麦粒灸法与疏血通注射液联合常规疗法治疗急性脑梗死后手功能障碍临床研究

目的:观察麦粒灸法与疏血通注射液联合常规疗法治疗急性脑梗死后手功能障碍的临床疗效。方法:将180例急性脑梗死后手功能障碍气虚血瘀证患者按照随机数字表法分为观察组和对照组各90例。对照组采用常规疗法和疏血通注射液治疗,观察组在对照组基础上加用麦粒灸法治疗,2组均以2周为1个疗程,连续治疗2个疗程。治疗前后应用Fugl-meyer运动功能评分量表(FMA)评定患手的运动功能,应用偏瘫手功能评分表评定患手综合功能,应用神经功能缺损程度评定量表(NDS)评定患手的神经功能缺损程度,使用肌电图设备检测患手手腕肌群的积分肌电值(iEMG);检测血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S100B蛋白及血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素(IL)-18、IL-6、血小板分子标志物1(PAC-1)、D-二聚体(D-D)水平。比较2组临床疗效。结果:治疗后,观察组总有效率98.89%,对照组总有效率85.56%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。2组FMA评分、偏瘫手功能评分均较治疗前升高(P<0.05),观察组FMA评分、偏瘫手功能评分均高于对照组(P<0.05)。2组NDS评分均较治疗前降低(P<0.05),观察组NDS评分低于对照组(P<0.05)。2组腕背伸肌群、腕掌屈肌群iEMG均较治疗前升高(P<0.05),观察组腕背伸肌群、腕掌屈肌群iEMG均高于对照组(P<0.05)。2组血清NSE、S100B蛋白、IL-18、IL-6、PAC-1、D-D水平均较治疗前降低(P<0.05),血清VEGF水平均较治疗前升高(P<0.05);观察组血清NSE、S100B蛋白、IL-18、IL-6、PAC-1、D-D水平均低于对照组(P<0.05),血清VEGF水平高于对照组(P<0.05)。结论:在常规脑梗死基础疗法和常规康复疗法基础上加用麦粒灸法联合疏血通注射液治疗气虚血瘀型急性脑梗死后手功能障碍效果确切,可有效减轻患手的神经功能缺损程度和脑梗死局部的炎症程度,改善脑部血液循环和患手的腕背伸肌群、腕掌屈肌群力量,提高患手的综合功能。

通阳针法联合神经肌肉本体促进技术对脑卒中后肩手综合征患者的疗效分析

目的:探究通阳针法联合神经肌肉本体促进技术(PNF)治疗脑卒中后肩手综合征(SHS)的应用价值。方法:选取2018年9月—2021年3月我院康复科治疗的94例脑卒中后SHS患者,按随机数字表法将患者分为常规组和实验组,各47例。常规组实施PNF治疗,实验组于常规组基础上予以通阳针法治疗。对比两组治疗效果,治疗前后病情因子[降钙素基因相关肽(CGRP)、内皮素-1(ET-1)、同型半胱氨酸(Hcy)]水平、神经功能、肢体运动功能、手肿胀程度、疼痛程度及日常生活能力。结果:实验组治疗总有效率为89.36%,显著高于常规组为72.34%(P<0.05);治疗后两组ET-1、Hcy水平降低,CGRP水平升高,且实验组ET-1、Hcy水平低于常规组,CGRP水平高于常规组(P<0.05);治疗后两组斯堪的纳维亚卒中量表(SSS)评分、Fugl-Meyer评估量表(FMA)评分、生活能力量表(ADL)评分升高,手肿胀程度、视觉模拟量表(VAS)评分降低,且实验组SSS、FMA、ADL评分高于常规组,肿胀程度、VAS评分低于常规组(P<0.05)。结论:通阳针法联合PNF通过调节病情因子水平能改善脑卒中后SHS患者神经功能,能减轻肿胀程度,缓解患者疼痛,促进上肢运动功能恢复,增强生活能力。

