烟酰胺代谢相关基因与骨关节炎的关系探索

目的·利用生物信息学方法探索骨关节炎与烟酰胺代谢相关基因之间的关系,找到具有诊断价值和治疗潜力的关键基因。方法·以“Osteoarthritis”为检索词,在GEO数据库中获取GSE12021、GSE55235和GSE55457数据集,将GSE55457作为验证集。去除GSE12021和GSE55235数据集的批次效应后,得到标准化的合并数据集,将其作为训练集,并在训练集中筛选出差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)。在GeneCards数据库和MSigDB数据库中获取所有烟酰胺代谢相关基因(nicotinamide metabolism-related genes,NMRGs)。将DEGs与NMRGs取交集,得到烟酰胺代谢相关差异表达基因(nicotinamide metabolism-related differentially expressed genes,NMRDEGs)。对训练集进行基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA),对NMRDEGs进行基因本体(Gene Ontology,GO)、京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)分析。通过LASSO(least absolute shrinkage and selection operator)和支持向量机(support vector machine,SVM)分析筛选出NMRDEGs关键基因,构建骨关节炎诊断模型,并用验证集GSE55457进行验证。通过单样本基因集富集分析(single sample gene set enrichment analysis,ssGSEA)分析免疫细胞的浸润类型。通过DGIdb数据库、ENCORI数据库和CHIPBase数据库对关键基因的mRNA进行相互作用网络和药物小分子预测。通过干扰小RNA(small interfering RNA,siRNA)敲降软骨细胞内NMRDEGs关键基因,用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorogenic quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测关键基因敲降对软骨形成相关基因表达的影响。结果·发现了NAMPT、TIPARP等7个NMRDEGs。GO和KEGG分析富集到核因子κB信号通路和正向调节白细胞介素-1介导的信号通路等。GSEA富集到缺氧诱导因子-1转录因子通路(Hif1 Tfpathway)和多配体蛋白聚糖1(syndecan 1)通路等信号通路。LASSO分析和SVM分析共同筛选得到NPAS2、TIPARP和NAMPT关键基因并构建了骨关节炎诊断模型,验证集检验提示诊断模型诊断效果具有高准确度。ssGSEA免疫浸润分析的结果显示,巨噬细胞等15种免疫细胞存在显著差异(均P<0.05)。找到了7个针对关键基因的潜在药物小分子,19种与关键基因相互作用且上游基因与下游基因数量之和大于10的miRNA,19种与关键基因结合且上游基因与下游基因数量之和大于7的转录因子,27个聚类数>19的RNA结合蛋白。RT-qPCR结果显示,关键基因敲降会降低软骨形成相关基因的表达。结论·NPAS2、TIPARP和NAMPT为烟酰胺代谢相关的关键基因,可据此构建骨关节炎诊断模型。

专业阅读,专业发展的重要路径

教师专业成长对于提升教育质量,引领学生发展具有重大意义。阅读能够让教师了解新的教育理念和教学策略,提高教学实效。同时,通过阅读,教师可以更好地反思自己的教育行为,从而实现内在生长,自我提升。以小学舞蹈教师为例,他们既要具备良好的舞蹈技能,又要有教育引导学生的能力。目前舞蹈教师的专业成长途径主要是通过教学实践和专业培训,较少进行有针对性的、专业化的阅读研究。

剪毛法标记实验大鼠

实验动物的标记方法多种多样，实验动物中又以大鼠最为常用。其中大鼠的标记方法有染料染色法、剪脚趾法、剪耳朵法、耳朵打孔法、烙印法、号牌法等，其中染料染色法在实验室最为方便、常用。上述方法具有刺激性、染料难购买、污染环境、残忍、易混淆等缺点，大多数不符合实验动物福利原则。本研究介绍一种新的大鼠标记方法，既解决了上述标记方法存在的不足，又符合动物福利原则。

