商业信用环境与企业流动性风险的影响研究

随着中国经济迈入新时代,如何防范重大金融风险是当前促进经济高质量发展的重要话题。当前,企业高杠杆率下蕴藏着期限结构不匹配的严峻问题,带来了潜在的流动性风险。本文基于商业信用环境的视角,从理论上总结分析了商业信用环境通过缓解融资约束和降低交易成本对企业流动性风险产生影响的逻辑关系,并提出相应的政策建议,为进一步完善社会信用体系建设、降低企业风险提供理论依据。

人骨髓间充质干细胞向神经细胞分化过程中Notch通路信号分子表达的变化

本研究探讨Notch信号通路在人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)体外增殖及向神经细胞分化过程中的作用。采集健康自愿者骨髓,体外培养获得hMSCs,取第3代hMSCs,在诱导剂(β-ME,DMSO,BHA)作用下向神经细胞分化。诱导后用免疫细胞化学鉴定神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)和尼氏体的表达以确定诱导效果;用流式细胞术检测细胞生长周期时相的变化。在诱导前后,用免疫荧光和RT-PCR方法检测Notch通路中Notch1受体蛋白、配体Jagged1(JAG1)、调节蛋白活化相关物早老素1(presenilin1,PS1)、靶基因hairy and enhancer of split1 (HES1)信号分子表达的变化。结果显示:诱导前,处于G0/G1期的hMSCs占58.5%,S+G2/M期的细胞占41.5%;诱导后,G0/G1期细胞比例升高,而S+G2/M期细胞比例下降,NSE阳性细胞率达(77±0.35)%,细胞质中可见深蓝色的块状或颗粒状尼氏体。免疫荧光显示,诱导前后hMSCs内Notch1和JAG1均呈阳性表达,但RT-PCR检测发现诱导后Notch1、JAG1、PS1和HES1mRNA表达量较诱导前明显降低(均P<0.05)。结果表明,诱导hMSCs向神经细胞分化能抑制Notch信号分子表达,低水平的Notch信号激活可能有利于神经细胞的分化。

细胞因子诱导人脐血间充质干细胞分化过程中细胞巢蛋白、神经丝亚单位和端粒酶逆转录酶mRNA的表达

目的:观察细胞因子EGF和bFGF联合诱导人脐血间充质干细胞(MSCs)向神经细胞分化过程中细胞 巢蛋白(nestin)、神经丝亚单位M(NF M)和端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的变化。方法:采集健康自然分娩产 妇脐血,密度梯度离心分离单个核细胞(MNCs),PBS洗涤2次后重悬于含体积分数20%胎牛血清的DMEM/F12 中,接种于T 75培养瓶内(细胞密度为1×106ml-1),一组加入细胞因子EGF和bFGF,终浓度各为10μg/L,另一 组不加细胞因子,剩余细胞用液氮冻存。培养24h倾去全部液体以除去未贴壁细胞,以后每3d全量换液1次,倒 置显微镜下观察细胞形态。分别收集培养1d、4d、7d、14d贴壁细胞和冻存细胞,采用RT -PCR方法检测nestin、 NF M、hTERTmRNA的表达。结果:未培养的脐血MNCs(内含MSCs)nestin、NF M、hTERTmRNA均表达阳性。培 养后nestin、hTERTmRNA表达下降,至第7d已不能检出;而NF MmRNA的表达随培养时间延长而增强。与对照 组相比,细胞因子组NF MmRNA表达较高,nestin、hTERTmRNA表达的下降趋势延迟。结论:细胞因子EGF和 bFGF在联合诱导脐血MSCs分化为神经细胞的过程中,能下调hTERTmRNA的表达。

脐血单个核细胞培养前后神经细胞特有标志物的变化

目的 :探讨脐血单个核细胞培养前后神经细胞特有标志物的表达差异。方法 :采用RT PCR方法对脐血单个核细胞培养前后nestin ,神经丝亚单位M(NF M)及微管相关蛋白 2 (MAP2mRNA)的表达进行检测。结果 :nestin ,NF M及MAP2mRNA在培养前的脐血单个核细胞中表达呈阳性 ,培养后 3者表达增强。结论 :直接分离的脐血单个核细胞中存在着表达神经细胞特有分子的细胞 ,培养后 。

