合成生物学的关键技术及应用进展

20世纪的生物学研究一直着眼于对生物系统的不断分解，解剖至细胞中单个蛋白或基因，研究其结构和功能来解释生命现象。但随着当代分子生物学技术的迅猛发展，以系统化设计和工程化构建为理念的合成生物学成为新一代生物学的发展方向。

高GC含量DNA模板的PCR扩增

目的：探索高GC含量DNA的PCR扩增条件，为扩增达托霉素生物合成基因簇及拼接奠定基础。方法：在PCR扩增体系中，使用高保真的聚合酶及添加不同浓度的DMSO、7-deaza-dGTP等增强剂，并选择合适的PCR循环程序，优化富含GC的DNA的PCR扩增条件。结果：向反应体系中额外添加1%~4%的DMSO可以显著提高富含GC的DNA的PCR扩增产物量，但会降低其特异性；7-deaza-dGTP可以提高扩增产物的特异性及保真度，但产量会有所下降。应用touch down PCR并在体系中添加7-deaza-dGTP能够提高扩增产物的特异性和产率，增加扩增的保真度。结论：应用优化的PCR扩增条件将所有达托霉素生物合成基因簇分段扩增出来，并可扩增出长达6 kb的片段，且序列完全正确，可以进行后续拼接。

基层医院急诊科建设的探讨

我国基层医院急诊专业发展相比较于其他临床专业普遍存在资金投入不足、人员配置短缺、结构布局不合理等诸多问题。卫生部印发的《急诊科建设与管理指南(试行)》(卫医政发〔2009〕50号),为急诊科的发展提供了良好的政策保障和建设规范,必将为我国基层医院急诊科建设起到极大的推动与规范作用。我院是二级甲等医院,但充分认识到急诊科是急症诊疗的首诊场所,医院的窗口科室,也是社会医疗服务的重要组织部分。通过近两年的努力,以《急诊科建设与管理指南(试行)》的要求,新建了一千五百平米的现代化急诊科。本文总结我院急诊科改建的一些体会,希望给基层医院的急诊科建设提供点滴借鉴。

肿瘤血管生成的实验模型

血管生成在肿瘤的生长、侵袭和转移中起着重要的作用。通过抑制新生血管的形成和发展来达到杀伤肿瘤细胞的目的,是一种确实有效的"饥饿"疗法。近年来对抗血管生成治疗肿瘤的研究取得了很大的进展,目前已建立了多种实验模型和评价标准,包括体内和体外两大类。每种模型都有其优缺点,可根据研究内容选择合适、有效的实验模型。

ISO9001：2000标准中测量、分析和改进与医院奖金分配相结合的探讨

ISO9000质量体系在我国各级医院运用时间不长,是一件新生事物。其与医院原有的管理模式如何衔接与融合,是认证过程中普遍存在的问题。我院在质量管理实践中,通过ISO9000标准中"测量、分析和改进"对医院进行了有效管理,并采取"两评分两评价"的方法与奖金分配相结合,取得了良好的效果。

抗血管生成活性的重组人proEMAPⅡ/p43蛋白缺失突变体的构建和筛选(英文)

proEMAPⅡ（又称p43蛋白）是哺乳动物氨酰tRNA合成酶的辅助因子，近年来发现，p43具有细胞因子活性以及抗新生血管生成的作用，具有潜在的抗肿瘤疗效．p43的C端结构域即为EMAPⅡ，其结构和功能都已知，具有细胞因子和抗血管生成的双重功能．但是N端的结构还不清楚，研究表明全长的p43比EMAPⅡ具有更高的生物学活性，但是p43的结构和作用机制尚不明确．此外，作为蛋白质药物，更小的分子能够减少免疫原性和副作用，从而发挥更好的活性．本文利用生物信息学方法，对p43 N端的二级结构进行预测，并且在不破坏二级结构的前提下，构建了10个p43的缺失突变体，在体外对10个缺失突变体与全长的p43蛋白进行抗新生血管生成活性验证比较，最终我们获得了3个活性高的p43缺失突变体，并且发现N端的1～16，1～79位氨基酸和C端的264～312位氨基酸不是p43发挥抗血管生成功能所必需的，而且它们的删除使得活性位点更好地呈现并发挥活性．通过我们的研究，有助于揭示p43蛋白结构和功能的关系以及其作用机制，同时为临床筛选肿瘤治疗候选药物奠定基础．

