微生态制剂在畜禽生产中的研究和应用进展

微生态制剂是一种无毒、无污染、无残留、低成本的新型饲料添加剂,近年来被广泛应用于畜禽渔业养殖中。微生态制剂有提高饲料利用率、促进动物生长发育、改善动物肉质、增强动物免疫力、改善畜禽饲养环境等优势。文章主要对动物微生态制剂的分类、作用原理、在畜禽渔业方面的应用现状、存在问题及发展进行论述,以期为微生态制剂的相关研究提供参考。

亚香棒虫草多糖C-10体外抗肿瘤活性研究

[目的]研究亚香棒虫草多糖C-10体外抗肿瘤活性。[方法]以亚香棒虫草分离筛选的内生真菌为菌种,液体转化发酵产虫草多糖,经过分离提取得胞内和胞外多糖,并探讨其对3株癌细胞(肺腺癌A549细胞、乳腺癌MCF-7细胞、神经母癌SH-SY5Y细胞)的生长抑制效果。[结果]随着时间和浓度的增大,胞内多糖对癌细胞的抑制率逐渐增大,且差异较为明显,在培养72h的条件下,BN-H多糖(0.0966mg/mL)对肺腺癌A549细胞、乳腺癌MCF-7细胞、神经母癌SH-SY5Y细胞的抑制率分别为97%、71%、97%,比其他浓度的胞内外多糖抑制效果更好。[结论]BN-H(0.0966mg/mL)的亚香棒虫草多糖对肺腺癌、乳腺癌和神经母癌细胞具有极显著抑制作用(P<0.01),具有较强的时间和浓度依赖性,且胞内多糖对癌细胞的抑制效果好于胞外多糖。

“减抗”、“替抗”背景下抗菌肽的应用和研究进展

抗菌肽是一类广泛存在于各种生物体内的防御性小肽,为免疫系统的重要组成成分,是目前替代抗生素较为理想的抗菌剂之一。抗菌肽具有抗细菌、抗真菌、抗病毒、抗肿瘤等生物活性功能,还可作为信号分子、避孕剂、有丝分裂剂等。但目前抗菌肽也存在一些需要解决或具有争议的问题,如怎么提高基因工程抗菌肽的表达量和抗菌肽在体内的稳定性,其具体的耐药性机制尚未明确,抗菌肽与抗生素的协同作用机理等。文章从抗菌肽的结构特点、生理功能与作用机制、基因工程表达及其应用前景方面进行了阐述,并分析存在的问题,为研究绿色、高效、低毒、广谱的抑菌剂提供重要信息。

重组菌丝霉素在毕赤酵母中的分泌表达及活性研究

为获得一种能分泌菌丝霉素的毕赤酵母菌并探讨菌丝霉素的活性,将优化的目的蛋白碱基序列与标签MBP基因序列融合,通过双酶切将重组基因序列插入到毕赤酵母pGAPZaA表达载体上并进行连接反应。取10μL连接产物转化至感受态细胞,挑取含Zeocin(25 mg/L)平板筛选出的单菌落进行PCR鉴定,将阳性克隆送往测序公司测序。对鉴定正确的含有重组质粒的大肠杆菌DH5α进行活化培养并提取其质粒,得到的重组质粒进一步线性化和纯化,并电转入GS115感受态细胞中筛选出阳性克隆,诱导分泌蛋白,对其进行Western blot检测、纯化、活性分析和质谱鉴定,得到的重组蛋白为55 Ku左右,浓度为700 mg/L,纯度达到80%以上。质谱鉴定结果表明,蛋白序列的覆盖率达到98%,纯化后的蛋白也对金黄色葡萄球菌具有抑制作用,成功构建出一株能够分泌菌丝霉素的毕赤酵母菌,这为菌丝霉素的工业化生产和研发新型绿色的饲料添加剂奠定了基础。