川芎嗪在促进大鼠结肠上皮细胞Cl^-和HCO_3^-分泌中的作用

目的 :探讨川芎嗪对大鼠结肠上皮水、电解质转运的影响和内在的机制。方法 :在药物和特异性通道阻断剂的作用下 ,用短路电流 (Isc)技术 ,体外测量结肠上皮短路电流的变化。结果 :离体大鼠远端结肠 ,在基础状态下的跨上皮电位差 (PD)和Isc分别为 (- 5 .5± 0 .8)mV (n =8) (黏膜面为负 )和 (6 0 .3± 6 .7) μA/cm2 (n =1 6 ) ,Rt 为(94 .9± 5 .9)Ω·cm2 。在结肠上皮的基底膜加入川芎嗪 (0 .0 1～ 5mmol/L) ,能记录到一个呈剂量依赖性升高的短路电流 ,EC50 为 0 .5mmol/L (n =1 6 ) ;将Cl-或HCO3 -从溶液中替换 ,分别抑制了该电流的 5 8.4 % (n =5 ,P <0 .0 1 )和70 .8% (n =4 ,P <0 .0 1 ) ,2种离子都被替换时 ,该电流减少了 98.1 % (n =6 ,P <0 .0 0 1 ) ;川芎嗪在结肠上皮产生的短路电流能被顶膜Cl-通道阻断剂DPC(2mmol/L) (一种非选择性的Cl-通道阻断剂 )和glibenclamide(1mmol/L) [囊性纤维变性跨膜电导调节器 (CFTR)的特异性阻断剂 ]完全阻断 ,但对DIDS(1 0 0mmol/L) [Ca2 + 激活的Cl-通道(CaCC)阻断剂 ]不敏感 ;在结肠上皮的顶膜加入Na+ 通道阻断剂amiloride(1 0mmol/L)或将Na+ 从顶膜侧的溶液中替换 ,不影响随后川芎嗪产生的短路电流 ;将Na+ 从结肠上皮基底膜侧的溶液中替换或从顶膜和基底膜?

川芎嗪增加大鼠远端结肠阴离子分泌的基侧膜机制(英文)

本研究用短路电流技术来观察在川芎嗪作用下,电解质在大鼠远端结肠上皮细胞的转运及其细胞机制。在新鲜分离的结肠上皮的基侧膜加入川芎嗪,能产生较大的短路电流。用粘膜下神经元阻断剂——河豚毒素预作用于结肠上皮,不影响随后的川芎嗪所产生的短路电流,前列腺素合成抑制剂indomethacin预作用可使随后的川芎嗪产生的短路电流减少55.2％。在结肠上皮的顶膜加入C1-通道阻断剂。DPC和glibenclamide,能完全阻断川芎嗪产生的短路电流。Bumetanide,基侧膜钠、钾、氯共转运体阻断剂能抑制川芎嗪引起的短路电流的85.2％,而结肠上皮细胞基侧膜的非选择性钾通道阻断剂Ba2+能阻断90％以上的短路电流,说明基侧膜的钠、钾、氯共转运体和钾通道在川芎嗪引起的短路电流中起着重要的作用。上述结果表明,川芎嗪刺激大鼠远端结肠上皮细胞分泌C1-是通过上皮细胞顶膜C1-通道和基侧膜的钠、钾、氯共转体和K+通道介导的。

