近交系五指山小型猪骨髓间充质干细胞体外分泌肝细胞生长因子延缓慢性肾脏病纤维化进展

目的:分离培养近交系五指山小型猪骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs),并建立其慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)模型,体外研究同物种BM-MSCs对CKD肾纤维化的修复作用及其可能机制。方法:采用密度梯度法分离培养BM-MSCs,并从细胞形态、表面抗原、分化能力等方面鉴定;采用左侧输尿管部分梗阻(left partial ureteral obstruction,LPUUO)方法制作CKD模型,并通过B超、单光子发射计算机断层成像术(single-photon emission computed tomography,SPECT)、病理染色等评估;体外实验分为肾组织与BM-MSCs共培养、肾组织单独培养、BM-MSCs单独培养3组,体外培养7 d,每天收集3组上清液,酶联免疫吸附法测定肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)累积分泌量。肾组织行HE染色,Masson染色。结果:分离培养的BM-MSCs表达抗原CD29,CD90而不表达CD45,成骨诱导茜素红染色阳性,成软骨诱导阿利新蓝染色阳性。LPUUO术后12周,B超示左肾皮质变薄、肾盂积液;SPECT示左肾充盈延迟、梗阻性肾功能受损。上清液HGF累积含量示BM-MSCs+CKD肾组织共同培养组第1,5,6,7天HGF累积分泌量明显高于CKD肾组织单独培养组(P<0.05)。HE染色显示BM-MSCs+CKD肾组织共同培养组和CKD肾组织单独培养组中肾均出现不同程度的病变,并随时间延长加重,但CKD肾组织单独培养组病变更严重;Masson染色显示BM-MSCs+CKD肾组织共同培养组术后第5,6,7天肾组织被染成蓝色的胶原纤维的累计光密度值明显低于CKD肾组织单独培养组(P<0.05)。结论:近交系五指山小型猪BM-MSCs体外分泌HGF,抑制或延缓CKD纤维化进展。

近交系五指山小型猪骨髓间充质干细胞分离培养及生物特性

目的:建立近交系五指山小型猪(inbreed line miniature pig of Wuzhishan,ILMW)骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BM-MSCs)体外分离培养和鉴定方法,比较我国不同种系猪来源BM-MSCs的生物学特性,为下一步研究BM-MSC对ILMW单侧输尿管梗阻所致肾损伤的修复机制提供细胞来源。方法:选取4月龄及10月龄健康ILMW各4头,从距髂骨翼边缘1 cm处穿刺,抽出骨髓约5 m L;经密度梯度法分离单个核细胞,分别用含10%,12%和15%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的完全培养基于体外培养;并取第1代、第3代、第5代、第11代细胞分别行细胞形态学、表型、分化能力、生长曲线、细胞周期等检测。结果:分离培养的BM-MSCs在体外贴壁,呈成纤维样或旋涡状生长;原代细胞18 h出现贴壁,第6天进入对数增长期,约9 d后80%融合,传代后细胞状态未出现明显异常。细胞表面抗原检测显示CD29,CD44,CD90表达呈阳性;CD34和CD45表达呈阴性;且各代间差异无统计学意义(均P>0.05)。成骨诱导18 d后,茜素红染色阳性;成软骨诱导21 d后,阿利新蓝染色阳性。细胞周期检测显示G0/G1的细胞百分比约为81.45%。结论:ILMW的BM-MSCs贴壁时间早,细胞增殖活跃,传代周期短,传代后仍能保持稳定的生物学特性,是中国大陆地区猪来源BM-MSC的最佳选择之一。

单侧输尿管梗阻模型引起肾损伤的新认知及进展

单侧输尿管梗阻(UUO)是研究急性肾损伤(AKI)和慢性肾脏病(CKD)的一种常见实验模型,该模型不能评估肾脏功能的整体变化,但对降低病死率和监测对侧肾功能变化起作用。本文就各类型肾损伤中发生间质性炎、细胞坏死及纤维化等病理过程的分子机制通过UUO模型进行阐明,主要阐述了引起肾损伤的一些关键性因子,并提出了一些新的干预性的治疗靶向;此外,还介绍了间充质干细胞(MSCs)对肾损伤的修复作用。

