HPLC程序波长法同时测定黄连解毒汤中栀子苷和4种黄酮类成分的含量

目的:建立一种同时检测黄连解毒汤中栀子苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的 HPLC 方法。方法:采用Kromasil C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈(A)-5 mmol·L^(-1)磷酸二氢钠溶液(含0.05%磷酸,pH 3.0)(B)为流动相,线性梯度洗脱(0～8.5 min,86.5%B;8.5～17.0 min,86.5%B→80%B;17～30 min,80%B;30～40 min,80%B→60%B;40～51 min,60%B→52%B;51～55 min,52%B→42%B;55～60 min,42%B→86.5%B;60～65 min,86.5%B),流速1.0 mL·min^(-1),程序可变波长紫外检测(0～15 min,238 nm;15～50 min,276 nm)。结果:在58 min 内黄连解毒汤中栀子苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素5种成分被完全分离;回归方程显示5种成分的峰面积与其浓度呈良好的线性;5种成分的加样叫收率(n=15)分别为102.2%,97.56%,98.61%,97.85%,98.41%;RSD 小于5.0%。结论:利用程序可变波长检测,建立了一种可靠的同时测定黄连解毒汤中5种标志性成分含量的 HPLC 方法。

高效液相色谱法测定芦荟大黄素的有关物质

目的 建立HPLC法测定芦荟大黄素中有关物质的含量。方法 采用HPLC法分析,色谱柱为Welch Xtimate C18(150 mm×4.6 mm,5μm)柱;以pH 2.0磷酸盐缓冲液-甲醇-乙腈为流动相,梯度洗脱;流速为1.2 mL·min^(-1),进样量为20μL,柱温为30℃,检测波长为254 nm。结果 芦荟大黄素与其有关物质的色谱峰均能良好分离,精密度试验表明,当杂质含量<0.1%,12份样品的RSD<13%;当杂质含量≥0.1%,12份样品的RSD<4.0%,方法精密度良好。同一厂家6批芦荟大黄素样品测定结果显示,最大单杂为已知杂质大黄醛,含量1.42%,杂质总含量小于5.0%,但不同批样品间杂质存在差异。结论 建立的方法灵敏、专属性强,准确度高,可用于芦荟大黄素有关物质的测定。

黄连解毒汤中黄芩苷和汉黄芩苷在糖尿病大鼠体内的药动学

目的研究黄连解毒汤中主要成分黄芩苷、汉黄芩苷在糖尿病大鼠体内的药动学。方法链脲佐菌素ip给药建立糖尿病大鼠模型,ig黄连解毒汤提取物后取血分离血浆,采用HPLC-UV法检测血浆中黄芩苷、汉黄芩苷质量浓度,以矩量法计算药动学参数。采用黄连解毒汤提取物与大鼠粪便温孵,从肠道代谢方面研究黄芩苷和汉黄芩苷动力学改变的初步机制。结果黄芩苷在正常大鼠和糖尿病大鼠中的tmax2分别为(4.50±1.92)、(7.5±1.0)h,Cmax1分别为(2.83±0.25)、(9.54±2.87)μg/mL,Cmax2分别为(2.56±0.63)、(6.58±1.15)μg/mL,AUC(0～24)分别为(37.58±7.57)、(92.75±24.62)μg.h/mL,t1/2分别为(6.6±2.4)、(12.64±3.35)h。汉黄芩苷在正常大鼠和糖尿病大鼠中的tmax2分别为(5.5±1.0)、(8.00±1.63)h,Cmax1分别为(1.36±0.17)、(6.16±1.40)μg/mL,Cmax2分别为(1.58±0.17)、(4.11±0.76)μg/mL,AUC(0～24)分别为(27.02±3.72)、(58.16±16.43)μg.h/mL,t1/2分别为(9.72±2.24)、(7.89±1.63)h。实验结果表明大鼠在糖尿病病理状态下黄芩苷和汉黄芩苷的Cmax1、Cmax2、AUC(0～24)明显增加,黄芩苷的t1/2显著延长。粪便温孵的结果表明,黄芩苷在糖尿病大鼠粪便中降解加快。结论黄芩苷在糖尿病大鼠中的动力学改变的原因可能由于黄芩苷在糖尿病大鼠肠道代谢加快。