体外诱导人骨髓间充质干细胞分化为多巴胺能神经元

骨髓间充质干细胞(BMSCs)是存在于骨髓中的非造血干细胞,在体外一定条件下可向神经细胞分化。本实验通过密度梯度离心获取人骨髓中的单个核细胞,贴壁培养纯化BMSCs,并用脑源性神经营养因子(BDNF)、forskolin(FSK)和多巴胺(DA)联合对BMSCs进行诱导,电子显微镜观察诱导后细胞是否具有成熟神经元的超微结构特点;免疫细胞化学和RT-PCR检测DA能神经元分化过程中的标志物酪氨酸羟化酶(TH)的表达以及转录因子Nurr1、Ptx3、和Lmx1b的表达。结果显示:诱导2周后,电镜下可见细胞浆中有大量密集的呈扁平囊状的粗面内质网及其间的一些游离核糖体,以及神经丝。RT-PCR结果显示NSE(neuron specific enolase)、Nurr1、Ptx3、Lmx1b和TH的mRNA均有表达;免疫细胞化学表明诱导2周后TH阳性细胞的表达较诱导3d后明显提高。上述结果表明BDNF、FSK和DA可以在体外诱导人BMSCs定向分化为DA能神经元。

脐血单个核细胞在半固体培养基中向神经元样细胞的分化

为观察脐血单个核细胞在甲基纤维素半固体培养基中的生长情况 ,常规方法分离脐血单个核细胞 ,接种于含 SCF、GM-CSF、G-CSF、IL-3、IL-6、EPO的甲基纤维素半固体培养基中培养。第 5 d发现有 6～ 10个细胞组成的小集簇 ,散在分布 ,细胞形态无变化。第 11d有神经元样细胞生长 ,与集簇并存。以后神经元样细胞逐渐生长 ,但集簇生长停滞 ,第 16d仍未发现集落形成。收集细胞 ,进行神经元特异烯醇化酶 (NSE)、神经丝蛋白 (NF)免疫细胞化学测定 ,显示少量神经元样细胞 NSE、NF阳性。该结果提示在半固体培养基中 ,脐血单个核细胞可向神经元样细胞分化 。

兔食管和结肠上皮对水、电解质转运的差异

目的 :探讨兔食管和远端结肠上皮对水、电解质转运的差异。方法 :在药物和特异性通道阻断剂的作用下 ,用短路电流技术 ,体外测量两类上皮基本电参数的改变。结果 :远端结肠上皮的短路电流显著高于食管上皮 ;在食管上皮的顶膜加入amiloride ,短路电流从基础状态下的 (17.4± 2 .2 ) μA/cm2 (n =15 )减少到 (7.5± 1.7) μA/cm2 (n =13) ,P <0 .0 0 1。在基侧膜加入Ba2 + ,短路电流从基础状态减少到 (13.5± 0 .3) μA/cm2 (n =4 ) ,P <0 .0 5 ;在结肠上皮的顶膜加入Diphenylamine 2 ,2’ dicarboxylicacid (DPC) ,短路电流从 (119.7± 19.0 ) μA/cm2 (n =8)减少到 (4 9.8± 15 .5 ) μA/cm2 (n =5 ) ,P <0 .0 0 1;indomethacin和TTX不改变食管上皮的基础电参数 ,却使结肠上皮的短路电流从基础状态减少到 (71.1± 11.1) μA/cm2 (n =4 ) ,P <0 .0 0 5。结论 :与相对疏漏、具有较低电阻的远端结肠相比 ,食管是具有较高电阻的紧密上皮 ;在稳定的基础状态下 ,钠离子吸收和氯离子分泌分别是构成食管上皮和结肠上皮的跨上皮电压和短路电流的主要原因 ;钾通道分布在食管上皮的基侧膜 ,在基础条件下处于开放状态 ;粘膜下神经丛和前列腺素的作用不参与构成食管上皮的基础电流 。

大鼠海马神经干细胞体外培养分化过程中钾电流的变化

目的:探讨新生大鼠海马神经干细胞体外培养分化后的神经元样细胞钾电流的变化。方法:神经干细胞体外扩增培养并传代后,撤除有丝分裂原并加血清诱导分化,应用全细胞电压钳技术检测分化后培养1d、7d、14d、21d细胞的电压依赖性钾电流。结果:分化后培养1d的细胞,未检测出钾电流;分化后培养7d、14d、21d的细胞,在+50mV电压水平下的钾电流幅值分别为(18.077±2.789)pA/pF,(13.099±2.742)pA/pF,(34.045±8.067)pA/pF。该电流为两种电流的混合,分别能被TEA和4-AP所阻断,可能为缓慢失活的延迟整流钾电流(IK)和快速失活的瞬时外向钾电流(IA)。结论:新生大鼠海马神经干细胞诱导分化后,随着体外培养时间的延长,钾离子通道的功能逐渐成熟。

