结直肠癌细胞源性外泌体中miR-17-5p的表达对结直肠癌细胞化疗敏感性的影响及其机制

目的:分析结直肠癌细胞源性外泌体(Exo)中微小RNA-17-5p (miR-17-5p)表达对结直肠癌细胞化疗敏感性的影响,阐明其可能的作用机制。方法:实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测人结直肠癌HCT116细胞、CT26细胞、LoVo细胞、HT29细胞、SW620细胞、SW480细胞和人正常结肠直肠黏膜上皮HIEC细胞中miR-17-5p表达水平。CT26细胞分为对照组、miR-NC inhibitor组和miR-17-5p inhibitor组,提取各组细胞Exo,透射电子显微镜观察Exo形态表现,纳米粒子跟踪分析法检测粒径分布情况,Western blotting法检测Exo中标志蛋白CD9、CD63、凋亡诱导因子6互作蛋白(Alix)和肿瘤易感基因101 (TSG101)蛋白表达水平,RT-qPCR法检测Exo中miR-17-5p表达水平。CT26细胞分为对照组、Exo组、Exo-miR-NC inhibitor组和Exo-miR-17-5p inhibitor组,分别以不同转染组CT26细胞源性Exo处理CT26细胞,Exo绿色荧光标记PKH67染料示踪法观察各组CT26细胞摄取Exo情况,MTT法检测1.25、 2.50、 5.00、 10.00、 20.00和40.00mg·L^(-1)5-氟尿嘧啶(5-Fu)处理后各组CT26细胞增殖抑制率,流式细胞术检测各组CT26细胞凋亡率,细胞免疫荧光染色检测各组CT26细胞中微管相关蛋白轻链3B (LC3B)荧光强度,Western blotting法检测各组CT26细胞中微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3-Ⅱ)、微管相关蛋白轻链3Ⅰ(LC3-Ⅰ)、自噬效应蛋白Beclin-1和P62蛋白表达水平,并计算LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值。结果:人结直肠癌HCT116、 CT26、 LoVo、HT29、SW620和SW480细胞中miR-17-5p表达水平明显高于HIEC细胞(P<0.05);分离到的颗粒物呈典型球形囊泡,粒径峰值约140 nm,且CD9、CD63、Alix和TSG101蛋白均明显表达,表明成功分离到Exo。与对照组比较,miR-17-5p inhibitor组Exo中miR-17-5p表达水平明显降低(P<0.05)。与对照组比较,Exo组、Exo-miR-NC inhibitor组和Exo-miR-17-5p inhibitor组CT26细胞周围均可见明显的PKH67染色,显示CT26细胞可摄取Exo。与对照组比较,经1.25、 2.50、 5.00、10.00、20.00和40.00 mg·L^(-1)5-Fu处理后Exo组CT26细胞增殖抑制率明显降低(P<0.05),各组CT26细胞凋亡率明显降低(P<0.05),细胞中LC3B荧光强度明显增强(P<0.05),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值和Beclin-1蛋白表达水平明显升高(P<0.05),P62蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与Exo组比较,经1.25、 2.50、 5.00、 10.00、 20.00和40.00mg·L^(-1)5-Fu处理后Exo-miR-17-5pinhibitor组CT26细胞增殖抑制率和细胞凋亡率明显升高(P<0.05),细胞中LC3B荧光强度减弱(P<0.05),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值和Beclin-1蛋白表达水平明显降低(P<0.05),P62蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论:抑制结直肠癌细胞源性Exo中miR-17-5p的表达可提高结直肠癌细胞的化疗敏感性,其作用机制可能与抑制细胞自噬水平有关。

美克尔憩室癌变及肝多发转移并消化道出血1例

美克尔憩室为成人最常见的消化道畸形,而该憩室合并癌变则极为罕见。北京大学国际医院胃肠外科近期收治1例消化道出血患者,经诊治证实为美克尔憩室癌变,现报告如下。1病例资料患者,女性,57岁,2015年11月23日主因＂间断腹部不适4年余,加重20天,