纤维支气管镜在EICU机械通气管理中的应用

纤维支气管镜(纤支镜)在急诊危重症病房(EICU)工作中发挥着越来越大的作用。本文就2011年4月至2012年4月期间,我院EICU病房中机械通气患者开展床旁纤支镜治疗,对62例行纤支镜检查及治疗的效果、安全性进行评价,以探讨纤支镜在EICU机械通气患者中应用的价值。

基层医院信息化建设实践与经验

我院是一家二级甲等医院,床位630张、职工713人、年出院病人2.8万人次。自2009年医院开始信息化建设以来,取得了良好的社会效益,被评为"河北省信息化示范医院"。为贯彻中共中央、国务院《关于深化医药卫生体制改革的意见》,中央财政下拨专项资金用于县级医院信息化建设。但是县域经济发展不平衡,县医院建设发展水平不一,信息化基础各不相同[1],基层医院信息化中存在较多问题。本文总结了我院信息化建设中的经验与体会,以期对基层医院的作息化建设有所借鉴与启发。

达托霉素生产菌(ATCC31568)的紫外诱变和抗生素抗性筛选

目的建立一种提高达托霉素生产水平的方法。方法以玫瑰孢链霉菌(ATCC31568)为出发菌株,利用紫外诱变结合抗生素抗性筛选以提升达托霉素生产水平。结果通过对致死率和正突变率的考察,确定紫外诱变时间为45s,利福平和庆大霉素的合适筛选浓度分别为1.4μg/mL、1.0μg/mL,得到的突变株经摇瓶发酵后,采用高效液相色谱仪(HPLC)对最终发酵液进行检测。筛选到的突变株Ge-27最高产量达到79.44 mg/L,比原始菌株提高了42.2%。结论采用紫外诱变结合抗生素抗性筛选得到了达托霉素合成水平提高的菌株。

血液灌流联合持续性肾脏替代治疗对老年重度有机磷中毒患者心肾损伤的保护作用

目的探讨血液灌流联合持续性肾脏替代治疗对老年重度有机磷中毒患者心肾损伤的保护作用。方法选择2010年9月至2015年6月诊断为老年重度有机磷中毒患者120例,随机数字表法分为联合组与对照组,各60例。对照组患者给予常规洗胃、灌肠清除肠道内毒物,给予阿托品解毒、氯解磷定复能剂补液对症处理,入院12 h内给予行血液灌流治疗1次,治疗2-4 h。联合组患者在对照组治疗基础上,12 h后给予持续性血液净化治疗（CVVH）,持续24-48 h。期间每12小时给予血液滤过治疗1次拱3次。治疗前与治疗后第3天,采用酶联免疫吸附fELISA）法检测血清白介细胞素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）采用免疫比浊法检测血清白蛋白（CRP）水平。采用全自动生化分析仪检测血肌酐（SCr）、胱抑素C（Cys-C）、血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）水平采用免疫化学发光法检测血清肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）、B型钠尿肽（BNP）水平。观察两组患者血胆碱酯酶活力恢复时间、急性生理学与慢性健康状况评分最大值（APACHEmaxⅡ）、机械通气支持时间、肺部感染发生情况及病死情况的差异。结果治疗后第3天,联合组与对照组比较,血清IL-6[（51.49±8.53）ng/L比（81.06±9.62）ng/L,L,t=3.084]、CRP[（34.81±6.05）mg/L比（61.85±7.38）mg/L,t=3.541]、TNF-α[（46.82±7.36）ng/L比（68.05±9.36）ng/L,t=2.983]水平均较治疗前下降,且组间比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。血SCr[（123.74±22.80）μmol/L比（180.63±20.62）μmol/L,t=2.897]、Cys-C[（1.53±0.31）mg/L比（2.38±0.61）mg/L,t=3.035]、BNP[（490.31±62.87）ng/mL比（1598.46±54.29）ng/mL,t=3.806]、CK-MB[（42.80±5.48）μg/L比（60.92±8.63）μg/L,t=3.369]、cTnⅠ[（0.93±0.13）mg/L比（1.89±0.61）mg/,t=3.995]水平也较治疗前明显下降,且组间比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。联合组与对照组血胆碱酯酶活力恢复时间[（6.69±1.04）d比（8.99±1.34）d,t=3.095]、APACHEmaxⅡ[（24.80±5.43）比（30.54±6.29）,t=3.905]、机械通气支持时间[（5.94±1.36）d比（9.06±1.28）d,t=3.319]、肺部感染发生率[（10/60,16.67%）比（22/60,36.67%）,χ^2：3.061]及病死率[（6/60,10.00%）比（14/60 23.33%）,χ^2：2.984]水平均较治疗前减少,且组间比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论血液灌流联合持续性肾脏替代治疗可有效清除患者体内炎性介质,对老年重度有机磷中毒患者心肾损伤有保护作用。