麦粒灸联合康复训练对脑卒中后上肢痉挛患者屈肌表面肌电及痉挛分级的影响

目的探讨麦粒灸联合康复训练对脑卒中后上肢痉挛患者屈肌表面肌电及痉挛分级的影响。方法选取2018年3月至2020年5月我院收治的脑卒中后上肢痉挛患者92例,按照随机数字表法分为研究组(n=46)与对照组(n=46),对照组采用康复训练治疗,研究组在对照组基础上采用麦粒灸治疗,对比两组治疗前后Barthel指数和Fugl-Meyer评分、屈肌表面最大等长收缩时(MIVC)肱二头肌积分肌电值(iEMG)及痉挛分级。结果治疗后,两组Barthel指数和Fugl-Meyer评分均较治疗前升高,且研究组高于对照组(P<0.05);治疗后,两组伸肘i EMG和屈肘i EMG均较治疗前降低,且研究组低于对照组(P<0.05);治疗后,研究组痉挛分级优于对照组(P<0.05)。结论麦粒灸联合康复训练治疗脑卒中后上肢痉挛,可改善患者日常生活活动能力、上肢运动功能和屈肌表面肌电值,有效缓解痉挛程度。

麦粒灸联合养血柔肝汤治疗脑卒中恢复期下肢痉挛临床研究

目的:观察麦粒灸联合养血柔肝汤治疗脑卒中恢复期下肢痉挛的临床效果。方法:98例随机分为观察组和对照组各49例,两组均用养血柔肝汤治疗,观察组联合麦粒灸治疗。结果:治疗后观察组Ashworth评分低于对照组(P<0.05),观察组Fugl-Meyer评分高于对照组(P<0.05),观察组CCS评分低于对照组(P<0.05),观察组Barthel指数高于对照组(P<0.05)。结论:麦粒灸联合养血柔肝汤治疗脑卒中恢复期下肢痉挛效果较好。

槲皮素对非对称性二甲基精氨酸诱导损伤的脑血管内皮细胞的保护作用及其机制研究

目的探讨槲皮素对非对称性二甲基精氨酸(ADMA)诱导下人脑血管内皮细胞(HBMECs)损伤的保护作用及其作用机制。方法采用ADMA(30μmol/L,作用24 h)诱导建立HBMECs损伤模型。实验分为对照组(不加任何干预因素)、ADMA组、ADMA+槲皮素处理组(加入终浓度分别为0. 1、1、10、100μmol/L的槲皮素预处理2 h后再加入终浓度为30μmol/L的ADMA作用24 h)、100μmol/L槲皮素处理组(100μmol/l的槲皮素预处理2 h后换常规培养液)、10μmol/l槲皮素处理组(10μmol/L的槲皮素预处理2 h后换常规培养液)、茴香霉素(ANISO)/P79350+ADMA+槲皮素处理组[加入终浓度为10μmol/L的槲皮素预处理2 h后再加入终浓度为30μmol/L的ADMA作用24 h,实验结束前1 h加入10μmol/L的ANISO或50μmol/L的P79350]以及ANISO/P79350处理组(常规培养液培养,实验结束前1 h加入10μmol/L的NAISO或50μmol/L的P79350),每组6个样本。不同浓度槲皮素预处理2 h后,噻唑蓝法测定细胞活性,酶联免疫吸附试验法测定细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧、丙二醛、脑源性神经营养因子(BDNF)水平,Western blotting分析Bax、Bcl-2、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化JNK(p-JNK)、p38、磷酸化p38(p-p38)表达水平,逆转录-聚合酶链式反应检测内皮型一氧化氮合酶(e NOS) mRNA表达,caspase-3活性试剂盒检测caspase-3活性,应用JNK激动剂ANISO和p38激动剂P79350观察JNK/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路在槲皮素介导的细胞损伤保护中的作用。结果与对照组比较,ADMA组HBMECs活性(52±8)明显降低,LDH水平(356±28)显著升高,BDNF浓度(51±8)明显下降,差异均有统计学意义(均P <0. 05);与ADMA组比较,ADMA+10μmol/L槲皮素处理组和ADMA+100μmol/L槲皮素处理组HBMECs细胞活性显著改善(分别为80±5、86±7),LDH水平明显下调(分别为162±20、141±17),BDNF浓度明显增加(分别为82±5、94±6),差异均有统计学意义(均P <0. 05)。应用10μmol/L的槲皮素处理进行后续实验,结果显示,与ADMA组比较,ADMA+槲皮素处理组Bcl-2 mRNA、e NOS mRNA和SOD水平均明显升高(分别为0. 75±0. 10、0. 81±0. 07、81±10),Bax表达水平和caspase-3活性、活性氧、丙二醛水平均明显减低(分别为1. 63±0. 12、1. 85±0. 16、169±16、159±13),差异均有统计学意义(均P <0. 05)。进一步机制分析表明,与对照组比较,ADMA组可显著提高HBMECs中JNK和p38的磷酸化水平(p-JNK/JNK和p-p38/p38分别为3. 46±0. 32、3. 66±0. 31);与ADMA组比较,ADMA+槲皮素处理组有效抑制了ADMA诱导下HBMECs的JNK和p38磷酸化水平(p-JNK/JNK和p-p38/p38分别为2. 60±0. 19、2. 72±0. 20),差异均有统计学意义(均P <0. 05);与ADMA+槲皮素处理组比较,ANISO+ADMA+槲皮素处理组p-JNK/JNK(4. 06±0. 30)和P79350+ADMA+槲皮素处理组p-p38/p38(3. 84±0. 32)明显增高,两组细胞活性和BDNF水平明显降低,LDH水平明显增加,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论槲皮素可缓解ADMA诱导的HBMECs损伤,其机制可能与抑制JNK/p38 MAPK信号通路有关。