西红花酸对大鼠实验性动脉粥样硬化的影响(英文)

目的 研究西红花酸对大鼠实验性动脉粥样硬化的影响。方法 采用给予大剂量维生素 D2 ( VD2 )后饲喂高胆固醇饲料诱发大鼠实验性动脉粥样硬化模型 ,测定大鼠血清总胆固醇 ( TC)、甘油三酯 ( TG)、低密度脂蛋白( L DL- C)、高密度脂蛋白 ( HDL- C)、丙二醛 ( MDA)含量和超氧化物歧化酶 ( SOD)活性。取主动脉和肝脏做病理切片检查。结果 高、低剂量的西红花酸能显著降低动脉粥样硬化大鼠血清 TC、L DL - C和 MDA含量 ;显著升高血清 HDL- C含量、SOD活性和抗动脉粥样硬化指数 ( AAI)。病理切片结果表明 ,西红花酸能明显减轻模型大鼠动脉粥样硬化性损伤。结论 西红花酸具有显著的抗大鼠实验性动脉粥样硬化作用。

黄芩提取物中有效成分黄芩苷和汉黄芩苷在糖尿病大鼠中的药动学研究

目的:比较黄芩提取物中主要成分黄芩苷和汉黄芩苷在糖尿病大鼠和正常大鼠体内的药动学。方法:腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,灌胃黄芩提取物后取血分离血浆,采用HPLC-UV法检测血浆中黄芩苷和汉黄芩苷浓度,以矩量法计算药动学参数,AUC(0-τ)的计算采用梯形法。采用黄芩提取物与大鼠粪便温孵,从肠道代谢研究黄芩苷和汉黄芩苷动力学改变的初步机制。结果:与正常大鼠比较,糖尿病大鼠给予黄芩苷和汉黄芩苷后体内Cm ax1明显增加[黄芩苷:(6.07±0.95)vs.(17.01±3.60)μg.mL-1,P<0.01;汉黄芩苷:(3.50±0.72)vs.(9.34±2.04)μg.mL-1,P<0.01],Cm ax2明显增加[黄芩苷:(1.61±0.18)vs.(7.39±3.04)μg.mL-1,P<0.01;汉黄芩苷:(1.95±0.52)vs.(6.72±2.60)μg.mL-1,P<0.01],AUC(0-τ)也明显增加[黄芩苷:(38.72±7.25)vs.(86.70±20.91)μg.mL-1.h,P<0.01;汉黄芩苷:(39.20±12.10)vs.(69.40±24.20)μg.mL-1.h,P<0.01],粪便悬浮液中黄芩苷降解也加快(Ke:0.087 vs.0.173 m in-1)。结论:黄芩苷和汉黄芩苷在糖尿病大鼠与正常大鼠之间存在明显的药动学差异,在糖尿病大鼠肠道内代谢加快。

PBL教学法在研究生课程"高级药物分析"教学中的探讨与实践

针对传统教学模式下理论讲授枯燥乏味、教师与学生互动较少等弊病,以生药学及药物分析专业研究生的"高级药物分析"课程为研究对象,探索在新形势下采用新的PBL教学模式,提高学生的学习兴趣,提高学生运用专业课知识解决实际问题的能力.通过我们在"高级药物分析"课程开展PBL教学研究与实践,发现PBL教学尤其适合于研究生阶段的专业课程教学.

小檗碱对黄芩苷在大鼠中药代动力学的影响

目的:研究小檗碱影响黄芩苷药代动力学行为的机制。方法:三组大鼠分别ig黄芩苷、黄芩苷与小檗碱的混合物以及先小檗碱、2h后再黄芩苷。用HPLC法测定血浆中的黄芩苷浓度并计算其药代动力学参数。采用肠外翻实验研究测定黄芩苷在十二指肠、空肠、回肠段的吸收情况。测定黄芩苷在给小檗碱处理大鼠和正常大鼠粪便中的分解曲线。结果:体内实验中,同时给药组中黄芩苷的血药浓度和AUC与单用组相比显著降低,分开给药组情况有所改善。体外实验中,黄芩苷在肠中吸收存在区域性:回肠>十二指肠>空肠。黄芩苷在ig小檗碱后的粪便混悬液中的降解要比在ig小檗碱前的粪便混悬液中的降解慢。结论:小檗碱显著降低口服黄芩苷的AUC,小檗碱可能通过与黄芩苷生成共沉淀和抑制β-葡萄糖醛酸酶活性进而减少黄芩苷转化成黄芩素影响黄芩苷的吸收。

