西红花酸对百草枯中毒大鼠的肝保护效应

目的：探讨西红花酸对百草枯（PQ）中毒大鼠急性肝损伤的保护机制。方法按随机数字表法将54只雄性Wistar大鼠分为对照组、染毒组和治疗组，每组再分为染毒后0.5、2、6d亚组（n＝6）。采用腹腔注射20%PQ20mg/kg制备PQ中毒急性肝衰竭模型；对照组注射等量生理盐水。治疗组0.5d后腹腔注射西红花酸50mg/kg，每日1次，直至处死动物；另两组注射等量生理盐水。各组制模后于相应时间点处死大鼠，收集下腔静脉血和肝组织。苏木素-伊红（HE）染色后光镜下观察6d肝组织病理学改变；采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）水平；采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、核转录因子-κB（NF-κB）的mRNA表达；采用底物显色法检测6d肝组织凋亡相关因子天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶（caspase-8、-9、-12）活性。结果染毒组肝组织炎性细胞广泛浸润，弥漫性碎片状坏死，肝细胞再生不明显，且随时间延长而加重；治疗组肝小叶结构尚存，可见点状坏死、少量充血和炎性细胞浸润。染毒组和治疗组0.5、2、6d血清IL-6、TNF-α水平和肝组织iNOS、NF-κB的mRNA表达，以及6dcaspase-8、-9、-12活性均较对照组显著升高；而治疗组各指标则较染毒组显著降低〔IL-6（ng/L）：0.5d为188.37±64.21比376.61±82.42，2d为287.18±58.69比432.77±96.28，6d为234.24±10.17比375.41±37.59；TNF-α（ng/L）：0.5d为472.36±76.43比688.33±102.19，2d为189.32±87.54比296.21±89.77，6d为99.28±16.13比168.41±66.78；iNOSmRNA（灰度值）：0.5d为2.998±0.801比3.453±0.026，2d为3.126±0.306比5.259±0.153，6d为0.841±0.135比1.225±0.057；NF-κBmRNA（灰度值）：0.5d为1.569±0.818比2.361±0.063，2d为2.345±0.489比4.668±0.368，6d为2.348±0.316比3.972±0.449；caspase-8（pmol/mg）：6d 为126.77±9.97比199.18±66.48；caspase-9（pmol/mg）：6d 为213.12±69.06比321.62±89.39；caspase-12（pmol/mg）：6d为183.46±70.52比219.68±53.93，均P＜0.05〕。结论西红花酸对PQ中毒大鼠具有肝保护效应，其作用可能是通过降低血中炎性因子水平，抑制肝组织caspase-8、-9、-12活性及iNOS、NF-κB基因表达来实现的。