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基于TurboID的植物蛋白邻近标记实验方法
被引量:
3
1
作者
邝嘉怡
李洪清
+1 位作者
沈文锦
高彩吉
《植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第5期584-593,共10页
邻近标记作为近些年发展起来的一项检测活细胞内蛋白互作关系和亚细胞结构蛋白组的新型技术,已成功应用于多种动植物体系的研究。该技术通过给诱饵蛋白融合一个具有特定催化连接活性的酶,在酶的催化作用下将小分子底物(如生物素)共价连...
邻近标记作为近些年发展起来的一项检测活细胞内蛋白互作关系和亚细胞结构蛋白组的新型技术,已成功应用于多种动植物体系的研究。该技术通过给诱饵蛋白融合一个具有特定催化连接活性的酶,在酶的催化作用下将小分子底物(如生物素)共价连接到酶邻近的内源蛋白,通过富集和分析被标记的蛋白可获得与诱饵互作的蛋白组。经定向进化产生的生物素连接酶TurboID具有无蛋白毒性及催化效率高的优势。利用TurboID介导的邻近标记技术分析感兴趣蛋白的邻近蛋白组,可研究细胞内瞬时发生或微弱的蛋白互作网络,进而解析复杂的生物学过程。该文详细描述了在拟南芥(Arabidopsisthaliana)中基于TurboID的邻近标记实验方法及注意事项,旨在为利用这一新技术研究植物蛋白互作关系提供参考。
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关键词
TurboID
邻近标记
生物素
蛋白互作
原文传递
划小承包释放新活力 中山电信探索“社会化承包”新模式
被引量:
2
2
作者
叶咏菊
邝嘉怡
黄洁颖
《通信企业管理》
2015年第12期40-41,共2页
中国电信广东公司中山分公司(以下简称"中山电信")全省首创"社会化承包"项目划小承包,在新兴业务领域积极探索划小承包的市场化道路。2015年共有4个号百业务和1个信息化业务实施社会化承包模式,企业经营能力和管理水平得到提升。
关键词
承包模式
中国电信
社会化
中山
企业经营能力
业务领域
市场化道路
信息化
原文传递
三种单子叶植物叶组织中GWSF诱导转录特性
被引量:
1
3
作者
董永清
陈广欣
+2 位作者
伍思韵
邝嘉怡
黄真池
《分子植物育种》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第13期4257-4262,共6页
理想病原诱导型启动子的应用在植物抗病基因工程中非常重要。本研究以高粱、玉米和小麦为材料,检测人工病原诱导型启动子GWSF在单子叶植物叶组织中的诱导转录特性,寻找理想病原诱导型启动子。用GWSF替代pBI121中调控gus基因的CaMV35S启...
理想病原诱导型启动子的应用在植物抗病基因工程中非常重要。本研究以高粱、玉米和小麦为材料,检测人工病原诱导型启动子GWSF在单子叶植物叶组织中的诱导转录特性,寻找理想病原诱导型启动子。用GWSF替代pBI121中调控gus基因的CaMV35S启动子构建重组质粒,导入农杆菌(Agrobacterium tumefaciens) GV3101;通过农杆菌渗入法转化高粱、玉米和小麦12 h后,用水杨酸,青枯菌,疫霉菌孢子诱导处理12 h,本底表达用无菌水处理12 h;最后用GUS染色法和实时荧光定量PCR (real-time quantitative PCR, qPCR)检测GWSF的转录特性。GUS染色结果显示:GWSF在三种植物中都具有本底低、受水杨酸,青枯菌,疫霉菌孢子诱导的特性。设CaMV35S的转录活性为1,qPCR结果为:GWSF在高粱中本底水平为0.67,受水杨酸,青枯菌,疫霉菌孢子诱导时,转录活性明显升高,分别为:2.53、0.87、7.33;玉米中本底水平为0.11,受水杨酸,青枯菌,疫霉菌孢子诱导时,转录活性分别为:1.92、0.19、2.06;小麦中本底水平为0.13,受水杨酸,青枯菌,疫霉菌孢子诱导时,转录活性分别为:0.69、0.45、1.16。结果表明,GWSF在三种单子叶植物叶组织中具有本底低、诱导因子广、诱导活性高的特性,是较理想的人工病原诱导型启动子,可应用于单子叶植物转基因抗病育种。
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关键词
单子叶植物
GWSF
水杨酸
青枯菌
疫霉菌
原文传递
题名
基于TurboID的植物蛋白邻近标记实验方法
被引量:
3
1
作者
邝嘉怡
李洪清
沈文锦
高彩吉
机构
华南师范大学生命科学学院
出处
《植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第5期584-593,共10页
基金
国家自然科学基金(No.31870171,No.31701246)。
