高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法测定液态乳中糠氨酸

国内外常使用糠氨酸含量作为牛奶受热程度的指标用于评价牛奶品质,但在实际检测时,由于牛奶基质复杂可能造成液态乳液中糠氨酸定量不准,因此,本研究基于高效液相色谱⁃高分辨四极杆飞行时间质谱法建立了高效准确的液态乳中糠氨酸的检测方法。取2.00 mL牛奶样品,加入5 mL 12 mol/L盐酸溶液和1 mL水后在110℃条件下水解12 h,水解完成后涡旋混匀过滤,滤液经6.00 g/L的乙酸铵溶液稀释6倍后进样分析,以0.20%甲酸水溶液和乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱,AQ⁃C_(18)色谱柱(150 mm×3.5 mm,5μm)进行分离,在高分辨四极杆飞行时间质谱仪的电喷雾电离正离子模式下采集数据。为确保牛乳中糠氨酸定量的准确性,考察了糠氨酸溶液中盐酸浓度(0.30、1.25、3.00 mol/L)对质谱响应的影响,结果显示,盐酸浓度过高会抑制质谱响应信号。糠氨酸在0.05~2.00 mg/L范围内线性关系良好,相关系数(r)为0.994,方法检出限为0.50 mg/100 g,满足实际样品检测需求。在1.52、3.03、15.17 mg/100 g 3个添加水平下对糠氨酸进行加标回收试验,平均回收率为79.9%~119.7%,相对标准偏差(RSD,n=6)为1.4%~2.6%。应用该方法对某市售巴氏杀菌乳101批次303个样品进行检测,样品中糠氨酸含量在5.1~11.9 mg/100 g之间。该方法高效快速,回收率高,灵敏度好,分析准确,可进行大批量的样品测定,为持续推动奶业全产业链高质量发展提供技术支持。

量子点抗体偶联技术研究进展

量子点是一种半导体纳米晶体,其具有激发光谱宽、发射光谱窄,光稳定性好,良好的生物相容性等各种优越的性能,目前广泛应用于生物标记、生物传感和生物成像的研究中。量子点生物学应用中最为关键的一步,是如何将抗体等生物大分子有效的偶联于量子点表面并保持其生物活性。近年来,尽管对量子点的制备方法和生物学应用进行了较为深入的研究,但量子点和生物分子之间偶联技术的综述还少见报道。本文从非共价偶联技术和共价偶联技术两个方面对各种量子点抗体偶联技术的特性进行分析,也对未来量子点生物学应用中将会遇到的挑战和发展趋势进行展望。

2020年北京市售食用菌中重金属含量及健康风险分析

目的检测2020年北京市售食用菌中重金属含量并进行健康风险评测。方法采用随机采样的方法,选取北京市售常见新鲜食用菌,采用电感耦合等离子体质谱法对食用菌中重金属砷、镉、铅、汞含量进行检测;采用靶标危害系数法(targethazardquotient,THQ)评估人体每日通过食用菌摄入重金属所带来的健康风险。结果共采集食用菌样品5类42份,重金属砷、镉、铅、汞含量均未超过国家标准限量要求,其中香菇中各种重金属的含量相对较高,各种重金属在不同种类食用菌中含量差异变化较大;儿童、成人摄入食用菌中重金属的THQ值和总THQ值依次递减。不同年龄人群膳食摄入食用菌中砷、镉、铅、汞的THQ值均<1。结论本次采集的2020年北京市售食用菌中砷、镉、铅、汞的含量均未超标,通过膳食途径摄入食用菌中重金属的健康风险较低。

金属检测中新型前处理技术研究进展及应用

精准检测环境和食品中金属含量对环境保护和人体健康至关重要.样品的准备环节是造成样品损失和二次污染的关键步骤,因此合适的前处理方法可以提高金属分析的选择性和灵敏度.从液相萃取和非液相萃取新技术两方面综述了浊点萃取、离子液体、超分子溶剂-分散液液微萃取、顶空固相微萃取技术、超临界流体萃取特点及在复杂样品前处理中的应用和研究进展,并对其未来发展方向进行了展望.