微型变压吸附制氧与氧疗保健

微型变压吸附制氧具有方便、灵活以及可长期连续供氧等特点,是家庭氧疗保健的最佳供氧方法。随着微型制氧技术的发展,微型变压吸附制氧机的各项性能指标逐步提高。微型变压吸附制氧应用于氧疗保健可以治疗病理性缺氧疾病,可以缓解生理性缺氧症状、环境性缺氧症状。随着人们对氧疗保健认识的深入和供氧设备的发展,氧疗保健将得到快速发展。

甲基麦冬黄烷酮A降低缺氧复氧诱导PC12细胞凋亡及氧化损伤

目的考察甲基麦冬黄烷酮A(MO-A)对PC12细胞缺氧复氧损伤的作用。方法培养PC12细胞,缺氧4 h复氧24 h建立细胞损伤模型,MO-A预处理1 h后进行缺氧复氧损伤,细胞分为对照组、模型组、1μmol/L MO-A+模型组、10μmol/L MO-A+模型组、50μmol/L MO-A+模型组,共5组。通过CCK8、BrdU、LDH试剂盒评价细胞活性、增殖及损伤。细胞凋亡通过检测细胞凋亡率、caspase-3活性及活化型caspase-3(c-caspase-3)蛋白表达水平进行评价,通过测定SOD、 CAT活性及MDA水平评价细胞氧化损伤。结果与对照组比较,单独给予不同浓度(1、10、50μmol/L)MO-A对细胞的活性及增殖均无明显作用。模型组细胞活性和增殖率均较对照组降低、LDH释放率增加(P<0.05);给予MO-A预处理后,细胞活性及增殖率升高,LDH释放率减少(P<0.05),呈现浓度依赖性。与对照组比较,模型组细胞凋亡增加,MO-A预处理细胞凋亡率、caspase-3活性降低,c-caspase-3表达下调(P<0.05)。此外,MO-A预处理组SOD、CAT活性较模型组升高(P<0.05),而MDA水平降低(P<0.05)。结论 MO-A可抑制缺氧复氧诱导PC12细胞凋亡和氧化损伤。

