猪圆环病毒2型Cap蛋白多克隆抗体的制备及鉴定

旨在制备猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白的多克隆抗体。以PCV2毒株(CAU0673)DNA为模板进行PCR,扩增目的片段大小约为702bp,构建pET30a-PCV2-Cap重组质粒,转入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达;对目的蛋白进行Ni-NTA树脂亲和层析纯化、复性,并进行SDS-PAGE和Western blot鉴定;将纯化后的重组Cap蛋白与弗氏佐剂混匀乳化,经背部皮下多点注射4次,免疫新西兰大耳白兔,制备成兔抗Cap蛋白多克隆抗体,采用Western blot和间接免疫荧光试验(IFA)验证兔抗血清特异性,并用间接ELISA测定抗血清抗体效价。PCR、双酶切和测序鉴定结果表明,重组质粒pET30a-PCV2-Cap构建正确;重组Cap蛋白以包涵体的形式表达,大小约为34kD,复性后重组Cap蛋白可与PCV2阳性猪血清发生特异性反应;制备的多克隆抗体与PCV2重组Cap蛋白和全病毒抗原均可发生反应,ELISA抗体效价>1∶12800,显著高于商品化疫苗组。

开江县布鲁氏杆菌病发生现状及净化措施

介绍了开江县布鲁氏杆菌病的流行现状、存在的问题,并提出了相应的净化措施,供参考。

浅析水利工程河道设计的美化与自然化

在经历了经济的飞速发展之后,对于城市建设的重点逐渐转向规划布局和景观环境的设计方面。城市水利工程的建设,除了重视经济性之外,也开始关注河道设计的美化与自然化。本文就水利工程河道设计中的美化与自然化进行了分析,以供参考。

四川省开江县村级动物防疫员队伍现状分析与建议

为全面了解开江县机构改革和乡镇区划调整后村级动物防疫员队伍状况,对全县219个村级动物防疫员的现状进行分析,并针对所出现的问题提出了相应解决对策和建议。