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人鼻咽上皮细胞株HNE-1染色体高分辨显带的研究 被引量:7
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作者 邓龙文 姚开泰 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1993年第4期271-273,共3页
作者首次采用高分辨染色体G显带技术,对本室建立的人鼻咽癌上皮细胞株“湖南一号”(HNE-1)进行了细胞遗传学研究。HNE-1细胞株在第15代时,染色体数目变异在68—78之间,众数为74。所检细胞均含有结构异常的染色体。出现频率比较高的标记... 作者首次采用高分辨染色体G显带技术,对本室建立的人鼻咽癌上皮细胞株“湖南一号”(HNE-1)进行了细胞遗传学研究。HNE-1细胞株在第15代时,染色体数目变异在68—78之间,众数为74。所检细胞均含有结构异常的染色体。出现频率比较高的标记染色体15条,其中某些标记染色体只有在高分辨染色体上才清楚地显示出结构重排。此外还发现少数细胞内存在双微体和核内复制。与其它鼻咽癌上皮细胞株比较,发现7号染色体部分缺失del(7)(q32)在CNE、HNE-1及鼻咽癌活检组织中同时存在,这一标记染色体可能与鼻咽癌的发生有重要联系。 展开更多
关键词 上皮细胞株 染色体 鼻咽肿瘤
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精细定位和克隆9p21-22区域内鼻咽癌候选抑瘤基因 被引量:34
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作者 阳剑波 宾亮华 +7 位作者 李忠花 张小慧 钱骏 张必成 周鸣 谢奕 邓龙文 李桂源 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第1期6-9,共4页
目的:进一步精细限定鼻咽癌9p21-22区域等位基因杂合性丢失的频率和范围,筛选和克隆其共同缺失区内鼻咽癌相关的候选抑瘤基因。方法:应用11个定位于 9p21-22区域的高密度微卫星位点,检测 25例低分化鼻咽癌患者的... 目的:进一步精细限定鼻咽癌9p21-22区域等位基因杂合性丢失的频率和范围,筛选和克隆其共同缺失区内鼻咽癌相关的候选抑瘤基因。方法:应用11个定位于 9p21-22区域的高密度微卫星位点,检测 25例低分化鼻咽癌患者的杂合性丢失,确定其共同缺失区;用RT-PCR和Northern筛出在鼻咽癌细胞株HNE1和鼻咽癌活检组织中表达下调的、定位于共同缺失区内的 3’末端ESTs(Express Sequence Tags);采用 RACE技术和生物信息学资源克隆出候选EST的全长cDNA。结果: 25例患者中有17例(68%)存在一个或多个位点的杂合性丢失,其中D9s161(35.0%,7/20),D9S1678(31.5%,6/19),D9S263(3.3%,6/18)和D9S1853(33.3%,7/21)四个紧邻位点的丢失频率相对较高,并发现六位患者在该四个位点表现为连续性缺失;筛选D9S161-D9S1853区域内25个代表新基因的3’末端ESTs序列,发现一个EST(dbEST:208825)在鼻咽癌细胞株HNE1及73%(11/15)的活检组织中表达降低, Multiple Tissue Nort 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 染色体 9p21-22 杂合性丢失 克隆
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一个定位在7q32染色体区域的鼻咽癌负相关EST 被引量:3
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作者 江宁 邓龙文 +6 位作者 谭国林 湛凤凰 周鸣 曹莉 邱元正 谢奕 李桂源 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1999年第4期301-308,共8页
为了分离和克隆定位于7q32染色体区域的与鼻咽癌发病有关的抑瘤基因,检测了鼻咽癌活检组织及配对外周血标本中7q32微卫星DNA多态性位点的基因型,发现在7q32区域存在30%左右的杂合性丢失。从Internet中查询到定位于7q32区域的所有EST... 为了分离和克隆定位于7q32染色体区域的与鼻咽癌发病有关的抑瘤基因,检测了鼻咽癌活检组织及配对外周血标本中7q32微卫星DNA多态性位点的基因型,发现在7q32区域存在30%左右的杂合性丢失。从Internet中查询到定位于7q32区域的所有EST,对其中20个EST进行分析。RT-PCR和Northern杂交发现AA070437EST在鼻咽癌细胞株HNE1中表达微弱,而在正常鼻咽上皮原代培养细胞中表达强烈。差异RTMCR结果显示,鼻咽癌活检组织中有30.7%存在该EST表达下调或不表达。差异PCR和Southern杂交结果显示鼻咽癌活检组织DNA中存在该EST的29.1%等位基因丢失情况。与GeneBank等数据库比较表明该EST所代表的基因是一个新基因。结果表明AA070437EST在鼻咽癌发病中有明显负相关,是一个定位于7q32的鼻咽癌抑瘤基因候选者。 展开更多
关键词 鼻咽癌 杂合性丢失 EST 基因表达
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应用代表性差异分析法筛选人癌候选抑癌基因 被引量:2
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作者 湛凤凰 江宁 +5 位作者 曹利 邓龙文 周鸣 谢奕 曾朝阳 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第2期165-169,共5页