固相萃取材料在金属离子前处理应用中的研究进展

为避免摄入过量重金属、危害人类健康,应提高对金属离子的检测能力。常用的金属检测技术如电感耦合等离子体质谱、电热原子吸收光谱、火焰原子吸收光谱等可以有效识别痕量重金属,并且具有多组分分析能力以及检出限低、产量高等优点。但复杂样品本身浓度较低且基质干扰大,因此检测前需进行前处理以消除基质干扰,满足低浓度和小体积样品的检测需求。固相萃取是富集样品中金属离子常用的方法之一,开发能够进行高效、快速富集分离的固相萃取新材料及前处理技术是金属离子检测的关键。限制接触碳纳米管、纳米吸附剂、纳米粒子载体、磁性纳米粒子等纳米材料可提供大的比表面积和可调的官能团,以促进金属离子吸收,其优越的光学性能则可用于荧光和比色检测;高分子聚合物具有卓越的机械性能和化学稳定性,可用于微量金属粒子的前富集、分离和检测;离子印迹聚合物对目标离子具有选择性识别能力的空间结构,可以吸附待分离体系中的金属离子;双功能材料可同时进行多种金属离子的萃取和快速定量检测,新型的光敏络合物则可以将结合态的金属离子转变为游离态,使其被多种生物传感器快速检测,也可以研究生物体内金属离子的信号传递过程。该文综述了纳米材料、聚合物、功能材料等新型固相萃取材料的特点及在复杂样品前处理中的应用和研究进展,并对其未来发展方向进行了展望。

ELISA法检测牛奶中头孢氨苄残留

应用头孢氨苄单克隆抗体,建立牛奶中头孢氨苄残留的间接竞争酶联免疫吸附测定(ELISA)检测方法,其牛奶中检测线性范围为1.0～50.0ng/mL,检测限为1.0ng/mL,半数抑制质量浓度为4.1ng/mL,牛奶的加标回收率分别为96.0%、98.2%及93.3%。头孢氨苄抗体与头孢拉定、头孢羟氨苄、头孢克洛及头孢克肟的交叉反应率分别为160.0%、80.0%、28.4%和3.7%。此外,一种简单、有效的牛奶纯化方法得以建立。对比ELISA和超高效液相色谱-串联质谱实验结果,显示两种方法有很好的数据相关性(R2=0.9988)。

核酸适配体在靶向药物传递中的研究进展

抗癌药物的毒副作用限制了其临床应用,纳米药物载体可实现药物在病灶部位的聚集而不影响正常组织,从而降低药物毒副作用.在药物载体表面修饰靶向配体,以提高药物载体主动靶向进入到细胞的能力,可有效地将药物释放到靶细胞,大大提高药效.核酸适配体(aptamer)作为一种新型的靶向分子,近几年已被运用到靶向药物传递的研究中.本文介绍了几种适配体靶向载药体系,如适配体-药物、适配体-脂质体、适配体-聚合物胶束、适配体-聚合物纳米颗粒、适配体-金属颗粒以及适配体-支化聚合物等载药体系,并对当前研究的热点以及存在的问题和不足进行了评述.

食品安全突发事件应急机制的比较研究

"十三五"期间我国食品安全领域要加大科技创新支持,提升食品安全突发事件应对能力,围绕应急管理等领域提高食品安全监管效能。而科学、完备、全链条联动的食品安全突发事件应急机制,是提升应急监管能力、构建高效应急体系的基础。本文研究了美国、欧盟与我国的食品安全应急机制特点,具体分析了美国召回机制、严惩机制、食品管理体系的研究应用,欧盟预警机制、应急预案机制、风险评估的研究应用的突出特点;对比了美国、欧盟和我国食品安全应急监管机构的设置和运行机制特点;从发展历史、应急法制、应急预案编制、监测与预警体系等方面分析了我国食品安全应急体系的现状。最终得出现阶段对我国食品安全应急机制建设的几点建议:进一步提高风险评估能力,注重应急预案的细化和整合,构建应急机制的智慧联动,建立突发事件长效评价机制。

醋蒜加工过程中有机酸和矿质元素的变化规律研究

目的研究醋蒜加工过程中有机酸和矿质元素的变化觃律。方法冷冻干燥样品,分别使用气相色谱-串联质谱法(gaschromatograph-tandemmassspectrometry,GC-MS/MS)和电感耦合等离子体质谱法(inductively coupled plasma mass spectrometry, ICP-MS)测定醋蒜加工过程中的9种有机酸和12种金属元素,幵对数值迚行统计分析。结果加工过程中,辛酸、L-酪氨酸的降幅最大,而乳酸和L-亮氨酸则增幅明显,且增幅均在12 d左右达到最大; Na、Mg、K 3种常量元素的含量均较高。其中, K的含量最为丰富,含量变化范围为2518.5～3636.0 mg/kg; Na、Ca元素在泡制过程中呈增长趋势,在12 d左右达到稳定水平;而Mg、Mn、Cu的含量在泡制过程中较为稳定,增长幅度均小于初始值的1.5倍。结论醋蒜加工过程中有机酸和矿质元素会发生变化,其中大部分有机酸的含量降低,而矿质元素主要呈增长趋势,泡制12d是品质控制关键点。

