液相色谱-动态串联质谱技术同时检测人尿中120种刺激剂和利尿剂等禁用物质

目的：采用液相色谱-动态串联质谱技术,建立和验证同时检测人尿样中120种刺激剂、利尿剂和其它禁用物质的方法。方法：尿样经同等体积的5%醋酸铅水溶液沉淀蛋白质后,上清液用动态多反应监测模式（d MRM）进行检测,并比较了传统MRM与动态MRM在检测灵敏度上的差异。结果：所筛查禁用物质的检测限均介于0.05~20 ng/ml之间,达到世界反兴奋剂机构对禁用物质检测能力的要求。在低、中和高三个浓度级别的日内和日间精密度均小于20%,准确度和基质效应在80%~120%之间。结论：该方法具有灵敏度高、准确可靠和重现性好等特点。动态MRM模式只扫描某个禁用物质保留时间附近区域,驻留时间大大增加,其检测灵敏度远高于传统MRM模式,更适合于多种禁用物质的同时检测。

醋炙鳖甲总氨基酸提取工艺优选

目的:优选醋炙鳖甲总氨基酸提取工艺。方法:以浸膏得率和总氨基酸含量为指标,对提取方法和提取溶剂进行优选,采用正交试验法考察该方法下提取鳖甲的溶剂用量、提取时间和提取次数,优化工艺条件。结果:以蒸馏水为溶剂进行回流法提取时,最佳提取工艺为10倍水煎煮2 h,提取3次。结论:以蒸馏水为溶剂进行回流提取时,浸膏得率和总氨基酸含量均较高,该方法设计合理、简便易行。

口服兴奋剂福美司坦对人尿中类固醇浓度的影响

目的:检测服用福美司坦(4-Hydroxyandrost-4-ene-3,17-dione,formestane)后人尿中内源性类固醇的浓度。方法:征集2名男性受试者。每位受试者分别口服100 mg福美司坦,并于服药后7天内收集14份尿样。测定尿样中内源性甾体激素的浓度。结果:服药后,尿样中福美司坦浓度迅速上升,并于2.5小时达到峰值。尿样中其它常规监测的甾体激素浓度虽有所波动,但均未呈现明显变化。尿样中的福美司坦浓度可在较长时间内提示外源性福美司坦的摄入。结论:尿样中的福美司坦浓度可作为兴奋剂常规检测中的特征性参数以监控福美司坦滥用。

口服依西美坦后尿中内源性甾体排放规律

依西美坦(exemestane)作为芳香酶抑制剂,因其能够抑制人体内的雄激素向雌激素转变,提高雄激素水平,而被世界反兴奋剂机构(WADA)禁用。本研究通过对一名健康男性志愿者口服单次治疗剂量依西美坦1片(25 mg/片)后,留取15天尿样,采用气相色谱/质谱联用技术,分析其中的内源性甾体激素并逐一定量,分析口服依西美坦后尿中内源性甾体激素的排放规律。结果显示,尿中睾酮等内源性雄性甾体激素浓度有一定增加,几种相关内源性雄性甾体激素比值无明显变化,而睾酮与雌酮浓度比值发生明显变化。采用气相色谱/同位素比质谱技术测定尿中雄酮和本胆烷醇酮的13C/12C比值,未显示外源性来源。结果提示口服单次治疗剂量依西美坦对尿中内源性甾体激素的排放有一定影响。

睾酮贴剂对尿中类固醇浓度的影响

目的:探讨睾酮贴剂对尿中类固醇浓度的影响,为建立针对睾酮贴剂的兴奋剂直接检测方法及生物护照检测方法奠定基础。方法:征集2名男性志愿者,贴敷睾酮贴剂,并于给药后6天内收集14份尿样。对尿样中相关类固醇浓度进行测定。结果:用药后尿样中T/E上升,但An、Etio、5α-diol和5β-diol浓度变化不明显。结论:睾酮贴剂的使用可影响尿样中类固醇浓度。此研究结果有助于完善睾酮类兴奋剂的检测。

同位素比质谱方法检测兴奋剂福美司坦

目的:建立对福美司坦药物来源的检测方法,并进行人体代谢的检测研究。方法:采用酶解、提取、高效液相色谱纯化等方法对尿样进行预处理,应用同位素比质谱仪测定相关组分的同位素比(13C/12C,δ值),建立检测方法。本实验中招募2名男性健康受试者,每位受试者口服福美司坦后收集尿样,应用所建立的检测方法对尿样进行分析,探讨福美司坦在人体内代谢过程中的检测规律。结果:建立的分析方法精密度及重现性RSD均小于1%。受试者尿样中福美斯坦的δ值在服药后迅速降低,并在27小时内保持在约为-31‰。内源性雄性激素代谢物雄酮androsterone和本胆烷醇酮etiocholanolone的δ值无显著性变化。结论:在兴奋剂检测中确定以福美司坦药物原形为目标化合物进行来源分析,建立了检测福美斯坦兴奋剂的同位素比质谱分析方法。

气相色谱-高分辨质谱联用法检测人尿中21种兴奋剂

采用气相色谱-高分辨质谱联用技术建立人尿中包括诺龙、宝丹酮、美雄酮在内的21种兴奋剂的检测方法。样品经液液萃取,浓缩,三甲基硅烷化衍生,利用气相色谱/高分辨质谱及多离子检测技术(MID)同时检测21种兴奋剂。按照世界反兴奋剂组织(WADA)认可实验室方法验证程序进行验证,该方法的检出限为ng.mL-1水平;回收率为66%～103%之间(n=6),回收率的相对标准偏差小于10.0%;对3个不同浓度下样品定量检测的精密度测试。结果表明,精密度RSD分别低于9.5%,10.0%,9.7%。

应用双缩脲反应测定鳖甲中总肽含量的方法学研究

目的:用双缩脲试剂显色,可见分光光度法测定醋鳖甲中的总肽含量。方法:显色剂为0.02 g.mL-1的酒石酸钠钾、5%的NaOH溶液0.3 mL、1%的CuSO4溶液1 mL,检测波长545 nm。结果:七肽在2.50～10.04 mg与吸收度呈良好的线性关系,精密度、重现性、稳定性均合乎要求,平均回收率为98.02%,RSD为1.65%(n=5),符合要求。结论:实验首次使用该方法测定中药中的肽类成分,创新性强,简便可行并且精确度高。

人体尿液中新型促红细胞生成素受体激动剂的检测

促红细胞生成素类制剂（erythropoietin stimulating agents，ESAs）作为治疗。肾性贫血的主要药物在临床中被广泛应用。由于其能促进血液中红细胞数量的增加，从而提高血液的载氧能力，也常常被竞技体育中某些耐力项目运动员滥用以提高运动成绩。这不仅违背了体育运动的公平性，也给运动员的健康带来了极大的损害。

气相色谱质谱联用仪在兴奋剂检测领域的核查方法实际应用

北京兴奋剂检测实验室根据本行业的特点,结合JJF1164-2018《气相色谱-质谱联用仪校准规范》和中国合格评定国家认可委员会(CNAS)相关指南,制定了适用于兴奋剂检测的气相色谱-质谱联用仪的有证标准物质验证核查方法。