骨关节炎免疫工程治疗策略

骨关节炎是常见的慢性退行性关节疾病之一,以关节软骨损坏、软骨下骨改变、骨赘形成和关节滑膜炎症为主要病理特征。目前越来越多的研究表明免疫因素在骨关节炎发病中起着关键作用,而目前调节骨关节炎免疫的治疗药物和给药方式依旧有限,难以做到靶向性强、不良反应小且作用时间长。骨关节炎免疫工程治疗策略不仅可以通过生物材料自身作用或递送免疫调节分子起到增加关节炎治疗的靶向性和持久性的作用,而且可以通过调节或模拟间充质干细胞和巨噬细胞等关节内常驻细胞,恢复常驻细胞群的数量及作用,实现对骨关节炎免疫环境的精确控制。该文就骨关节炎免疫工程治疗策略进行综述。

体心立方金属Mo纳米线拉伸塑性行为的原位透射电子显微镜观察

本文利用自创的热双金属片拉伸装置实现了在透射电镜中,对单晶Mo纳米线的原位拉伸实验。实验发现单晶Mo纳米线具有块体单晶材料2倍左右的塑性变形能力。观察发现变形过程中位错不断的形核产生、然后快速的运动并消失在纳米线表面是单晶Mo纳米线具有大塑性变形能力的一个重要原因。另外,利用选区电子衍射对拉伸断裂后的样品分析,发现拉伸后的纳米线的断口附近呈现多晶化。可以认为在高应变作用下,位错的滑移等因素导致单晶点阵局部扭转形成小角度晶界,纳米线局部从单晶转变成多晶。

聚乙烯亚胺修饰纳米金基因载体制备及体外实验研究

目的制备聚乙烯亚胺修饰纳米金基因载体并研究其理化性质的表征参数和体外转染效率。方法通过化学还原法制备聚乙烯亚胺修饰的纳米金基因载体,用绿色荧光蛋白质粒(pAc GFPN1)做报告基因,纳米基因载体可通过静电吸附的方式结合质粒DNA。用紫外分光光度计检测其吸收光谱,用透射电镜观察其形态特征,激光粒度分析仪测定其粒度分布、表面电位(Zeta电位),1%琼脂糖凝胶电泳检测该基因载体与质粒DNA的结合稳定性,CCK-8实验检测聚乙烯亚胺修饰纳米金基因载体及DNA-纳米金复合物对HEK293细胞的细胞毒性作用,通过荧光显微镜观察聚乙烯亚胺纳米基因载体介导pAcGFP-N1在体外培养的HEK293细胞中的表达,并分析其转染效率。结果聚乙烯亚胺还原氯金酸可以得到带正电荷的纳米颗粒,呈单分散球形分布,其粒径为(12.3±3.3)nm。在pH=7.2时,Zeta电位为+(29.7±5.1)m V。1%琼脂糖凝胶电泳结果表明,当纳米金/质粒DNA≥0.5时,质粒DNA可完全结合到纳米金表面。体外转染实验表明,聚乙烯亚胺修饰纳米金基因载体能介导pAcGFPN1转染HEK293细胞并在细胞中表达绿色荧光蛋白,其转染效率可达25%。结论聚乙烯亚胺修饰纳米金是一种新型非病毒基因载体,具有转染效率高、对细胞毒性小等优势。