高脂血症大鼠灌胃黄连解毒汤后黄芩苷的药代动力学研究

目的研究高脂血症大鼠灌胃黄连解毒汤提取物后,其成分黄芩苷的药代动力学特征,并探讨其药代动力学改变的机制。方法采用高脂饲料法诱导高脂血症大鼠模型,灌胃给予黄连解毒汤提取物、黄芩提取物,研究其主要成分黄芩苷的药代动力学特征。采用静脉注射黄芩苷研究其在高脂血症大鼠中的系统消除。制备肝微粒体,研究黄芩苷与微粒体温孵代谢转化情况。结果高脂血症大鼠灌胃黄连解毒汤提取物后黄芩苷的药代动力学参数发生显著改变,AUC显著增大,MRT显著延长(P<0.01)。灌胃给予黄芩提取物后,黄芩苷的药代动力学特征与灌胃黄连解毒汤后黄芩苷的药代动力学特征相似。静脉注射黄芩苷后,黄芩苷在高脂血症大鼠中的系统消除显著减慢,清除率显著降低(P<0.01)。黄芩苷与高脂血症大鼠肝微粒体温孵,其代谢转化相比正常大鼠肝微粒体温孵减慢。结论高脂血症大鼠灌胃黄连解毒汤提取物后黄芩苷的药代动力学发生改变,至少部分是由于高脂血症病理状态下肝脏的药物代谢转化能力降低,导致其AUC显著增加,MRT显著延长,提示临床使用黄连解毒汤治疗高脂血症时可能要调整剂量。

银杏内酯B对CYP2C9底物双氯芬酸在大鼠体内药动学和药效学的影响

目的:在大鼠体内,以双氯芬酸为工具药,研究银杏内酯B对双氯芬酸药动学和药效学的影响,阐明银杏内酯B对大鼠肝细胞色素P450 2C9(CYP 2C9)是否有抑制或诱导作用。方法:通过观察大鼠连续给予银杏内酯B(剂量为12 mg·kg^(-1),ip,bid,连续7 d)前后对单次给予临床等效量的双氯芬酸(15 mg·kg^(-1),iv)的药时曲线及药动学参数的改变,评价其对双氯芬酸药动学的影响,并评价银杏内酯B连续给药后对单次给予双氯芬酸抗足跖肿胀作用药效学的影响。结果:连续给予银杏内酯B后,与用药前比较,双氯芬酸及其主要代谢物4-羟基双氯芬酸的血药浓度及其药动学参数未见显著性改变;双氯芬酸抗足跖肿胀作用亦未见显著性改变。结论:多剂量给予银杏内酯B对临床等效量双氯芬酸在大鼠体内药动学和药效学无显著影响;银杏内酯B对大鼠肝CYP 2C9无明显的抑制或诱导作用。

中药千金黄连丸的抗动脉粥样硬化作用

目的探讨千金黄连丸(QHW)对动脉粥样硬化大鼠的影响及其初步机制。方法采用高效液相色谱法测定QHW提取物中小檗碱和梓醇的含量。采用高胆固醇饮食并给予过量维生素D;诱导大鼠动脉粥样硬化模型,研究QHW提取物对动脉粥样硬化大鼠血脂的影响以及对动脉粥样硬化大鼠主动脉壁的形态的影响。采用巨噬细胞诱导泡沫细胞模型,研究QHW提取物及含药血清对泡沫细胞形成的抑制作用,探讨QHW抗动脉粥样硬化的初步机制。结果 QHW提取物能显著调节血脂水平,与模型组比,高剂量组TC、TG、LDL-C水平显著下降(P<0.01),HDL-C水平显著升高(P<0.01)。QHW提取物可以显著改善动脉粥样硬化大鼠主动脉血管壁的形态特征。含药血清和QHW提取物均能降低泡沫细胞中胆固醇酯的含量,防止泡沫细胞形成。其中含药血清降低泡沫细胞中胆固醇酯含量的效果更好。结论 QHW对高胆固醇饮食诱导的动脉粥样硬化大鼠具有明显的抗动脉粥样硬化作用。QHW可能通过抑制泡沫细胞的形成和调节血脂发挥抗动脉粥样硬化的作用。

