA,反转录成cDNA,然后采用基于PCR的消减杂交法克隆脑胶质瘤肿瘤相关基因和抑癌基因。结果:在肿瘤相关候选基因组克隆到人星形细胞内富含的磷酸蛋白PEA15(phosphoproteinenrichedinastrocytesof15)和酸性纤维蛋白生长因子(acidfibroblastgrowthfactor,aFGF)同源物等基因,在抑癌候选基因组克隆到干扰素诱导蛋白17和ndr2等。ndr2在正常脑组织中广泛表达,在胶质瘤组织内无表达。结论:ndr2基因是抑癌候选基因,可能在胶质瘤的发生中起一定作用。

PH结构域研究进展

PH结构域是一种新发现的约由100～120个氨基酸残基组成的功能性结构域，广泛分布于单细胞生物和无脊椎、脊椎动物及人的细胞骨架蛋白和信号分子等100多种蛋白中，能与脂类、G蛋白的βγ亚单位、PKC等配体相结合，推测其对蛋白质具有细胞和亚细胞水平的膜定位作用，并参与调节宿主蛋白的活性，从而介导信号转导过程中的蛋白质-脂类、蛋白质-蛋白质之间的相互作用。

一种胶质瘤相关的酸性成纤维细胞生长因子mRNA同源物

目的 克隆胶质瘤相关基因 .方法 取胶质瘤患者新鲜肿瘤标本及肿瘤附近正常脑组织提取 m RNA,反转录成c DNA.采用基于 PCR的消减杂交法获得差异的 c DNA,并经多聚酶链反应扩增后克隆入 T载体测序 .用打点杂交法验证差异克隆 .结果 获得一胶质瘤相关的酸性成纤维生长因子基因同源物 .结论 该酸性成纤维生长因子基因同源物是酸性成纤维生长因子 m RNA的不同拼接产物 ,可能参与胶质瘤的形成 .

曲古霉素A抑制肝癌细胞的糖酵解

目的研究表观遗传药物组蛋白去乙酰化抑制剂曲古霉素A(TSA)对miR-34家族(miR-34a/b/c)在肝癌细胞中表达的影响及其抑制肝癌细胞糖酵解的分子机制。方法在肝癌细胞系中分别转染miR-34模拟物或相应阴性对照,用real-time PCR法检测miR-34a/b/c的表达以及糖酵解途径关键酶的表达;在肝癌细胞中分别转染miR-34b模拟物、相应阴性对照,或用TSA、DMSO处理肝癌细胞,用乳酸检测试剂盒、葡萄糖检测试剂盒分析miR-34b及TSA对肝癌细胞Hep G2、PLC/PRF/5糖酵解途径的影响;设计拯救实验在Hep G2细胞中研究TSA、miR-34b与肝癌细胞糖酵解调控的关系。结果 TSA可以诱导Hep G2、PLC/PRF/5肝癌细胞内源性miR-34b的表达上调(P<0.01);过表达miR-34b可以抑制糖酵解关键酶LDH-A的表达(P<0.05);miR-34 b可以抑制含有LDH-A 3'非翻译区的报告基因活性;敲低miR-34 b的表达可以降低TSA对肝癌细胞Hep G2糖酵解途径的抑制作用。结论 TSA通过诱导miR-34 b表达上调发挥抑制肝癌细胞的代谢转换。

合并呼吸肌麻痹的格林-巴利综合征的救治

林-巴利综合征(Guillain-Barre Syndrome,GBS)是神经系统的常见病,常累及广泛的运动性颅、脊神经根,引起广泛的下运动神经元瘫痪。当支配呼吸肌的神经受累时,常会引起不同程度的呼吸肌麻痹,而危及病人的生命。现将我科收治疗的GBS患者中合并有呼吸肌麻痹的163例(占44％)患者的救治情况总结如下。

病毒性脑炎患者血清及脑脊液中可溶性白介素Ⅱ受体的水平

病毒性脑炎患者血清及脑脊液中可溶性白介素Ⅱ受体的水平邓艳春吴保仁杨毅宁粟秀初（第四军医大学西京医院神经内科西安７１００３３）关键词病毒性脑炎白介素Ⅱ脑脊液中图号Ｒ４４６．６２有文献报道［１］，一些病毒感染性疾病患者血清中可溶性白介素Ⅱ受体（ｓＩＬ－２...