运用cDNA代表性差异分析法(cDNArepresentationaldiferenceanalysis,cDNARDA),以正常人鼻咽上皮细胞及鼻咽癌HNE1细胞作为比较的样品来源,分离了四个在鼻咽癌中缺失的cDN... 运用cDNA代表性差异分析法(cDNArepresentationaldiferenceanalysis,cDNARDA),以正常人鼻咽上皮细胞及鼻咽癌HNE1细胞作为比较的样品来源,分离了四个在鼻咽癌中缺失的cDNA片段.以此四个片段作探针,分别进行DNA杂交、RNA杂交,结果显示,这些差异性的cDNA序列确实来自正常人鼻咽上皮且只在其中表达和/或在鼻咽癌HNE1中表达降低,并在鼻咽癌病人中存在不同程度的缺失.序列分析结果表明这些差异性表达的基因为具有相当抑癌基因功能的已知基因和可能与鼻咽癌相关的抑癌基因的新基因.从而说明cDNARDA是一种高效、敏感。 展开更多
关键词 鼻咽癌 抑癌基因 cDNA代表性差异分析法
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鼻咽癌染色体7q31.3-36微卫星位点缺失图谱分析 被引量:2
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作者 谭国林 肖健云 +4 位作者 田勇泉 邓龙文 江宁 湛风凰 李桂源 《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》 CAS 1998年第3期165-171,共7页
目的:细胞遗传学研究发现,鼻咽癌染色体7q32-qter常有缺失。为进一步证实鼻咽癌在这个染色体区域的遗传变化。方法:选择位于7q313~36的13个微卫星标记对24例鼻咽癌进行等位基因缺失分析。结果:79%(19... 目的:细胞遗传学研究发现,鼻咽癌染色体7q32-qter常有缺失。为进一步证实鼻咽癌在这个染色体区域的遗传变化。方法:选择位于7q313~36的13个微卫星标记对24例鼻咽癌进行等位基因缺失分析。结果:79%(19/24)的鼻咽癌至少在一个位点存在等位基因丢失,高频缺失位点是D7S495(46%),D7S500(45%),D7S631(30%)和D7S514(35%)。依据缺失图谱分析,一个较小的共同缺失区域可能存在于7q32的D7S495和D7S500之间,其遗传距离约为96cM。且这个小区域的缺失与鼻咽癌的临床分期无显著相关性(P>005)。结论:这些结果提示,鼻咽癌在7q32的D7S495与D7S500之间可能存在与鼻咽癌相关的抑瘤基因。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 微卫星多态性 7号染色体 杂合性丢失
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复方益肝灵联合葡醛内酯在预防抗结核药物性肝损伤中的应用效果
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作者 邓龙文 刘升凡 +1 位作者 杨小五 杨晶 《中国民康医学》 2021年第15期86-88,共3页
目的:观察复方益肝灵联合葡醛内酯在预防抗结核药物性肝损伤中的应用效果。方法:回顾性分析2019年6月至2020年11月该院收治的129例肺结核患者的临床资料,根据预防肝损伤方案不同分为A组、B组和C组,各43例。三组均给予2HRZE/4HR抗结核治... 目的:观察复方益肝灵联合葡醛内酯在预防抗结核药物性肝损伤中的应用效果。方法:回顾性分析2019年6月至2020年11月该院收治的129例肺结核患者的临床资料,根据预防肝损伤方案不同分为A组、B组和C组,各43例。三组均给予2HRZE/4HR抗结核治疗方案,A组不给予任何药物预防肝损伤,B组给予葡醛内酯预防肝损伤,C组在B组基础上联合复方益肝灵预防肝损伤,比较三组治疗前后肝功能指标[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和总胆红素(TBIL)]水平、肝损伤发生率和不良反应发生率。结果:治疗后,三组ALT、AST和TBIL水平均高于治疗前,但C组低于A组和B组,B组低于A组,差异均有统计学意义(P<0.05);C组肝损伤发生率低于A组和B组,B组低于A组,差异均有统计学意义(P<0.05);三组不良反应发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:复方益肝灵联合葡醛内酯预防抗结核药物性肝损伤的效果优于单用葡醛内酯,且安全性良好。 展开更多
关键词 复方益肝灵 葡醛内酯 肺结核 预防 抗结核药物性肝损伤
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Detailed Deletion Mapping of Chromosome 9p21-22 in Nasopharyngeal Carcinoma
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作者 阳剑波 张晓梅 +6 位作者 邓龙文 谭国林 周鸣 曾朝阳 曹莉 沈守荣 李桂源 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 2000年第3期8-11,共4页