外圆磨床关键零部件三维参数化CAD系统开发的关键技术

以外圆磨床关键零部件为研究对象,介绍了用VisualBasic开发SolidWorks的基本原理,并通过实例论述了外圆磨床关键零部件三维参数化CAD系统开发的关键技术。

磨床砂轮架零件三维参数化CAD系统的开发

以SolidWorks为设计平台,阐述了如何建立磨床砂轮架零件模型及其工程图;通过SolidWorks提供的对象模型和API编程接口,利用VB程序设计语言完成二次开发,建立了砂轮架三维参数化CAD系统。

磨床砂轮架零件三维参数化CAD系统的开发

文章以SolidWorks为设计平台,阐述了如何建立磨床砂轮架三维CAD零部件模型及其工程图;通过SolidWorks提供的对象模型和API编程接口,利用VB程序设计语言完成二次开发,建立了砂轮架三维参数化CAD系统。

扇贝蛋白酶解物中的新型抗氧化肽研究

目的利用海洋芽孢杆菌SCSIO06063来源的蛋白酶对扇贝蛋白进行酶解制备抗氧化肽。方法采用超滤和反复色谱分离纯化扇贝水解物。获得的肽类结构通过基质辅助激光解析飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS/MS)鉴定,采用DPPH自由基清除实验评价肽类的抗氧化活性。结果分离纯化后获得3个肽类组分A、C和E,依次被鉴定为His-Ala-Ile-Ile-Met-Met-Val(A)、Leu-Asn-Pro-Lys-LeuIle-Met-Val(C)和Met-Ile-Leu-Ile-Leu-Phe-Arg(E),经NCBInr数据库中Blast检索,未发现A组分的同源序列,提示其为一个新的肽类结构。A、C和E 3个组分均具有一定的抗氧化能力,在浓度为1.0mg·m L-1时,它们的清除率分别为51.6%、55.4%和53.4%。结论海洋芽孢杆菌SCSIO06063来源的蛋白酶可用于扇贝蛋白酶解制备抗氧化肽。

草鱼胆中鲤醇的分离与结构鉴定

本文采用制备薄层、酸碱水解、反相分配柱层等实验技术从草鱼胆盐分离鲤醇和脱水鲤醇,用IR、MS、~1H-NMR等物理测试验证其结构,进而由化学分析证实鲤醇在草鱼胆汁中存在形式为鲤醇硫酸酯钠,并测量了在胆汁内的含量。

激趣质疑、构建有效数学课堂初探

课堂是学生获取知识的主阵地,有效的教学活动能激发学生学习兴趣、引导学生积极主动地参与学习,让数学课堂充满活力。我们发现:结合现实生活,以问题为导向,围绕解决问题这一主线,引导学生自觉参与探究活动,对于教师落实新数学课程标准是非常有帮助的,对于构建有效课堂是可行的。

用LC-MS/MS法同时测定人血浆中甘草酸及其活性代谢产物甘草次酸的浓度

目的建立LC-MS/MS法同时测定人血浆中甘草酸(GLY)及其主要活性代谢产物甘草次酸(GA)的浓度。方法人血浆用甲醇沉淀蛋白后,用Synergi TM 4μm Fusion-RP 80A色谱柱(2.0 mm×50 mm,4μm)进行分离,流动相为乙腈(含0.1%甲酸)-水(含0.1%甲酸),梯度洗脱,流速为0.6 mL·min^(-1)。用电喷雾离子源,负离子模式,多反应监测(MRM)扫描方式进行监测。考察该方法的专属性、线性范围、精密度与准确度、提取回收率、基质效应、稀释验证和稳定性等。结果甘草酸和甘草次酸分别在0.30~80.00 ng·mL^(-1)和1.80~480.00 ng·mL^(-1)线性关系良好,定量下限分别为0.30和1.80 ng·mL^(-1),提取回收率分别为98.14%~109.10%和97.25%~100.87%,甘草酸和甘草次酸都没有明显的基质效应。质控样品批内和批间精密度均小于10.72%,准确度在95.38%~109.34%。结论该方法快速、准确,灵敏度高、专属性强,可用于甘草酸及其活性代谢产物甘草次酸的人体血药浓度检测及复方甘草酸苷片的药代动力学研究。