14-3-3ε激活NF-κB通路参与氧糖剥夺/再灌注诱导的原代培养大鼠脊髓星形胶质细胞活化

目的:研究14-3-3ε蛋白对氧糖剥夺/再灌注(oxygen-glucose deprivation reperfusion,OGDR)诱导的脊髓星形胶质细胞活化的影响及其机制。方法:原代培养新生SD大鼠脊髓星形胶质细胞建立OGDR模型,用CCK-8试剂盒检测细胞活力,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性检测试剂盒检测LDH活性,用ELISA法检测谷氨酸浓度、TNF-α和IL-1β的表达,Real-Time PCR和Western Blot分别检测14-3-3εmRNA和蛋白表达,用Western Blot检测核转录因子-B(Nuclear transcription factor kappa B,NF-κB)、星形胶质细胞活化标志物胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、胶质瘢痕标志物neurocan和phosphacan蛋白的表达;转染14-3-3εsiRNA沉默14-3-3ε表达,将细胞分为对照组、OGDR组、非特异性转染(Scramble)组和14-3-3εsiRNA组,检测14-3-3εsiRNA预处理对OGDR星形胶质细胞GFAP、neurocan和phosphacan以及NF-κB蛋白表达的影响。用NF-κB特异性抑制剂PDTC预处理细胞,观察NF-κB通路是否参与14-3-3ε对星形细胞的活化。结果:OGDR引起细胞活力降低,LDH活性、谷氨酸浓度、TNF-α和IL-1β分泌升高;OGDR处理后,细胞14-3-3εmRNA和蛋白表达均显著升高,同时NF-κB、GFAP、neurocan和phosphacan蛋白的表达均升高,与对照组相比差异均具有统计学意义(P<0.05);14-3-3ε沉默后,OGDR细胞GFAP、neurocan、phosphacan和NF-κB蛋白的表达水平均显著下调(P<0.05)。PDTC预处理后,14-3-3εsiRNA对星形胶质细胞活化的抑制作用增强。结论:14-3-3ε可能是通过激活NF-κB通路参与OGDR诱导的脊髓星形细胞活化。

骨形成蛋白和激活素的跨膜抑制剂调节自噬抑制谷氨酸诱导的大鼠脊髓背角神经组织细胞凋亡

目的探讨过表达骨形成蛋白和激活素的跨膜抑制剂(BMP and activin membrane-bound inhibitor,BAMBI)对谷氨酸诱导的大鼠脊髓背角神经元和星形胶质细胞凋亡的影响。方法原代培养新生Wistar大鼠脊髓背角神经元和星形胶质细胞,将细胞分为6组:正常对照组,谷氨酸组,空载组,BAMBI过表达组,si RNA对照组和BAMBI沉默组。Western blot检测各组细胞中BAMBI的表达,流式检测细胞凋亡,Western blot检测自噬标志分子微管相关蛋白轻链3(microtubule associated protein light chain 3,LC3),Beclin1和p62的表达,荧光显微镜检测GFP-LC3的含量,最后Western blot检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白介素-1β(IL-1β),裂解后的半胱天冬酶(cleaved-Caspase3)的表达。结果与对照组相比,谷氨酸诱导的细胞凋亡增加,LC3-Ⅰ的表达降低,LC3-Ⅱ,Beclin1和p62的表达增加,GFP-LC3的含量增加,TNF-α、IL-1β和cleaved-Caspase3的表达增加(P<0.05);与谷氨酸组相比,转染pc DNABAMBI的细胞凋亡减少,LC3和Beclin1的表达显著增加,LC3-Ⅰ和p62的表达降低,细胞内可见大量的GFP-LC3堆积,TNF-α、IL-1β和cleaved-Caspase3的表达显著下降(P<0.05)。BAMBI沉默组的结果与过表达组相反。结论过表达BAMBI可增强自噬,抑制谷氨酸诱导的大鼠脊髓背角神经元和星形胶质细胞凋亡。