Objective: To further refine the extent of deletion on chromosome 9p21-22 in nasopharyngeal carcinoma (NPC) and provide evidence for discovering new tumor suppressor gene. Methods: Loss of heterozygosity (LOH) on chro... Objective: To further refine the extent of deletion on chromosome 9p21-22 in nasopharyngeal carcinoma (NPC) and provide evidence for discovering new tumor suppressor gene. Methods: Loss of heterozygosity (LOH) on chromosome 9p21-22 was analyzed in 25 paired blood and tumor samples by using 11 high-density microsatellite polymorphic markers. Results: 17 of 25 cases (68.0%) showed LOH at one or more loci. Higher frequencies of LOH were found at four loci: D9S161 (35.0%), D9S1678 (31.5%), D9S263 (33.3%) and D9S1853 (33.3%), where 6 cases had a contiguous stretch of allelic loss. Conclusion: The minimal common region of deletion might be defined between D9S161 and D9S1853 (estimated about 2.7 cM in extent) at 9p21.1, suggesting that inactivation of one or more tumor suppressor genes located in this region may be an important step in NPC. 展开更多
关键词 Nasopharyngeal carcinoma Chromosome 9p21-22 Loss of heterozygosity Tumor suppressor gene
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鼻咽癌染色体3p21-26的等位基因杂合性丢失研究 被引量:7
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作者 邓龙文 江宁 +5 位作者 谭国林 周鸣 湛凤凰 谢奕 曹莉 李桂源 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期248-250,共3页
目的细胞遗传学研究表明,3号染色体缺失是鼻咽癌常见的染色体异常之一。分子生物学研究表明,染色体3p在鼻咽癌中出现高频率的等位基因杂合性丢失(LOH)。本研究将进一步确定鼻咽癌3p等位基因杂合性丢失的频率及范围。方法应... 目的细胞遗传学研究表明,3号染色体缺失是鼻咽癌常见的染色体异常之一。分子生物学研究表明,染色体3p在鼻咽癌中出现高频率的等位基因杂合性丢失(LOH)。本研究将进一步确定鼻咽癌3p等位基因杂合性丢失的频率及范围。方法应用位于3p2126区域16个微卫星多态性位点,对24例低分化鼻咽癌患者进行了LOH分析。结果24例患者中有16例存在杂合性丢失(66.7%)。丢失频率最高的两个位点是D3S1560(50%,11/21)和D3S1620(50%,9/18)。在具有丢失的16例患者中,8例显示为1个连续的多个相邻位点的杂合性丢失区域,5例患者存在2个或2个以上的杂合性丢失区。病例1,3,4,7,8,10,16,17,18,19和22在D3S1597和D3S1297之间,表现为一个不同大小的杂合性丢失区。结论最小共同丢失区位于D3S1560D3S1620(3p25.326.2)之间,提示该区域有一个尚未克隆的、与晚期鼻咽癌明显相关的抑癌基因。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 染色体3P 等位基因 杂合性丢失
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人鼻咽癌上皮细胞株HNE-2细胞遗传学研究 被引量:5
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作者 邓龙文 祝和成 +1 位作者 李桂源 姚开泰 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第1期21-22,共2页
对一株低分化鼻咽癌上皮细胞株HNE-2进行了细胞遗传学研究,这是第6株迄今已报道的鼻咽癌上皮细胞株染色体G显带核型资料。发现7号染色体长臂部分缺失不仅在所有5株鼻咽癌上皮细胞株中均存在,而且在鼻咽癌活检组织中也检测到。其缺失的... 对一株低分化鼻咽癌上皮细胞株HNE-2进行了细胞遗传学研究,这是第6株迄今已报道的鼻咽癌上皮细胞株染色体G显带核型资料。发现7号染色体长臂部分缺失不仅在所有5株鼻咽癌上皮细胞株中均存在,而且在鼻咽癌活检组织中也检测到。其缺失的共同区域为7q32→qter。另一标记染色体3q^+亦经常在鼻咽癌上皮细胞株及活检组织中检测到,但其断裂点及增加的染色体部分表现出很大的异质性。 展开更多
关键词 肿瘤 上皮细胞株 染色体
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cDNA代表性差异分析法分离鼻咽癌上皮细胞株HNE_1表达差异cDNA序列的初步研究 被引量:26
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作者 湛凤凰 江宁 +5 位作者 曹利 邓龙文 谭国林 周鸣 谢奕 李桂源 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期341-344,共4页