ALPPS一期术后未能行二期手术原因的临床分析

目的总结联合肝脏分隔和门静脉结扎二步肝切除术(associating liver partition and portal vein ligation for staged hepatectomy,ALPPS)一期术后未能行二期手术的常见临床原因,进一步探讨影响二期手术进行的危险因素。方法采用横断面研究方法,收集2013年10月至2021年12月期间连续行ALPPS治疗的肝脏肿瘤患者的临床资料。其中男性54例,女性8例,年龄(49.1±10.4)岁。按是否成功行二期手术分为二期手术组和未行二期手术组。收集统计患者未行二期手术的临床原因,分析比较患者肿瘤直径、临床分期、Child-Pugh评分和肝脏分隔方式等基线特征、一期术前术后肝功能(转氨酶、胆红素和白蛋白水平)、术后并发症等临床资料。结果62例患者,有45例患者成功行二期手术,17例患者未行二期手术,其占比为27.4%。未行二期手术患者中开腹ALPPS组2例,射频辅助ALPPS(RALPPS)组11例,腹腔镜ALPPS组4例。在二期手术组和未行二期手术组患者中,肿瘤最大直径、门静脉癌栓形成差异具有统计学意义(P<0.05)。肝功能方面,一期术前白蛋白、总胆红素和一期术后谷草转氨酶、总胆红素两组差异具有统计学意义(P<0.05)。肺部炎症、胸水、腹水为常见一期术后并发症,其中一期术后腹水两组患者差异具有统计学意义(P<0.05),两组患者Ⅲ级及以上并发症发生率差异具有统计学意义(P<0.001)。未行二期手术的患者的临床原因为肝脏未明显增生,未来残肝体积(future liver remnant volume,FLRV)不足,肝脏功能和储备功能差,并发症发生和肿瘤进展。多因素分析显示影响二期手术进行的危险因素为肿瘤最大直径、癌栓形成和一期术后并发症等级。结论对于肿瘤较大、门静脉癌栓形成肝癌患者选择ALPPS手术需慎重。

“营改增”对建筑施工企业的影响

本文通过对营业税以及增值税的基本知识介绍,使广大读者了解该两个不同税种的基本概念之后,进一步对"营改增"税收政策实施后对建筑施工企业的影响进行多角度的分析,并指出在建筑行业普遍管理粗放、税收筹划不科学的前提下如何选择积极有效的措施,为提升该行业在面对"营改增"的历史潮流处于更加积极的地位作出必要的努力与探索。

stTRAIL-MSC靶向促进肝癌大鼠RFA过渡区残癌细胞凋亡的体内研究

目的:探讨stTRAIL-MSC靶向促进肝癌大鼠RFA过渡区残癌细胞凋亡的作用。方法:对150只雄性SD大鼠,采用N1S1肿瘤细胞建立肝荷瘤大鼠模型,并随机将其分为stSTRAL-MSC组、MSC组、Vector-MSC组、培养液组以及空白对照组,每组30只,在接受治疗前1周给以注射相应的制剂,在接受RFA治疗后12 h、24 h、48 h以及1周时每组取6只处死并进行相关检查(空白组除外),同时比较空白组与RFA组其生存时间。结果:stTRAIL-MSC在接受RFA治疗后其肿瘤体积变化、过渡区肿瘤细胞凋亡指数、大鼠肿瘤毁损体积、过渡区肿瘤细胞(ki-67染色)增殖指数等比较明显优于其他几组,而且在对caspase-3、caspase-8、Bcl-2水平检测时发现,stTRAIL-MSC其caspase-、3caspase-8水平明显高于其他四组,而Bcl-2水平低于其他四组,对接受RFA以及空白对照组大鼠的生存情况分析发现,采用RFA治疗的大鼠其生存时间明显高于空白对照组。结论:stTRAIL-MSC靶向通过提高cas-pase蛋白酶级联反应继而达到促进肝癌大鼠RFA过渡区残癌细胞凋亡。

利用错题资源提高初中生学习能力探究

初中生在学习中难免会出现错题,这是学生学习状况的一种反映。有错题不可怕,可怕的是学生反复出错。而在实际生活中,很多家长选择让孩子参加课外辅导班来弥补不足,或通过大量习题来改正不足,这严重违背了国家的“双减”政策。笔者认为,教师应指导学生端正看待错题的态度,把错题当成一种学习资源,再利用这些资源的收集整理、使用拓展来提升初中生的学习能力。

单晶钽裂纹尖端的位错原位观察

本文利用原创双金属片技术,在透射电子显微镜中实现了对小尺寸单晶钽(Ta)拉伸变形的原位实验观察。由于裂纹尖端的塑性区具有与材料整体塑性变形类似的特征,因此本实验针对裂纹尖端处的位错行为进行了研究。实验发现随着裂纹的扩展,有大量呈弯曲或钩状的位错不断形核,并朝着位错弯曲的部分滑移。在进一步的拉伸应力作用下,位错的长直部分不断长大并使这些位错在裂纹尖端堆积。对裂纹尖端的原位高分辨图像观察,发现在单晶钽中有大量伯氏矢量b=1/2〈111〉型位错的形核和逃逸现象。因此,证明这些混合位错对BCC单晶钽的塑性变形有一定贡献,并首次给出了纳米尺度材料中位错堆积的实验证据。