颈白线切开联合带状肌分离入路在甲状腺切除手术中的应用

目的探讨颈白线切开联合带状肌分离入路在甲状腺切除手术中的应用。方法回顾性选取2017年3月至2018年3月北京大学国际医院胃肠外科实施单侧甲状腺切除的患者162例,依手术入路将所有患者分为3组,其中颈白线切开联合带状肌分离入路者为观察组,共40例;颈白线切开合并胸骨甲状肌离断者为对照组A,共32例;单纯颈白线切开者为对照组B,共90例。比较3组术后颈前疼痛程度、术中喉上神经外支显露情况、术后简化嗓音障碍指数量表(VHI-10)评分和术中甲状旁腺误切率。结果对照组A术后颈前明显疼痛发生率明显高于对照组B和观察组[53. 1%(17/32)比18. 9%(17/90)、17. 5%(7/40)](均P <0. 05)。对照组A喉上神经外支显露率明显低于对照组B和观察组[62. 5%(20/32)比83. 3%(75/90)、82. 5%(33/40)](均P <0. 05)。3组术后VHI-10评分和术中甲状旁腺误切率比较,差异均无统计学意义(均P> 0. 05)。结论颈白线切开联合带状肌分离入路较传统方法在显露甲状腺上极方面具有优势,便于喉上神经外支的显露,并可降低术后颈前区疼痛不适的发生率。

腹腔镜在胃间质瘤手术治疗中应用价值研究

目的探讨腹腔镜手术治疗胃间质瘤的适应证及安全性。方法回顾性分析北京大学肿瘤医院2007年7月至2014年9月腹腔镜下胃间质瘤切除手术58例(腹腔镜组)和开腹胃间质瘤切除手术99例(开腹组),比较两组间手术相关临床资料。结果腹腔镜组在手术时间及住院时间等方面与开腹组差异无统计学意义(118 min vs.110 min,P=0.272;8.5d vs.8.9 d,P=0.684),但出血量明显减少(37 m L vs.66 m L,P<0.05),切口长度显著缩小(5.1 cm vs.15.7 cm,P<0.05)。肿瘤大小方面,腹腔镜组瘤体均值明显小于开腹组(3.9 cm vs.5.5 cm,P<0.05)。两组术后均未发生出血、瘘等严重并发症。腹腔镜组和开腹组的中位随访时间分别为29个月和36个月,腹腔镜组未出现复发转移,开腹组中有2例高危病人出现复发。结论对于较小肿瘤,腹腔镜手术治疗胃间质瘤与开腹手术同样安全、可行且微创。

甲状腺/甲状旁腺术中神经电生理监测在喉返神经识别、医源性损伤及修复中的作用

目的 探讨甲状腺/甲状旁腺术中神经电生理监测在预防、识别医源性喉返神经损伤(RLNI)及修复中的作用并评价其价值.方法 回顾总结北京大学国际医院2015年1月至2017年12月351例甲状腺/甲状旁腺手术中使用术中神经监测(IONM)技术的经验,记录喉返神经解剖变异、术中各类损伤情况、术中修复喉返神经及术后处理、RLNI患者预后等资料,评价IONM在甲状腺/甲状旁腺手术中对于喉返神经保护及损伤修复的价值.结果 全组患者共于IONM下显露RLN460条;发现喉返神经变异6条(3例为非返性喉返神经,均位于右侧;3例为喉返神经喉外分支,其中1例为双侧);全组共发生暂时性RLNI 4例,均为单侧损伤,暂时性RLN损伤率为1.1%,均于术后3个月内恢复;术中RLN横断2例,其中1例行喉返神经端端吻合术后6个月恢复嗓音,永久性RLN损伤率为0.5%.IONM信号正常者,术后无一例出现声音嘶哑;术中IONM信号丢失而肉眼观察RLN外观正常者,术后声带麻痹发生率为57.14%.术中使用IONM并不增加手术操作时间.结论 甲状腺/甲状旁腺IONM对于喉返神经的识别、术中RLNI的修复以及术后嗓音状况的预测均具有良好的指导意义,提高了手术安全性.

分子检测在分化型甲状腺癌诊断、预后判断及手术决策中的应用

最近几十年在全世界范围的内分泌恶性肿瘤中甲状腺癌发病率的上升速度是最快的。在甲状腺癌的病理类型中，甲状腺乳头状癌（papillary thyroid cancer，PTC）和甲状腺滤泡状癌（follicular thyroid cancer，FTC）均为分化型甲状腺癌（differentiated thyroid cancer，DTC），