SIRT1-TLR4信号通路在MPTP帕金森病小鼠模型炎症反应中的作用

目的探索SIRT1-TLR4信号通路在1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶盐酸盐(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)帕金森病(PD)小鼠模型炎症反应中的作用。方法选用MPTP处理C57BL/6小鼠构建帕金森病小鼠模型,将小鼠随机分为对照组(Con组)、模型组(MPTP组)、激活剂组(RV+MPTP组)、抑制剂组(EX527+RV+MPTP组)。腹腔注射MPTP建立帕金森病小鼠模型,并给予白藜芦醇(RV)灌胃、SIRT1特异性抑制剂EX527腹腔注射处理,通过爬杆实验、旷场实验评估小鼠行为学改变,利用免疫荧光、Western blot等检测酪氨酸羟化酶(TH)、SIRT1、TLR4、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)等相关蛋白表达。结果和Con组相比,MPTP组小鼠爬杆总时间和爬杆转向时间明显增加,行走总路程、进入中心区域总距离、进入中心区域次数均明显减少(P<0.05);和MPTP组相比,RV+MPTP组小鼠爬杆总时间和爬杆转向时间明显缩短,行走总路程、进入中心区域总距离、进入中心区域次数均明显增加(P<0.05);和RV+MPTP组相比,EX527+RV+MPTP组小鼠爬杆总时间和爬杆转向时间明显增加,行走总路程、进入中心区域总距离、进入中心区域次数均明显减少(P<0.05)。免疫荧光检测发现,和Con组相比,MPTP组小鼠脑黑质区TH阳性神经元和SIRT1蛋白表达均明显减少,TLR4表达明显增加(P<0.05);和MPTP组相比,RV+MPTP组小鼠脑黑质区TH阳性神经元和SIRT1蛋白表达均明显增加,TLR4表达明显减少(P<0.05);和RV+MPTP组相比,EX527+RV+MPTP组小鼠脑黑质区TH阳性神经元和SIRT1蛋白表达均明显降低,TLR4表达明显增加(P<0.05)。蛋白质印迹检测发现,和Con组相比,MPTP组小鼠脑黑质中TH、SIRT1蛋白表达明显降低,TLR4、IL-6、TNF-α蛋白表达明显升高(P<0.05);和MPTP组相比,RV+MPTP组小鼠脑黑质中TH、SIRT1蛋白表达明显升高,TLR4、IL-6、TNF-α蛋白表达明显降低(P<0.05);和RV+MPTP组相比,EX527+RV+MPTP组小鼠小鼠脑黑质中TH、SIRT1蛋白表达明显降低,TLR4、IL-6、TNF-α蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论SIRT1-TLR4信号通路可能参与PD神经炎症反应过程,可能在PD的发生、发展中有重要作用,可能参与了PD的疾病过程。