LncRNA RNU12上调热休克蛋白72抑制重组人TRAIL蛋白诱导肝癌细胞凋亡

目的探讨46~50℃时抑制重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)蛋白促肝癌细胞凋亡相关分子机制。方法建立肝癌细胞亚致死性热温度模型,在不同温度(43、46、50℃)条件下分别处理10 min,Annexin-V/PI染色检测重组人TRAIL蛋白对肝癌细胞凋亡率的影响,以常温37℃作为对照组。根据前期肝癌细胞Agilent Human lnc RNA+mRNA Array V4.0芯片表达谱数据,选定50℃时特异性高表达的LncRNA RNU12作为研究对象。构建LncRNA RNU12-sh RNA慢病毒干扰载体,转染MHCC97-H细胞。qRT-PCR及Western blot检测感染前后不同温度组中热休克蛋白72(heat shock protein 72,HSP72)mRNA和蛋白的表达变化。利用流式细胞技术检测LncRNA RNU12慢病毒干扰载体对TRAIL蛋白诱导细胞凋亡的影响。采用荧光原位杂交(FISH)技术检测LncRNA RNU12亚细胞定位情况。结果温度在43℃时促进重组人TRAIL蛋白诱导肝癌细胞凋亡的功能,46~50℃时抑制重组人TRAIL蛋白诱导肝癌细胞凋亡的功能。HSP72 mRNA在4个温度组中的表达均较干扰前明显降低(P<0.01);在蛋白水平,37、46、50℃组较干扰前显著降低(P<0.05)。转染后,46、50℃条件下TRAIL蛋白诱导MHCC97-H细胞凋亡分别上升7.36%、8.84%(P<0.01)。利用RNA-FISH技术确定50℃时LncRNA RNU12主要在MHCC97-H细胞细胞核中表达。结论 LncRNA RNU12在转录水平上调HSP72表达可能是46~50℃时抑制重组人TRAIL蛋白促肝癌细胞凋亡分子机制之一。

肝组织射频消融凝胶体模的体外测试研究

目的:对一种与生物组织热凝固温度相同的仿组织体模进行射频消融(RFA)测试,探讨其可否用于临床RFA实验研究中。方法:仿组织体模主要由猪肝、琼脂和氯化钠构成。通过测定体模密度、导电率和比热等参数,并用RFA体模进行消融测试,比较RFA在体模和新鲜离体牛肝脏中形成的消融灶大小和形状。结果:新制的体模为弹性好、韧性好、硬度好、无毒的固体。体模物理特性比如密度、比热、导电率与人体肝组织接近。RFA后体模的消融灶大小和形状跟离体牛肝RFA接近。结论:自制的仿组织体模可以用于进行RFA生物学效应的实验研究,检测RFA性能。

磁共振成像对原发性肝癌碘油栓塞治疗后的随访价值

目的探讨MRI对评判经碘油栓塞治疗后原发性肝癌(HCC)的疗效。方法选择我院收治的42例HCC患者,共49个病灶。在经碘油栓塞(TACE)治疗后,21例行MRI检查及病理切片观察,观察MRI影像表现及检出准确率。结果 MRI平扫表现为肿瘤组织在T1WI和T2WI上信号多样,有高、等、低信号或多种信号复合。切片观察显示,34个病灶中,18个有不同程度的坏死,7个完全坏死,9个无坏死。共有25个病灶MRI检查显示为坏死,6个检查为残留,检查准确率为91.2%(31/34)。结论 MRI在判断HCC碘油栓塞治疗的预后中,检出率高,能有效反映病灶特征,值得推广。