SYK调控缺氧/缺糖损伤诱导的大脑皮质神经元凋亡及其机制

目的探讨抑制脾酪氨酸激酶(spleen tyrosine kinase,SYK)对缺氧/缺糖损伤诱导的大脑皮质神经元的凋亡的影响及相关机制。方法分离培养10只SD怀孕大鼠(190~230 g,胎龄16 d)胎鼠的大脑皮质神经元细胞并用MAP2免疫荧光法进行鉴定。建立缺氧/缺糖损伤的体外模型,caspase-3荧光检测试剂盒检测caspase-3活性,Annexin-V FITC/PI法检测细胞凋亡,q RT-PCR检测SYK和凋亡相关的原癌基因Fra-1 m RNA的表达,Western Blot检测SYK、Bcl-2和Fra-1蛋白的表达。Control组:无转染处理的缺氧/缺糖损伤的神经元;SYK siRNA组:转染SYK siRNA的缺氧/缺糖损伤的神经元;SYK-Fra-1 siRNA组:同时转染SYK siRNA和Fra-1 siRNA的缺氧/缺糖损伤的神经元;non-specific siRNA组:转染non-specific siRNA的氧/缺糖损伤的神经元。结果 MAP2免疫荧光鉴定为神经元细胞。缺氧/缺糖损伤诱导神经元SYK表达(P<0.01),RNA干扰抑制SYK表达后caspase-3活性(P<0.05)和细胞凋亡(P<0.01)均显著降低,但是Fra-1 m RNA(P<0.01)和蛋白(P<0.05)表达量明显上升。用RNA干扰技术同时抑制SYK和Fra-1后,caspase-3活性(P<0.01)显著上升但Bcl-2蛋白表达(P<0.01)显著降低。结论 Fra-1介导了SYK对缺氧/缺糖损伤诱导的神经元凋亡的调节,为脑卒中所致的神经元缺血性损伤的治疗提供了新的靶点。

虚拟现实技术对髋关节置换术后康复的影响

目的分析虚拟现实技术在髋关节置换术后下肢运动功能及平衡协调能力的康复方面的影响。方法随机选择治疗组、对照组各42例,对照组采用常规康复治疗,治疗组在常规康复治疗的同时配合VR进行沉浸式场景模拟训练。于治疗前、治疗2周后分别采用Fugl-Meyer(FMA)评定、Berg平衡量表评定及日常生活能力Barthel指数评定评价两组疗效。结果治疗后,两组患者的Fugl-Meyer,Berg和Barthel评分较治疗前明显升高(P<0.05);且观察组患者的Fugl-Meyer,Berg和Barthel评分提高程度大于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论使用VR技术结合的术后康复治疗,患者依从性更好,对下肢运动功能及平衡功能、日常生活能力提高等方面更优。

王立忠调理肝脾法在临床的应用

王立忠教授出身中医世家，为全国名老中医药专家传承工作室导师，第四批全国老中医药专家学术经验继承指导老师。其治学严谨，汇通诸家，学术造诣深厚，临证经验丰富，在长期的临床实践中形成独特的、讲究实效的、有创见的学术思想和医疗风格，临证中尤重视调理肝脾法的应用。

“中医导引术”疗法对恢复期脑卒中患者功能恢复的影响

脑血管意外是常见病、多发病，我国每年有219人／10万人发病，116人／10万人死亡，致残率为75％，5年复发率达41％。针对脑卒中后运动功能障碍的功能训练方法有多种，一般认为功能训练需达到一定的训练量才能取得效果，但由于医疗费用、治疗人员不足等原因，患者往往难以得到足够的治疗，从而影响了治疗效果。笔者运用“中医导引术”疗法结合现代运动疗法治疗恢复期脑卒中患者，取得良好效果。