组蛋白去乙酰化酶9基因rs73307079位点与烟雾病发生风险的关系

目的探讨烟雾病(MMD)患者组蛋白去乙酰化酶9(HDAC9)基因rs73307079位点与MMD发生风险的关系及该位点不同基因型对HDAC9基因表达的影响。方法选择2019年9月至2020年12月于新乡医学院第一附属医院神经内科及神经外科就诊的54例MMD患者为MMD组,另选择53例性别、年龄与MMD组匹配的健康体检者作为对照组。取所有受试者空腹外周静脉血,提取基因组DNA,采用聚合酶链式反应法扩增HDAC9基因rs73307079位点DNA片段并测序,应用Chromas软件分析所有受试者的HDAC9基因rs73307079位点基因型。采用二元logistic分析多重遗传模型(加性、显性、隐性、超显性)下HDAC9基因rs73307079位点不同基因型与MMD发生风险的关联性。采用实时定量聚合酶链式反应法检测HDAC9基因mRNA相对表达量。结果MMD组和对照组受试者rs73307079位点均存在TT、TC、CC 3种基因型及T、C 2种等位基因。MMD组受试者TT基因型频率显著低于对照组(P<0.05),TC基因型频率显著高于对照组(P<0.05);2组受试者的CC基因型频率比较差异无统计学意义(P>0.05);2组受试者的T、C 2种等位基因分布差异无统计学意义(P>0.05)。在加性遗传模型下,TC基因型携带者发生MMD的风险显著高于TT基因型携带者(P<0.05),CC基因型携带者与TT基因型携带者的MMD发生风险比较差异无统计学意义(P>0.05);在显性遗传模型下,TC+CC基因型携带者发生MMD的风险显著高于TT基因型携带者(P<0.05);在隐性遗传模型下,CC基因型携带者与TT+TC基因型携带者的MMD发生风险比较差异无统计学意义(P>0.05);在超显性遗传模型下,TC基因型携带者发生MMD的风险显著高于TT+CC基因型携带者(P<0.05)。MMD组患者中rs73307079位点TT、TC、CC基因型患者的HDAC9 mRNA相对表达量分别为1.173±0.642、1.123±0.203、1.045±0.386,两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论HDAC9基因rs73307079位点基因型多态性与MMD的发生存在关联,但不影响HDAC9基因表达水平,该位点的TC基因型携带者具有较高的MMD发病风险。

具核梭杆菌诱导CD8^(+)T淋巴细胞表面抑制性受体KIR2DL1高表达在食管鳞癌中的临床意义

目的分析食管鳞癌患者癌组织中具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum,Fn)对CD8^(+)T细胞表面抑制性受体KIR2DL1的诱导效应与临床病理特征及5年生存率的相关性,并探讨其临床意义及预后价值。方法选择2014年1月到2014年12月安阳肿瘤医院手术切除的食管鳞癌患者癌组织及相应癌旁组织石蜡包埋标本为研究对象,采用RNAscope及免疫组织化学方法分别检测癌组织及相应癌旁组织中Fn感染及CD8^(+)T细胞表面KIR2DL1的表达情况,并分析Fn对CD8^(+)T细胞表面KIR2DL1的诱导效应,及其与临床病理特征相关性;采用Kaplan-Meier生存分析法绘制生存曲线并利用Log-rank检验方法分析Fn对CD8^(+)T细胞表面KIR2DL1的诱导效应与生存时间之间相关性。结果食管鳞癌中可见癌细胞胞质出现红色颗粒,为Fn感染阳性,连续切片淋巴细胞胞膜出现棕黄色颗粒,为CD8^(+)T细胞表面KIR2DL1表达阳性,而癌旁组织中二者多为阴性表达;且癌组织中Fn感染与CD8^(+)T细胞表面KIR2DL1表达具有显著一致性(P<0.05)。Fn诱导CD8^(+)T细胞表面KIR2DL1表达阳性与患者性别、吸烟、饮酒、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、临床分期及化疗敏感度均相关(均P<0.05),且阳性组5年生存率及中位生存时间均明显低于阴性组(均P<0.05)。结论长期吸烟、饮酒会导致恶劣的口腔环境,Fn更容易在这种环境下感染并定植,从而诱导CD8^(+)T细胞表面KIR2DL1高表达,削弱机体抗肿瘤免疫反应,促进食管鳞癌恶性进展。

石榴花的降血糖作用研究

随着生活水平的日益提高,2型糖尿病发病率在逐年升高,根据国际糖尿病联盟统计,在2000年全球有糖尿病患者1.51亿,而目前全球有糖尿病患者2.85亿,按目前速度增长的话,估计到2030年全球将有近5亿人患糖尿病,其中2型糖尿病的发生,在国外占整个糖尿病比例的85%--95%以上,而国内则更高,达98%以上,有糖尿病引发的死亡人数在发达国家已经列第三位(心脑血管和癌症之后),因此对2型糖尿病的防治研究已经成为各国医药学界的重要课题。研究有效调节血糖的药物对预防糖尿病,保护人民身体健康。