乙酰胆碱对培养脑细胞影响的原子力显微镜观察

在原代培养的大鼠海马神经元上研究乙酰胆碱（ACh）对脑细胞超微结构及其存活率的影响。实验将不同浓度ACh直接作用于海马神经元，用原子力显微镜（AFM）从纳米尺度观察细胞超微结构的变化，并用四甲基偶氮唑盐（MTT）微量酶反应比色法测定MTT代谢率，进一步验证AFM结果。实验显示：①一定浓度的ACh作用后，神经元发育迟缓，突起分支少，胞膜表面粗糙，出现“孔洞”样改变，这种改变具有较好的时一效关系及量一效关系。②一定浓度的ACh也可使神经胶质细胞膜表面出现明显的“孔洞”样及“虫蚀”样改变，并具一定的剂量依赖性。

基于人工模拟抗体的酶联检测技术在食品安全检测中的应用

广义人工模拟抗体包括适配体、重组受体、分子印迹聚合物及多肽。人工模拟抗体与传统抗体相比优势显著,其具有易实现工业化生产、成本低、保存方便、可反复使用等特点。酶联检测技术是人工模拟抗体在食品安全检测中应用最为广泛的技术。本文综述了人工模拟抗体的特点以及基于人工模拟抗体的酶联检测技术在食品安全检测中的应用。

食品快检应用的国内外现状

当前,食品快检一般是指可以实现现场检测并且在30分钟内出具检验结果的方法。能够在十几分钟甚至几分钟内出具检验结果的,则为比较理想的快检手段。现有的快检手段实际上分为两类:一类是基于化学比色、免疫分析、酶抑制法等原理研发生产的试剂盒以及小型读数读卡设备等。

超高效液相色谱-串联质谱法测定聚氯乙烯食品接触材料中3种柠檬酸酯增塑剂

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法测定聚氯乙烯食品接触材料中3种柠檬酸酯类增塑剂的方法。方法采用正己烷/二氯甲烷(1∶1,V/V)提取,经硅胶固相萃取柱净化,乙腈/乙酸乙酯(1∶4,V/V)洗脱,进入UPLCMS/MS分析,以乙腈和超纯水做流动相,经BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm)分离,采用ESI源在MRM正离子模式下检测,外标法定量。结果3种化合物在线性范围内决定系数R2>0.996,方法检出限0.1~0.6μg/kg,定量限0.3~2.2μg/kg,回收率为70.3%~103.1%,相对标准偏差为0.9%~9.8%。结论该方法分析快速、灵敏、准确,适用于塑料材料中柠檬酸酯类增塑剂含量的检测,为新型增塑剂的添加使用监管提供方法。

2018—2020年北京市售蟹类镉含量调查及评价

目的抽测2018—2020年北京市售蟹类中镉含量并进行评价,为蟹类的质量安全性评价提供基础数据。方法采用随机采样的方法,采集北京市售常见蟹类,采用原子吸收光谱法对蟹中的镉含量进行检测;采用靶标危害系数法(THQ)评估人体每日通过蟹类摄入重金属所带来的健康风险。结果 2018—2020年共采集蟹类样品83份,重金属镉含量平均值为0.647 mg/kg。从蟹类的生长环境来看,淡水蟹重金属镉含量范围为0.043~0.620 mg/kg,平均值为0.183 mg/kg;海水蟹重金属镉含量范围为0.033~3.200 mg/kg,平均值为1.070 mg/kg;3年间蟹类中镉超标率差异具有统计学意义(P<0.05)。儿童、成人摄入蟹类中重金属的THQ值和总THQ值依次递减。不同年龄人群膳食摄入蟹类中镉的THQ值均<1。结论通过连续3年的系统性调查,本次采集的2018—2020年北京市售蟹类中存在一定的镉残留,其中海水蟹中镉含量超标现象较多,需加强监测;由于蟹类的食用具有季节性,普通人群摄入量较少,膳食风险相对较低。