基于TLR3/TLR9介导巨噬细胞自噬/极化效应探讨血管软化丸抗AS的作用机制

目的:观察血管软化丸通过对TLR3的影响,调控PI3K/Akt/mTOR信号通路,进而对巨噬细胞自噬产生影响,以及观察血管软化丸通过对TLR9的影响,调控下游NF-κB和IRF7信号途径,影响巨噬细胞M2/M1平衡,探讨血管软化丸抗动脉粥样硬化(AS)的分子机制。方法:体外实验,将巨噬细胞随机分为6组,即对照组(空白血清),血管软化丸高剂量组、血管软化丸中剂量组、血管软化丸低剂量组、ODN组(TLR9激动剂:ODN1826)、poly组(TLR3激动剂:poly(I:C))。体内实验,将ApoE^(-/-)小鼠分为6组,对照组(生理盐水,灌胃)血管软化丸高剂量组(浓度为3.456 g/mL),血管软化丸中剂量组(浓度为1.728 g/mL)、血管软化丸低剂量组(浓度为0.864 g/mL)、ODN组(ODN1826,腹腔注射)、poly组(poly(I:C),腹腔注射),腹腔注射每周两次,灌胃每日1次,连续给药8周后取材进行检测。观察血管软化丸含药血清和TLR9对巨噬细胞的极化状态的影响,对动脉斑块iNOS和CD206的表达的影响,对巨噬细胞(M1/M2)平衡相关炎症因子的影响和对巨噬细胞(M1/M2)平衡相关炎症因子的影响;采用ELISA法检测细胞分泌炎性因子相关水平,采用Western blot检测和RT-PCR法检测血管软化丸对主动脉斑块TLR9和TLR3及其下游信号分子表达的影响,观测指标:采用Western blot检测各组细胞TLR9的蛋白含量,及主动脉TLR9及其下游的分子MyD88,p-NF-κB和IRF7的蛋白含量;采用流式细胞术和免疫化学荧光检测各组细胞M1型和M2型的比例;采用RT-PCR和ELISA法检测各组细胞TNF-α的表达;采用RT-PCR和免疫荧光检测RAW264.7细胞和动脉斑块的M1型和M2型巨噬细胞的相关标志性因子和炎症因子;病理学检测验证血管软化丸抗动脉粥样硬化的疗效。结果:血管软化丸含药血清可以诱导巨噬细胞高表达M2型巨噬细胞的标志CD206;中药组斑块中iNOS的荧光密度表现为低表达(P<0.05),而斑块中CD206的荧光密度则表现为高表达(P<0.05);血管软化丸含药血清调低IL-1β、iNOS、Ciita表达(P<0.05),调高Ym1、Fizz1表达水平(P<0.05);能够改善细胞分泌炎性因子IFN-γ和IL-10相关水平(P<0.05);血管软化丸含药血清调低TLR9蛋白和TLR3蛋白表达水平(P<0.05);血管软化丸含药血清调低TLR9下游信号MyD88、p-NF-κB、IRF7 mRNA表达水平(P<0.05);血管软化丸含药血清调低TLR3下游信号LC3Ⅱ、Beclin、Akt、mTOR mRNA表达水平(P<0.05)。结论:血管软化丸通过影响TLR9,调控下游NF-κB和IRF7信号途径,进而调节巨噬细胞M2/M1平衡;通过调控TLR3影响PI3K/Akt/mTOR信号通路,进而调节巨噬细胞自噬,抑制动脉粥样硬化的发生发展。

基于miR-33a调控ABCA1表达探讨血管软化丸抗动脉粥样硬化的作用机制

目的:通过观察血管软化丸是否通过调控miR-33a,进而影响下游信号ABCA1的表达,促进巨噬细胞内胆固醇流出,研究血管软化丸抗动脉粥样硬化的作用机制。方法:通过病理学检测观察血管软化丸对动脉粥样硬化的影响,通过体外实验建立THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞,然后用血管软化丸含药血清处理,Real-Time PCR技术检测细胞miR-33a表达。细胞随机分为空白对照组、血管软化丸含药血清处理组、血管软化丸含药血清+miR-33a mimic处理组,RT-PCR和Western blotting法检测细胞ABCA1 mRNA和蛋白表达,油红O染色和高效液相色谱法检测细胞内脂质含量,[3H]法检测细胞内胆固醇流出。结果:体内实验显示,各中药组血管各层结构正常,排列整齐,局部有小灶性的钙化颗粒物沉积,病变轻,斑块小,泡沫细胞和脂质减少,弹力板基本完整,病变程度明显低于空白对照组。与空白对照组相比,血管软化丸高、中、低三个剂量组小鼠主动脉的miR-33a表达量降低、ABCA1基因和蛋白相对表达量均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。体外实验显示,在不影响细胞活性状况下,血管软化丸含药血清呈浓度和时间依赖性下调miRNA33a表达;血管软化丸含药血清能明显上调ABCA1 mRNA和蛋白的表达,但能被转染miRNA33mimic抑制;血管软化丸含药血清可减少THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞中的脂质蓄积,但能被细胞中转染miRNA33 mimic所弱化;EGCG减少细胞内胆固醇蓄积是与其促进细胞内胆固醇流出有关,细胞中转入过量miRNA33a可以抑制胆固醇流出。结论:血管软化丸可通过减少miRNA33a的生成,进而上调ABCA1表达,促进巨噬细胞中胆固醇流出,这可能是血管软化丸抗动脉粥样硬化作用的分子机制之一。