P40蛋白在大肠杆菌内的表达及初步纯化

To obtain purified P40 protein for the further study on its function.Sequence coding for protein P40 was amplified from whole p40 gene by PCR method and cloned into pGEX\|4tl vector for expression.Expressed protein induced by IPTG was then purified with glutathione agrose by means of affinity chromatography.Results showed that the coding sequence of a new gene we cloned previously could be expressed in E.coli with the form of fusion with GST and the fusion protein existed in inclusion bodies of the bacteria.

静脉输注大剂量人血免疫球蛋自在治疗神经系统自身免疫性疾病中的应用

静脉输注大剂量人血免疫球蛋自在治疗神经系统自身免疫性疾病中的应用邓艳春综述冯幼启审校免疫球蛋白在临床上的应用已有４０余年的历史［１］，初期只限于肌肉注射，主要用于治疗免疫缺陷性疾病．肌注免疫球蛋白有一定的限制性，比如，注射后７天才能达到有效血浓度，注...

32例格林-巴利综合征的死因分析

我院自1975～1997年5月间共收治格林-巴利综合征(GBS)患者408例,按《临床疾病诊断依据治愈好转标准》确诊及资料完整者370例,其中死亡32例,占收治人数的8.6％,现将死亡原因分析报告如下。 临床资料 32例患者中男22例,女10例,年龄1岁10个月～60岁,14岁以下儿童9例,占儿童患者的6.18％;15～50岁者19人,占该年龄患者的9.5％;50岁以上者4人,约占该年龄组患者的18％。

家庭医生团队签约服务对慢性病患者的健康管理效果分析

目的:分析家庭医生团队签约服务对慢性病患者健康管理的应用效果。方法:选取2020年4月-2021年4月通州区台湖社区纳入健康管理的慢性病患者102例为观察对象,通过抽签法分为对照组与研究组,各51例。对照组采取常规健康管理服务方式,研究组采取家庭医生团队签约服务方式。比较两组患者自我控制行为达标率及血压、血糖变化。结果:研究组患者合理运动、规律作息、保健品使用、饮食控制、规范用药、自我监测血压与血糖、其他方面的自我控制行为达标率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。健康管理前,两组舒张压、收缩压、糖化血红蛋白、餐后2 h血糖、空腹血糖水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);健康管理后,研究组患者舒张压、收缩压、糖化血红蛋白、餐后2 h血糖、空腹血糖均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:运用家庭医生团队签约服务对慢性病患者进行健康管理,患者的自我控制行为达标率显著提升,有助于疾病防控。

5-AZA抑制肝癌细胞BEL7402代谢方式转换

目的研究去甲基化药物5-AZA对miR-34a和miR-34c在肝癌细胞中表达的影响及其抑制肝癌细胞糖酵解的分子机制。方法用real-time PCR法检测肝癌细胞系中miR-34a/c的表达以及糖酵解途径关键酶的表达;在肝癌细胞中过表达miR-34a、miR-34c或用5-AZA处理肝癌细胞,用乳酸检测试剂盒、葡萄糖检测试剂盒分析miR-34a/c及5-AZA对肝癌细胞BEL7402糖酵解的影响;设计拯救实验研究5-AZA、miR-34a/c与肝癌细胞糖酵解调控的关系。结果 5-AZA可以诱导BEL7402肝癌细胞内源性miR-34a、miR-34c的表达上调(P<0.01);过表达miR-34a/c可以抑制糖酵解关键酶LDH-A的表达(P<0.05);LDH-A是miR-34a/c的潜在靶基因;敲低miR-34a/c的表达可以降低5-AZA对肝癌细胞BEL7302糖酵解途径的抑制作用。结论 5-AZA通过诱导miR-34a/c表达上调,发挥抑制肝癌细胞代谢方式转换的功能。

转化生长因子与胶质细胞瘤

转化生长因子与胶质细胞瘤第四军医大学西京医院神经内科邓艳春综述粟秀初校转化生长因子（ＴＧＦｓ）是一组小分子多肽，１９７８年首次在Ｍｅｌｏｎｅｙ肉瘤转化的鼠３Ｔ３细胞条件培养基里被发现。经十余年的研究，人们对其性质、来源、分类及生物功能有了进一步的认识...