目的寻找鼻咽癌中差异性表达基因,包括与鼻咽癌发病相关的候选抑瘤基因。方法应用cDNA代表性差异分析法(RDA),分离原代培养的正常人鼻咽上皮细胞与鼻咽癌细胞株HNE1中差异表达的cDNA序列,Southern杂交和N... 目的寻找鼻咽癌中差异性表达基因,包括与鼻咽癌发病相关的候选抑瘤基因。方法应用cDNA代表性差异分析法(RDA),分离原代培养的正常人鼻咽上皮细胞与鼻咽癌细胞株HNE1中差异表达的cDNA序列,Southern杂交和Northern杂交被用来分析差异性表达产物的来源,最后,将这些序列克隆到pGEM-Teasy载体中,并用链终止法测序。结果在第4轮杂交及扩增反应后,获得4条差异性条带。Southern杂交及Northern杂交证明,这些差异性片段来自作为“检测”扩增子的正常人鼻咽上皮,在鼻咽癌细胞株HNE1中不表达或表达降低。序列分析这些差异性片段的克隆,发现一些序列是与已知基因高度同源的基因,包括一些看家基因;另有一些基因则为新基因序列。结论鼻咽癌的发生是一个多基因参与的过程,所获得的差异性片段中,与之同源的一些已知基因具有抑瘤功能。 展开更多
关键词 鼻咽癌 抑瘤基因 CDNA 差异分析法
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构建7q32区域鼻咽癌和正常鼻咽上皮细胞部分基因的表达图谱 被引量:12
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作者 江宁 湛凤凰 +4 位作者 谢奕 曾朝阳 周鸣 邓龙文 李桂源 《中华医学遗传学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 1998年第5期267-270,共4页
目的构建7q32区域鼻咽癌细胞和组织及原代培养人正常鼻咽上皮细胞的部分基因表达图谱。方法通过差异RT-PCR和Northern杂交的方法检测定位于7q32区域的20个EST在鼻咽癌细胞和鼻咽癌组织及原代培养人正常鼻咽... 目的构建7q32区域鼻咽癌细胞和组织及原代培养人正常鼻咽上皮细胞的部分基因表达图谱。方法通过差异RT-PCR和Northern杂交的方法检测定位于7q32区域的20个EST在鼻咽癌细胞和鼻咽癌组织及原代培养人正常鼻咽上皮细胞mRNA的表达水平。结果8个EST在鼻咽癌细胞HNE1和原代培养人正常鼻咽上皮细胞中表达量较一致,7个EST在两种细胞中均无表达,3个EST(W72688、H19830、AA130630)在鼻咽癌细胞株中表达上调,而2个EST(AA070437、H90882)在原代培养人鼻咽上皮细胞中表达上调。在13例鼻咽癌活检组织中30.7%(4/13)的AA070437表达下调,77%(10/13)的W72688和77%(10/13)的H19830表达上升。结论构建了7q32区域鼻咽癌细胞和组织及原代培养人正常鼻咽上皮细胞部分基因表达图谱,并初步认为A070437的表达下调和W72688、H19830的过表达与鼻咽癌的发生有关。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 7q32区 基因表达图谱 表达序列位标
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鼻咽癌染色体9p21~22区域精细缺失图谱的构建 被引量:14
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作者 阳剑波 唐湘娜 +5 位作者 邓龙文 谭国林 周鸣 曾朝阳 曹莉 李桂源 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期419-421,共3页
目的 进一步精细限定鼻咽癌9p21 ~22 区域等位基因杂合性丢失的频率和范围,为发现和分离克隆该区域内的鼻咽癌抑瘤基因提供新线索和依据。方法 应用11 个定位于9p21 ~22 区域的高密度微卫星位点,检测25 例低分化鼻咽癌患者的杂合性... 目的 进一步精细限定鼻咽癌9p21 ~22 区域等位基因杂合性丢失的频率和范围,为发现和分离克隆该区域内的鼻咽癌抑瘤基因提供新线索和依据。方法 应用11 个定位于9p21 ~22 区域的高密度微卫星位点,检测25 例低分化鼻咽癌患者的杂合性丢失。结果 25 例患者中,有17 例存在一个或多个位点的杂合性丢失,占68-0 % 。其中D9S161(35 .0 % ) 、D9S1678(31 .6 % ) 、D9S263(33 .3 % ) 和D9S1853(33 .3 % )4 个紧邻位点的丢失频率相对较高,并发现有6 例患者在这些位点表现为连续性缺失。结论 鼻咽癌染色体9p21 ~22 区域D9S161 ~D9S1853 位点之间(2 .7 cM) 是鼻咽癌患者的一个较小共同缺失区,该区域内的抑瘤基因失活可能是鼻咽癌发生发展过程中的重要事件。 展开更多
关键词 鼻咽癌 染色体9p21-22 杂合性丢失
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一个定位于染色体3p25.3的新基因及在鼻咽癌中的表达分析 被引量:8
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作者 谢奕 邓龙文 +5 位作者 江宁 湛凤凰 曹莉 邱元正 唐湘娜 李桂源 《中华医学遗传学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第4期225-228,共4页