基于TLR9介导巨噬细胞极化效应探讨血管软化丸抗动脉粥样硬化的作用机制

目的:观察血管软化丸通过对TLR9调控,影响其TLR9下游信号NF-κB和IRF7水平,以及对巨噬细胞(M2/M1)极化平衡状态的影响,研究血管软化丸抗动脉粥样硬化的作用机制。方法:体外实验将巨噬细胞随机分为5组,即对照组(空白血清),血管软化丸中剂量组,血管软化丸高剂量组,IRS组(TLR9拮抗剂:IRS869),ODN组(激动剂:ODN1826)。体内实验将Apo E-/-小鼠分为5组,即对照组(生理盐水,灌胃),IRS组(IRS869,腹腔注射),ODN组(ODN1826,腹腔注射),血管软化丸中剂量组(浓度为1.728 g/m L),血管软化丸高剂量组(浓度为3.456 g/m L)。腹腔注射每周2次,灌胃每日1次,连续给药8周后取材进行检测。采用Western Blot法检测各组细胞TLR9的蛋白含量,主动脉TLR9及其下游分子My D88,p-NF-κB和IRF7的蛋白含量;采用流式细胞术和免疫化学荧光检测各组细胞M1型和M2型的比例;采用RT-PCR和ELISA法检测各组细胞TNF-α的表达;采用RT-PCR法和免疫荧光检测RAW264.7细胞和动脉斑块的M1型和M2型巨噬细胞的相关标志性因子和炎症因子;病理学检测验证血管软化丸抗动脉粥样硬化的疗效。结果:与对照组RAW264.7细胞相比,各中药组和IRS组TLR9蛋白表达量明显下降(P<0.05),ODN组TLR9蛋白表达量明显升高(P<0.05)。与对照组相比,各中药组和IRS组动脉斑块的TLR9、My D88、p-NF-κB和IRF7蛋白表达水平均明显较低(P<0.05)。与对照组相比,ODN组M1型巨噬细胞比例相对增加,各中药组和IRS组M2型比例相对增加,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,各中药组和IRS组动脉斑块中i NOS的荧光密度低表达,而CD206的荧光密度为高表达。与对照组相比,各中药组和IRS组斑块形成和面积相对较少(P<0.05)。在RAW264.7细胞实验中,中药组和IRS可逆转ODN1826引起的TNF-α的升高,使其降低(P<0.05)。与对照组比较,各中药组和IRS组斑块形成和面积相对较少(P<0.05)。结论:血管软化丸和TLR9的拮抗剂IRS869可抑制TLR9的表达,阻止其下游NF-κB和IRF7信号途径的激活,同时改变巨噬细胞极化状态(M2/M1)的平衡使其向M2型方向倾斜,能够使Apo E-/-小鼠斑块面积及其斑块易损性减小。

王立忠教授治疗中风后遗症经验

王老认为中风后遗症是由于患者脏腑功能失调,或气血素虚加之劳倦内伤、忧思恼怒、饮酒饱食、用力过度,而致瘀血阻滞、痰热内蕴,或阳化风动、血随气逆,导致脑脉痹阻或血溢脑脉之外,从而引发此病。本病多为本虚标实,其虚多为肝肾阴虚、脾气内虚,其实多为痰瘀内结、热极生风。由于发病的性质不同,且每多兼证,临床应根据病情,辨证论治。常见分型的辨治方法有以下几种:气虚血瘀证宜益气活血、化瘀通络,方药选用自拟益气活血复原汤加减;风痰瘀阻证宜熄风化痰、通络开窍,方药选用自拟熄风化痰开窍汤加减;痰热腑实证宜祛热熄风、化痰通腑,方药选用自拟活血涤痰承气汤加减;肝肾阴虚证宜补益肝肾,滋阴熄风,方药选用自拟醒脑解语通络汤加减。此外,中风后遗症不仅有偏侧肢体不利、言语不利等主症,还常伴有肿胀、痹证、不寐等并发症,中风并发症轻则给患者带来痛苦,延缓康复进程,重则发病突然,危及生命。因此,应早期预防,早期干预。