黄连解毒汤对体内外晚期糖基化终产物形成的影响

目的探讨黄连解毒汤对体内外晚期糖基化终产物(AGEs)形成的影响。方法链脲佐菌素(ip给药)建立糖尿病大鼠模型,以不同剂量(0.5、1.0 g/kg)黄连解毒汤ig给药90 d后,检测血糖、糖化血红蛋白,血浆和肾组织中的果糖胺和AGEs水平。将不同浓度的黄连解毒汤与葡萄糖和牛血清白蛋白孵育21 d,用荧光光度法测定AGEs的荧光值。结果黄连解毒汤能明显降低糖尿病大鼠的血糖和糖化血红蛋白水平(P<0.01),抑制血浆和肾组织的果糖胺和AGEs的生成(P<0.01),并呈明显的剂量依赖性。黄连解毒汤对体外AGEs的生成也有明显的抑制作用,并有一定的剂量依赖性。结论黄连解毒汤对体内外AGEs的生成均有明显的抑制作用,这可能是黄连解毒汤治疗糖尿病并发症的机制之一。

黄连解毒汤对糖尿病大鼠肠道二糖酶活性的影响

目的研究黄连解毒汤对糖尿病大鼠的降血糖作用及对糖尿病大鼠肠道二糖酶活性的影响。方法链脲佐菌素(ip)建立糖尿病大鼠模型;糖尿病大鼠ig给予黄连解毒汤提取物治疗1个月,观察治疗后血糖变化,测定各肠段肠内容物中的二糖酶(蔗糖酶、麦芽糖酶、乳糖酶)活性。正常大鼠小肠注入麦芽糖,30、60、120 min后取门静脉、外周静脉血,测定门静脉与外周静脉血中葡萄糖浓度差值。结果高、低剂量黄连解毒汤治疗后糖尿病大鼠的血糖分别降低(42.2±4.9)%、(23.1±3.8)%;黄连解毒汤治疗后糖尿病大鼠十二指肠、空肠和回肠的麦芽糖酶活性分别降低(32.2±4.3)%、(26.5±2.9)%、(36.5±5.2)%;蔗糖酶活性分别降低(33.3±3.7)%、(32.8±4.6)%、(27.4±3.3)%,乳糖酶活性分别降低(35.4±4.2)%、(17.9±2.3)%、(6.3±1.8)%。黄连解毒汤能减小大鼠小肠注入麦芽糖后门静脉与外周静脉血中葡萄糖浓度差值。结论黄连解毒汤能显著降低糖尿病大鼠血糖,其降糖机制可能与抑制糖尿病大鼠肠道二糖酶活性有关。

西红花酸对巨噬细胞源性泡沫细胞形成的影响

目的:研究西红花酸对巨噬细胞源性泡沫细胞形成的影响。方法:分离培养小鼠腹腔巨噬细胞,与氧化性低密度脂蛋白温孵培养建立泡沫细胞模型。采用高效液相法测定细胞内胆固醇的含量,观察西红花酸对巨噬细胞源性泡沫细胞形成的影响。结果:小鼠腹腔巨噬细胞与20 mg.L-1氧化型低密度脂蛋白作用72 h后,细胞内胆固醇酯占总胆固醇的65.97%,形成泡沫细胞。加入不同浓度的西红花酸后,西红花酸能剂量依赖性地抑制氧化型低密度脂蛋白所致的巨噬细胞胆固醇酯的堆积(P<0.01)。结论:西红花酸能抑制巨噬细胞源性泡沫细胞的形成,这提示西红花酸能减少巨噬细胞内胆固醇酯的堆积可能是西红花酸抗动脉粥样硬化的作用机制之一。