目的 分离位于染色体 3p2 4- 2 6区域中鼻咽癌相关的新基因。方法 在染色体 3p2 4- 2 6鼻咽癌杂合性丢失 (loss of heterozygosity,L OH)高频区 ,用 RT- PCR及 Northern杂交 ,检测了 2 0个表达序列标记 (expressed sequence tag,EST)... 目的 分离位于染色体 3p2 4- 2 6区域中鼻咽癌相关的新基因。方法 在染色体 3p2 4- 2 6鼻咽癌杂合性丢失 (loss of heterozygosity,L OH)高频区 ,用 RT- PCR及 Northern杂交 ,检测了 2 0个表达序列标记 (expressed sequence tag,EST)在鼻咽癌细胞株 HNE1和原代培养的正常鼻咽上皮细胞中的表达水平 ,并对其中一个在鼻咽癌细胞株 HNE1中表达下调的 EST,在 7个正常鼻咽活检组织和 19例鼻咽癌活检组织中的表达进行了检测。用 c DNA文库筛选方法获得其全长 c DNA序列 ,对该序列进行了初步分析。结果 获得了一个位于染色体 3p2 5 .3的新基因 ,命名为 NAG- 7基因 (Gen Bank收录编号 :AF0 86 70 9)。该基因在 2 6 .3% (5 / 19)的鼻咽癌活检组织中表达下调 ,全长 16 6 7bp,其开放阅读框 (open reading frame,ORF)编码一个含 94个氨基酸的碱性蛋白质 ,相对分子质量为 110 2 3870 ,预测为一跨膜蛋白质。它含有一个蛋白激酶 C磷酸化位点和肉豆蔻基位点。迄今为止 ,NAG- 7基因序列在基因库中未见任何同源性基因。结论 NAG- 7基因是一个在鼻咽癌中表达下调的新基因 ,它的改变可能参与了鼻咽癌的发生发展。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 染色体3P 基因克隆 基因表达
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鼻咽癌染色体7q32区域微缺失的研究 被引量:6
14
作者 唐湘娜 阳剑波 +7 位作者 邓龙文 江宁 周鸣 曾朝阳 谢奕 谭国林 邱元正 李桂源 《中华医学遗传学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第3期153-156,共4页
目的 进一步明确鼻咽癌染色体 7q32的 D7S5 0 0 - D7S495附近区域高频率等位基因缺失的范围。方法 采用更高密度的微卫星标记位点 ,分析 30个鼻咽癌病例等位基因杂合性缺失的情况。结果30例患者中有 19例 (6 3.3% )存在杂合性缺失 ;D7... 目的 进一步明确鼻咽癌染色体 7q32的 D7S5 0 0 - D7S495附近区域高频率等位基因缺失的范围。方法 采用更高密度的微卫星标记位点 ,分析 30个鼻咽癌病例等位基因杂合性缺失的情况。结果30例患者中有 19例 (6 3.3% )存在杂合性缺失 ;D7S5 0 0 - D7S5 0 9- D7S495是高频率缺失集中的区域 ,共同缺失区在 D7S5 0 9附近。结论  D7S5 0 展开更多
关键词 鼻咽癌 染色体7q32 等位基因缺失 抑癌基因
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A cDNA located on chromosome 7q32 shows loss of expression in epithelial cell line of nasopharyngeal carcinoma 被引量:2
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作者 江宁 湛凤凰 +5 位作者 邓龙文 周鸣 曹莉 邱元正 谢奕 李桂源 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2000年第7期74-77,共4页
To isolate and clone the tumor suppressor gene on chromosomal region 7q32 correlated with the carcinogenesis of human nasopharyngeal carcinoma (NPC) Methods The genotypes of polymorphic microsatellite markers on 7q3... To isolate and clone the tumor suppressor gene on chromosomal region 7q32 correlated with the carcinogenesis of human nasopharyngeal carcinoma (NPC) Methods The genotypes of polymorphic microsatellite markers on 7q32 in DNA from 24 biopsies of nasopharyngeal carcinoma and matched normal blood cells were identified The expression levels of 20 expressed sequence tags (ESTs) on 7q32 between human nasopharyngeal carcinoma epithelial 1 (HNE 1) and primary cultures of normal nasopharyngeal epithelial (PNNE) cells were compared using differential RT PCR and Northern hybridization The quantity of AA070437 DNA and mRNA was detected by differential PCR and differential RT PCR, respectively Results Loss of heterozygosity (LOH) was found in 25%-46% of NPC biopsies AA070437 EST expression was down regulated in HNE 1 cell compared to PNNE cells The down regulation of AA070437 was found in 30 7% of NPC biopsies and allelic loss of AA070437 was observed in 29 1% of NPC biopsies Conclusion Our results show that AA070437 EST is negatively related with the occurrence of human NPC and may represent a candidate tumor suppressor gene of NPC on 7q32 展开更多