胶体金试纸条法快速筛查小麦和玉米中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的研究

以抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)单克隆抗体为基础,建立了胶体金免疫层析试纸条检测方法,用于小麦和玉米中DON的快速检测。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,标记抗DON单抗并喷于玻璃纤维垫上,DON-BSA和驴抗鼠二抗均匀划于NC膜上检测线和质控线位置,依次将样本垫、结合垫、NC膜和吸水纸组装切割成试纸条并装入检测卡中。测试结果表明:该胶体金试纸条对纯标准品和人工污染样品的检测灵敏度分别为100μg/kg和500μg/kg,与除15-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇外的21种生物毒素均无交叉反应,重复性和稳定性均良好,对实际样品的检测结果与液相色谱串联三重四级杆质谱(LC-MS/MS)比对结果相符。该检测方法非常适合用于现场的快速筛查,具有良好的应用前景。

神经突触发育的影响因素及研究方法

神经突触发育过程中有许多因素起着重要作用。这些因素的作用机制如何,怎样才能更准确快捷的对其进行定性定量分析,一直是神经生物科学研究的重要问题。本综述从分子水平阐述神经突触发育过程中的重要影响因素和作用机制,及与之相关的研究方法。

乙酰胆碱对神经细胞膜结构影响

目的探讨乙酰胆碱(ACh)对神经细胞超微结构和存活率的影响。方法不同浓度 ACh作用于原代培养大鼠海马神经元,原子力显微镜观察细胞超微结构的变化,四甲基偶氮唑盐 (MTT)微量酶反应比色法测定MTT代谢率。结果正常海马神经元表面光滑,ACh作用后神经元发育迟缓,胞膜表面粗糙,出现隆起和孔洞样结构,直径为100 nm-1μm,深度为100～400 nm,损伤程度有时间依赖性和剂量依赖性;ACh可使MTT代谢率明显降低(P<0．05),具有剂量依赖性。结论一定浓度的ACh可损伤神经细胞膜,进一步降低细胞存活率。

X射线荧光光谱结合基本参数法快速测定食品中砷、镉、铅元素含量

目的建立一种基于X射线荧光光谱仪(XRF)结合快速基本参数法快速测定不同食品样品中砷、铅、镉元素的分析方法。方法样品粉碎过筛后,压片制备,用XRF结合基本参数法进行定量分析和快速筛查分析。结果 XRF方法的As、Cd、Pb检出限分别为:0.07、0.06、0.07 mg/kg。在国标GB 2762—2017规定的食品限量浓度水平,As、Cd、Pb的XRF检测结果和电感耦合等离子体质谱法检测结果相比相对相差值均小于25%。针对谷物、豆类、肉制品、水产品样品的XRF快速检测,除个别食品类别外,As、Cd和Pb元素的假阳性率和假阴性率均小于5%。结论该方法具有操作简单、检测快速、灵敏度高等特点,适用于食品中砷、镉和铅的现场、快速筛查分析。

国内外大蒜农药残留限量对比分析

目的掌握国内外大蒜中农药最大残留限量(MRLs)标准现状,以便降低大蒜出口贸易风险,并在此基础上对完善我国大蒜农残限量标准提出建议。方法收集我国与欧盟、国际食品法典委员会(CAC)、日本和韩国等5个组织或国家的大蒜农药MRLs标准并进行对比分析。结果我国大蒜农药MRLs标准有129项,欧盟、日本、韩国和CAC分别有510、252、173和23项。欧盟、日本、韩国和CAC标准中与我国相同的农药种类数量分别有93、67、56和18项,其中限量值低于中国标准的分别占49、19、22和4项。结论由于各国膳食结构不同及登记使用的农药情况不同,我国与欧盟、CAC、日本和韩国大蒜MRLs标准指标总数及指标要求差异明显,建议结合我国大蒜生产实际及膳食需求,完善我国相关标准。

原代成人皮肤真皮成纤维细胞系的构建

目的:对人皮肤成纤维细胞进行分离、纯化、培养及细胞鉴定,探讨优化的分离及纯化方法,为构建表皮-真皮皮肤模型提供种子细胞。方法:使用两步消化法提取人真皮层,酶消化法提取成纤维细胞后培养数代,对细胞进行形态学观察,HE染色,免疫细胞化学鉴定细胞标志物Vimentin,MTT法测定细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果:利用倒置显微镜及HE染色,可见细胞为散在分布的壁细胞,细胞汇流时呈鱼群样或漩涡状排列,细胞在30代内形态保持不变;细胞增殖曲线大体呈S型,流式细胞仪测得细胞凋亡率分别为(8.15±0.618)%和(7.83±0.415)%。结论:优化提取真皮成纤维细胞的方法,构建2株不同年龄的真皮成纤维细胞系,为药妆研究以及重组皮肤模型的研究奠定了基础。