单侧输尿管梗阻引起输尿管损伤的新认知及进展

单侧输尿管梗阻（unilateral ureter obstruction,UUO）是尿路梗阻性病变的一种主要类型,梗阻的长期存在会进一步加重输尿管损伤。梗阻和损伤的相互作用常可引发输尿管狭窄、纤维化,进而加重尿路梗阻、引起尿液输送异常、最终导致肾脏功能受损。

MSCs治疗慢性肾脏病的新认知及进展

慢性肾脏病已逐渐成为影响公众健康的社会问题,尽管在支持疗法上有所进展,但患病率和死亡率仍不断升高。以间充质干细胞(MSCs)为基础的治疗对炎性组织及损伤组织有效,且无明显副作用及并发症,可能成为治疗慢性肾脏病的新选择。MSCs能"归巢"到损伤肾组织,通过旁分泌或自分泌一些细胞因子、生长因子、趋化因子等起到保护肾功能作用。本文总结了MSCs发挥肾脏保护功能的6个不同机制,重点介绍了MSCs发挥抗肾纤维化作用的机制,并阐述了影响MSCs向损伤肾组织"归巢"的因素及不同来源干细胞对损伤肾组织治疗间的差异。目前的临床研究主要涉及MSCs对肾移植后的治疗,而与慢性肾脏病相关的研究甚少;后期需要更多关于MSCs治疗慢性肾脏病有效性的研究,以确保后期临床应用的安全。

过表达LINC00595降低前列腺癌细胞PC3对多西他赛的耐药性

目的探讨LINC00595对前列腺癌细胞PC3对多西他赛(DTX)耐药性的影响。方法以DTX为诱导药物构建人前列腺癌耐药细胞株PC3-DTX,计算IC50值;RT-qPCR检测LINC00595及酪氨酸激酶受体(Trk)B在PC3细胞系和PC3-DTX耐药细胞系中的表达水平;MTS实验、流式细胞和克隆形成实验分别分析过表达LINC00595对PC3-DTX细胞增殖、周期和凋亡及细胞生长的影响。结果PC3-DTX细胞组对DTX IC50值显著高于正常培养PC3细胞组(P<0.001)。PC3-DTX细胞中LINC00595相对表达水平显著低于PC3细胞(P<0.01),而PC3-DTX细胞中TrkB mRNA相对表达水平显著高于PC3细胞。与ov-NC组相比,过表达LINC00595显著抑制PC3-DTX细胞增殖和克隆形成,促进细胞周期从S期向G2期转化、细胞凋亡,降低PC3-DTX细胞中TrkB mRNA相对表达。结论过表达LINC00595降低前列腺癌细胞PC3对DTX的耐药性。

原发性前列腺尿路上皮癌一例报告

患者,男,66岁。因排尿困难2年,加重3个月,诊断前列腺腺癌1个月于2018年2月21日入院。1个月前在当地医院就诊,直肠指检(DRE)提示前列腺增大,质硬,边界清,可触及结节,有压痛;血清tPSA、fPSA及f/tPSA比值均在正常低值范围(具体数值不详);前列腺穿刺活检病理诊断为前列腺腺癌,Gleason评分3+3分,免疫组化染色检查示PSA(-)、p504s(-)、P63(-)、CK5/6(+)。为进一步诊治来我院。

阴茎勃起功能障碍的治疗进展

勃起功能障碍（erectile dysfunction,ED）是指阴茎持续不能达到和（或）维持足够的勃起以获得满意的性生活[1]。据统计,目前全球约20%的成年男性患有ED,并且呈逐年上升趋势;此外,2型糖尿病、心血管疾病、血脂异常、