关键词 nasopharyngeal carcinoma EST CLONE loss of heterozygosity tumor supressor gene
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cDNA representational difference analysis of differentially expressed cDNA sequences in human nasopharyngeal carcinoma
16
作者 湛凤凰 曹利 +5 位作者 宾亮华 江宁 邓龙文 谢奕 谭国林 李桂源 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 1999年第6期58-62,共5页
Objective To search differentially expressed sequences correlated with pathogenesis of human nasopharyngeal carcinoma (NPC), including the candidates of tumor suppressor genes Methods Representational difference a... Objective To search differentially expressed sequences correlated with pathogenesis of human nasopharyngeal carcinoma (NPC), including the candidates of tumor suppressor genes Methods Representational difference analysis (RDA) was performed to isolate differentially expressed sequences between cDNA from normal human primary cultures of nasopharyngeal epithelial cells and cDNA from NPC cell line HNE1 The source of differentially expressed products were proved by Southern blot, Northern blot and in situ hybridization The fragments were cloned with pGEM T easy kit and sequenced by the chain termination reaction Results Four differentially expressed cDNA fragments were isolated in the fourth subtractive hybridization using cDNA from normal human nasopharyngeal epithelial cells as tester amplicon and cDNA from NPC cell line HNE1 as driver amplicon by cDNA RDA These differential cDNA fragments revealed that they really came from the tester amplicon and were not expressed or down regulated in the NPC HNE1 cells Some of the genes were expressed only in human nasopharyngeal epithelial cells but deleted or down regulated in the biopsies of NPC Of these obtained clones, some were the sequences of the human known genes including house keeping genes, the others represented novel gene sequences Conclusion The differentially expressed products including the candidates of tumor suppressor genes may be associated with the initiation of the NPC 展开更多
关键词 nasopharyngeal carcinoma · cDNA representational difference analysis · tumor suppressor gene CLONING
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