一种新的抑癌候选基因——NDR2在人类正常组织及相应肿瘤中的表达

为观察NDR2基因在人类正常组织及相应肿瘤组织中的表达分布特点 ,收集人脑与胶质瘤、肺与肺癌、胃与胃癌、结肠与结肠癌组织标本 ,分别进行组织石蜡切片和总RNA提取 ,应用免疫组化方法和RT PCR技术检测NDR2蛋白质及mRNA表达水平 ,并通过DNA测序验证PCR产物的正确性 .免疫组化结果表明 ,在上述各组织均有NDR2蛋白不同程度的表达 .RT PCR结果显示 ,在人脑和胶质瘤组织、肺与肺癌组织、胃与胃癌组织、结肠与结肠癌组织中均有NDR2mRNA表达 ,其表达水平以脑组织为最高 .NDR2mRNA在正常脑和肺组织的表达水平分别显著高于胶质瘤与肺癌组织 ,而结肠与结肠癌组织 ,胃与胃癌组织NDR2mRNA表达水平则无显著差别 .以上结果表明 ,NDR2基因可能广泛表达于人体正常组织内 ,而在胶质瘤与肺癌中的表达较相应正常组织减低 ,提示该基因可能与神经系统及呼吸系统肿瘤的发生发展有关 ,为进一步探讨该基因功能提供了线索 .

Ndrg2基因表达对胃癌细胞增殖调控及其机理的研究

为研究Ndrg2基因在人类肿瘤发生发展中的作用 ,以不表达Ndrg2基因的胃癌细胞系HGC 2 7和表达Ndrg2基因的胃癌细胞系SGC 790 1作为对比材料 ,以Ndrg2基因转染HGC 2 7胃癌细胞系 ,以及用Ndrg2的反义寡核苷酸封闭SGC 790 1胃癌细胞系中Ndrg2基因的表达 .发现Ndrg2可以抑制HGC 2 7胃癌细胞的软琼脂集落形成 ,有一定诱导细胞凋亡的作用 ,对细胞周期蛋白E的表达有明显下调作用 .当封闭了SGC 790 1胃癌细胞中Ndrg2基因表达的软琼脂集落形成受到抑制 ,流式细胞仪检测发现此时的SGC 790 1细胞周期被阻滞在G1期 ,细胞周期蛋白D1和E表达下调 .Ndrg2基因对两种肿瘤细胞中的细胞外信号调节激酶 (ERK)和P38的表达也有不同的影响 .

NDRG2在人胚胎组织中的表达分布特点

本文旨在研究NDRG2在不同胎龄人胚胎组织中的表达水平及细胞定位。利用RT-PCR和Western blot研究NDRG2 mRNA和蛋白在胎心、肺、肝和肾中的表达水平,免疫组织化学分析NDRG2蛋白在多种胚胎组织中的分布特点。结果表明,NDRG2在胚胎组织中的表达随胚龄的延长而增加。NDRG2 mRNA和蛋白在胎心和肺中的变化一致；在胎肝中mRNA表达低而蛋白表达高,在胎肾中则相反。NDRG2蛋白阳性反应产物存在于细胞胞浆,见于小肠绒毛上皮细胞、结肠上皮细胞、皮肤表层细胞及毛囊、肺内小气道内衬上皮细胞、肝细胞、心肌细胞、胸腺小体、肾小管上皮细胞。结果提示,NDRG2蛋白可能不是一个组织特异性蛋白,并在组织和器官的形成中起作用。