44例急性氨中毒致咽喉损伤的临床分析

４４例急性氨中毒致咽喉损伤的临床分析沈阳市劳动卫生职业病研究所（１１００２４）邢玉华沈阳市卫生事业管理局王子仁１９９３年１～３月我院共抢救急性氨中毒患者４４人，这批患者咽喉损伤比较明显，现将有关情况报告如下。１一般情况本组病例４４人，男３１人，女１３...

国产雷帕霉素药物涂层支架置入术对缺血性心肌病患者近中期预后影响的临床研究

目的探讨国产雷帕霉素药物涂层支架置入术对缺血性心肌病患者近中期预后的影响。方法选取我院于2012年4月～2014年5月对收治的120例缺血性心肌病患者，随机的分成试验组和对照组各60例，对照组采用常规方法进行治疗，试验组在对照组的基础上使用国产雷帕霉素药物涂层支架置人术治疗，采用统计分析软件观察两组患者的临床表现和治疗效果。结果通过治疗发现，观察组患者在治疗后的呼吸困难、呼吸急促、胸痛、心功能分级、左心室射血分数、左室短轴缩短率以及左心室舒张末内径等各项指标的数据，与对照组相比差异明显，具有统计学意义（P〈0．05）。结论通过研究发现，国产雷帕霉素药物涂层支架置入术可以改善缺血性心肌病患者近中期预后情况，临床效果明显，值得推广应用。

水利工程建设财务管理中的内部会计控制

我国水利工程建设项目发展势头不容小觑,财务管理工作在水利工程建设项目中成为重要内容。会计内部控制是财务管理的核心力量,对我国的水利工程项目建设至关重要,并且具有监督和控制作用。本文主要从会计内部控制存在的问题出发,提出水利工程财务管理内部会计控制的改进措施,阐述水利工程建设财务管理中的内部会计控制的执行意义,提出加强水利工程财务管理的意见与建议。

焦虑症与抑郁性神经症的对照观察

焦虑症与抑郁性神经症的对照观察高树贵，李沛英，邢玉华，郑先振，翟金国，姚宁焦虑症与抑郁性神经症的临床表现常相互重叠，两者皆可出现的症状颇多，现对此作一对照观察。选择于１９９１年６月～１９９３年６月期间连续住院患者，按ＣＣＭＤ－２诊断标准诊断为这两种疾...

融资租赁收益应按实际利率法计缴营业税

在融资租赁业务中,出租方往往是专业租赁公司,它只提供融资服务,对技术等问题概不负责,因而属于金融企业。它的营业收入来源于租金收入,但是融资租赁租金的构成和经营租赁租金的构成大不相同,包括收回的成本（经营租赁租金中不包括这部分）和本期的应收利息,

45例锂中毒患者的观察及护理

总结了 45例锂中毒患者的主要临床表现 ,针对其症状复杂、治疗护理难度大 ,处理不及时可致死亡等特点 ,重点阐述了对中毒前期及中毒期症状的观察及护理 ,并强调加强饮食。

应用Delphi法重构高职心理与精神护理课程实践研究

目的:使用德尔菲(Delphi)法对高职心理护理和精神科护理2门课程进行优化整合。方法:应用Delphi法,先后进行了两轮护理专家问卷函询,对高职心理与精神护理课程内容及表现形式等进行函询,并对数据进行分析处理。结果:两轮函询问卷的回收率和有效率均为100%,对课程内容进行了优化整合,所定教学内容的变异系数均小于0.3,协调系数0.937。结论:本研究将"心理护理"和"精神护理"紧密衔接,避免了内容的重复,增强了课程的实用性,可为其它高职院校心理与精神护理课程设置提供借鉴。