文摘
邻近标记作为近些年发展起来的一项检测活细胞内蛋白互作关系和亚细胞结构蛋白组的新型技术,已成功应用于多种动植物体系的研究。该技术通过给诱饵蛋白融合一个具有特定催化连接活性的酶,在酶的催化作用下将小分子底物(如生物素)共价连接到酶邻近的内源蛋白,通过富集和分析被标记的蛋白可获得与诱饵互作的蛋白组。经定向进化产生的生物素连接酶TurboID具有无蛋白毒性及催化效率高的优势。利用TurboID介导的邻近标记技术分析感兴趣蛋白的邻近蛋白组,可研究细胞内瞬时发生或微弱的蛋白互作网络,进而解析复杂的生物学过程。该文详细描述了在拟南芥(Arabidopsisthaliana)中基于TurboID的邻近标记实验方法及注意事项,旨在为利用这一新技术研究植物蛋白互作关系提供参考。
关键词
TurboID
邻近标记
生物素
蛋白互作
Keywords
TurboID
proximity labeling
biotin
protein interactions
分类号
Q94-33 [生物学—植物学]
原文传递
题名
划小承包释放新活力 中山电信探索“社会化承包”新模式
被引量:
2
2
作者
叶咏菊
邝嘉怡
黄洁颖
机构
中国电信广东公司
出处
《通信企业管理》
2015年第12期40-41,共2页
文摘
中国电信广东公司中山分公司(以下简称"中山电信")全省首创"社会化承包"项目划小承包,在新兴业务领域积极探索划小承包的市场化道路。2015年共有4个号百业务和1个信息化业务实施社会化承包模式,企业经营能力和管理水平得到提升。
关键词
承包模式
中国电信
社会化
中山
企业经营能力
业务领域
市场化道路
信息化
分类号
F284 [经济管理—国民经济]
原文传递
题名
三种单子叶植物叶组织中GWSF诱导转录特性
被引量:
1
3
作者
董永清
陈广欣
伍思韵
邝嘉怡
黄真池
机构
岭南师范学院生命科学与技术学院
岭南师范学院
出处
《分子植物育种》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第13期4257-4262,共6页
基金
国家自然科学基金(31570660)
广东省自然科学基金(2015A030313560
+1 种基金
2016A030313668)
大学生创新创业项目共同资助
文摘
理想病原诱导型启动子的应用在植物抗病基因工程中非常重要。本研究以高粱、玉米和小麦为材料,检测人工病原诱导型启动子GWSF在单子叶植物叶组织中的诱导转录特性,寻找理想病原诱导型启动子。用GWSF替代pBI121中调控gus基因的CaMV35S启动子构建重组质粒,导入农杆菌(Agrobacterium tumefaciens) GV3101;通过农杆菌渗入法转化高粱、玉米和小麦12 h后,用水杨酸,青枯菌,疫霉菌孢子诱导处理12 h,本底表达用无菌水处理12 h;最后用GUS染色法和实时荧光定量PCR (real-time quantitative PCR, qPCR)检测GWSF的转录特性。GUS染色结果显示:GWSF在三种植物中都具有本底低、受水杨酸,青枯菌,疫霉菌孢子诱导的特性。设CaMV35S的转录活性为1,qPCR结果为:GWSF在高粱中本底水平为0.67,受水杨酸,青枯菌,疫霉菌孢子诱导时,转录活性明显升高,分别为:2.53、0.87、7.33;玉米中本底水平为0.11,受水杨酸,青枯菌,疫霉菌孢子诱导时,转录活性分别为:1.92、0.19、2.06;小麦中本底水平为0.13,受水杨酸,青枯菌,疫霉菌孢子诱导时,转录活性分别为:0.69、0.45、1.16。结果表明,GWSF在三种单子叶植物叶组织中具有本底低、诱导因子广、诱导活性高的特性,是较理想的人工病原诱导型启动子,可应用于单子叶植物转基因抗病育种。
关键词
单子叶植物
GWSF
水杨酸
青枯菌
疫霉菌
Keywords
Monocotyledons
GWSF
Salicylic acid
Ralstonia solanacearum
Phytophthora
分类号
S332.2 [农业科学—作物遗传育种]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于TurboID的植物蛋白邻近标记实验方法
邝嘉怡
李洪清
沈文锦
高彩吉
《植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
3
原文传递
2
划小承包释放新活力 中山电信探索“社会化承包”新模式
叶咏菊
邝嘉怡
黄洁颖
《通信企业管理》
2015
2
原文传递
3
三种单子叶植物叶组织中GWSF诱导转录特性
董永清
陈广欣
伍思韵
邝嘉怡
黄真池
《分子植物育种》
CAS
CSCD
北大核心
2019
1
原文传递
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