季冻区公路路基水热场阴阳坡差异与防冻胀模拟

在国道G109那曲至拉萨的季节性冻土路段设置监测断面,对季节性冻土区路基的地温、含水率和冻胀位移进行连续监测,依据实时监测数据,利用所建立的冻土路基水-热耦合模型,分析季节性冻土区公路路基水-热场的季节变化特征以及阴阳坡差异,并结合水-热场计算结果分析路基的冻胀性以及多种措施下防冻胀效果,并以路基监测期内含冰量的标准差表征路基损伤程度。研究结果表明:季节性冻土区公路路基的温度场与水分场具有明显季节变化特征,在路基路面以下8 m深度范围内,地温受外界环境变化影响较大;由于阴阳坡效应,温度场、水分场、冻胀量场与损伤场的横向分布不对称,相较于阳坡,阴坡冻胀量更大,严重损伤区域更多;路基冻胀量在2月份达到最大,2月底正常天气下路基阴坡肩和阳坡肩冻胀量分别为31.5 mm和26.0 mm左右,而极寒天气下,路基冻胀量明显增大;在保温板措施下,路基损伤区域明显减小,并集中于保温板外表面与路面之间;综合使用保温板、水泥稳定砂和碎石隔水层的措施下,路基阴阳坡肩冻胀峰值分别减少25.4%与30.7%,有效降低了路基冻害。

3D打印技术在临床教学中的应用和效果

目的以肝脏和肝癌模型为例,探讨3D打印结合PBL在肝胆外科住院医师规范化培训带教中的应用价值。方法选取2018年1月-2019年1月间在肝胆外科进行住院医师规范化培训的56名医师,以数表法随机将其分为观察组和对照组,每组28名。对照组采用传统PBL教学模式进行教学,观察组应用3D技术打印肝脏和肝癌整体模型以及相关的胆道、血管模型等,联合PBL教学模式进行带教,统计分析两组住院医师规范化培训医师出科理论考核成绩、CT/MRI图像阅读能力及对教学满意度等指标。结果观察组出科理论考核成绩明显高于对照组,其差异有统计学意义(t=4.165,P<0.01);观察组CT/MRI图像阅读成绩高于对照组,其差异有统计学意义(t=2.922;P<0.01);观察组学生对教学满意度明显高于对照组,其差异有统计学意义(χ^2=4.909,P=0.027)。结论3D打印结合PBL对肝胆外科住院医师规范化培训医师临床带教是一种有效的教学方式。

淤泥层中污水池等小型地下构筑物基坑支护设计与施工

在淤泥层中施工污水池、给水泵房等小型地下构筑物,因淤泥及这类小型构筑物自身的特点,基坑支护设计与施工有其独特之处,文中根据笔者多年的实践经验,介绍一种较实用的基坑支护方法,并对其设计与施工进行了探讨。

超声协同微球型Bi2O2CO3降解罗丹明B的研究

Bi2O2CO3是一种Bi类半导体催化剂,文章研究了它的超声催化性能。首先,采用水热法制备了微球型的Bi2O2CO3,利用X射线衍射(X-ray Diffraction,XRD)、扫描电子显微镜(Scanning Electron Microscope,SEM)、紫外-可见漫反射光谱对样品的晶体结构、微观形貌、光学特性进行了表征。然后,以罗丹明B(RhB)作为模型污染物,通过研究超声催化降解罗丹明B来评测Bi2O2CO3的超声催化性能。研究了催化剂的浓度(Ccatalytic)、初始罗丹明B染料的浓度(CRhB)和超声功率(P)等实验因素对超声催化降解效率的影响。得出在Ccatalytic=3g·L^-1,CRhB=10mg·L^-1和P=400W条件下降解罗丹明B的效率最高,其最高降解效率可以达到91.7%。

煤矿机械液压技术的应用分析及研究

首先对液压技术进行概括性介绍,随后对煤矿机械液压技术应用中的常见问题进行分析,在此基础上提出解决煤矿机械液压技术应用问题的有效措施。

巨大多囊肝合并多囊肾1例报告

肝、肾囊肿是肝肾常见的良性疾病,且大多数都是肝肾囊肿并发,称多囊病。但巨大多囊肝合并多囊肾较少见,现将我院收治的一例报道如下。