基于NF-κB通路探讨痛风汤对急性痛风性关节炎模型大鼠炎症的影响机制

目的:研究痛风汤通过调控核因子-κB(NF-κB)信号通路对急性痛风性关节炎(AGA)大鼠炎症的影响。方法:将60只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组、痛风汤H组、痛风汤M组、痛风汤L组,每组各10只。正常组和模型组每天灌胃蒸馏水,秋水仙碱组、痛风汤H组、痛风汤M组、痛风汤L组每天灌胃相应药物,共7 d,除正常组外均于灌胃第4天通过右踝关节注射尿酸钠(MSU)溶液诱导造模;检测大鼠关节肿胀体积、步态及关节炎症指数;ELISA法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、IL-1β炎症因子水平;HE染色观察大鼠踝关节滑膜组织病理学变化;Western blot检测大鼠踝关节滑膜组织NF-κB通路相关蛋白表达情况。结果:与正常组比较,模型组大鼠关节肿胀体积、步态级别、关节炎症指数、血清炎症因子水平、组织病理学程度、NF-κB通路相关蛋白水平显著升高(P<0.05)。与模型组相比,痛风汤各组大鼠关节肿胀体积、步态级别、关节炎症指数显著降低(P<0.05),且痛风汤各组剂量依赖性地降低大鼠血清炎症因子水平和踝关节炎性细胞浸润程度,下调NF-κB通路蛋白表达(P<0.05)。结论:痛风汤可能通过介导NF-κB通路来改善AGA大鼠炎症状态。

痛风汤对急性痛风性关节炎模型大鼠踝关节滑膜组织中NLRP3炎症小体及NETs的影响

目的探讨痛风汤防治急性痛风性关节炎的可能作用机制。方法将60只Wistar雄性大鼠按照随机数字表法分为正常组、模型组、秋水仙碱组及痛风汤低、中、高剂量组,每组10只。痛风汤低、中、高剂量组分别给予痛风汤11.34、22.68、45.36 g/(kg·d)灌胃,秋水仙碱组给予秋水仙碱3.15×10^(-4)g/(kg·d)灌胃,正常组和模型组给予生理盐水10 ml/(kg·d)灌胃,连续7天。第5天灌胃1 h后,除正常组外其余各组大鼠参照改良Coderre法对右侧后肢踝关节建立急性痛风性关节炎模型;正常组大鼠在相同位置注射0.2 ml生理盐水。分别于造模前及造模6 h、12 h、24 h、48 h后测量大鼠踝关节肿胀度;采用HE染色观察踝关节滑膜组织病理学形态变化;免疫印迹法和RT-qPCR法分别检测踝关节滑膜组织中NOD样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、白细胞介素1β(IL-1β)蛋白及mRNA表达水平;免疫组化法检测踝关节滑膜组织中Caspase-1、IL-1β阳性表达;ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-1β、白细胞介素6(IL-6)含量;免疫荧光染色法观察踝关节滑膜组织中中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)形成情况。结果与正常组比较,模型组大鼠各时间点关节肿胀度升高,踝关节滑膜组织中炎症细胞浸润及滑膜细胞层数明显增多,NLRP3、Caspase-1、ASC、IL-1β蛋白及mRNA表达均升高,Caspase-1和IL-1β阳性表达升高,NETs形成增多,血清中TNF-α、IL-6、IL-1β升高(P<0.05)。与模型组比较,秋水仙碱组与痛风汤高、中剂量组踝关节滑膜细胞增生及炎症细胞浸润均有改善;秋水仙碱组与痛风汤高、中、低剂量组在造模24 h、48 h后关节肿胀度,踝关节滑膜组织中Caspase-1、IL-1β阳性表达和NETs形成,以及血清中TNF-α、IL-6、IL-1β含量均降低;秋水仙碱与痛风汤高剂量组踝关节滑膜组织中NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β蛋白及mRNA表达均降低(P<0.05)。秋水仙碱组和痛风汤高剂量组在降低踝关节滑膜组织中ASC、Caspase-1、IL-1β蛋白及mRNA表达,Caspase-1阳性表达,以及血清中TNF-α、IL-6、IL-1β含量方面优于痛风汤低剂量组(P<0.05)。结论痛风汤对急性痛风性关节炎有较好的防治作用,其机制可能与抑制踝关节滑膜组织中NLRP3炎症小体的组装和激活,抑制炎症因子的释放以及NETs的形成有关。

房定亚运用填精补髓法治疗脊髓型颈椎病

肾精亏虚是脊髓损伤的病机关键。房定亚教授临证治疗脊髓型颈椎病多以“填精补髓法”为指导,从肾论治,补益为主,辅以燮理阴阳、活血化瘀、扶正御邪等治法,衷中参西,结合现代药理学进行方药加减,以达到抗炎、抗氧化、提高神经营养因子水平、改善血液循环等治疗作用。