神经细胞特有分子在人脐血细胞中的表达

目的 :探讨神经细胞相关标志物nestin ,NF M及MAP2mRNA在脐血细胞中的表达情况。方法 :采用RT PCR方法对脐血单个核细胞进行检测。结果 :nestin ,NF M及MAP2mRNA表达在脐血单个核细胞中呈阳性。结论

脐血单个核细胞培养前后神经细胞特有标志物的变化(英文)

背景:目前神经干细胞(NeuralStemCells,NSCs)的来源仅限于胚胎,因此寻找一种新的NSCs的来源对于神经科学领域基础与应用研究的发展至关重要,而脐血中资源丰富。目的:探讨脐血单个核细胞培养前后神经细胞特有标志物的表达差异。地点与材料:研究地点为郑州大学医学院干细胞研究中心。材料为用肝素抗凝采血袋从郑州大学第一附属医院及第三附属医院产科无菌收集健康产妇足月孕娠顺产或剖宫产的婴儿脐带血50～100mL,充分混匀后,置保温盒中带回实验室。设计与方法:采用RT-PCR方法对脐血单个核细胞培养前后nestin,NF-M及MAP2mRNA的表达进行检测。主要观察指标:脐血单个核细胞培养前后nestin,NF-M和MAP2mRNA的表达。结果:nestin,NF-M及MAP2mRNA在培养前后的脐血单个核细胞中表达呈阳性;同未培养的脐血单个核细胞相比,nestin,NF-M及MAP2mRNA在培养的脐血单个核细胞表达增强。结论:在直接分离的脐血单个核细胞中存在着神经(干)细胞;培养后,神经元样细胞增多,nestin,NF-M及MAP2mRNA表达增强。

川芎嗪对新生大鼠离体胰岛分泌胰岛素的影响

目的 :观察川芎嗪对新生大鼠离体胰岛胰岛素分泌的影响并探讨其作用途径。方法 :利用放射免疫技术 ,分别测定不同浓度川芎嗪处理组 ,川芎嗪处理不同时间组及不同浓度维拉帕米与川芎嗪共同处理组培养的大鼠离体胰岛的基础胰岛素分泌量和高糖刺激的胰岛素分泌量。结果 :①川芎嗪 1 .0mmol/L、2 .0mmol/L、4 .0mmol/L作用于胰岛 2 4h ,其基础胰岛素分泌量明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,作用呈剂量依赖性 ,而高糖刺激的胰岛素分泌量无明显改变 (P >0 .0 5 ) ;②川芎嗪 1 .0mmol/L分别作用于胰岛 1 2h、2 4h、36h后 ,基础胰岛素分泌量高于对照组(P <0 .0 5 ) ,呈一定的时间依赖性 ;③维拉帕米 2 5 μg/L、5 0 μg/L、1 0 0 μg/L与 2 .0mmol/L川芎嗪联合作用后基础胰岛素分泌量低于对照组 (P <0 .0 5 ) ,且呈剂量依赖性。结论 :川芎嗪能促进离体培养大鼠胰岛基础胰岛素分泌 。

UniCel DxH推染片一体机染色条件的设置及效果评价

目的探索UniCel DxH推染片一体机的最佳染色条件,并对染色效果进行评价。方法通过改变瑞氏-吉姆萨复合染液的染色时间、染液配比等方法获取推染片一体机的最佳染色条件,在显微镜下观察并评价不同方法制备的血涂片的染色效果。结果延长缓冲液的染色时间可增强血涂片的着色效果,再在缓冲液中加入5%-10%的染液后可进一步提高血涂片的染色效率,且对于血细胞形态的识别可以达到手工制片染色的效果。结论在适宜的染色条件下,UniCel DxH制备的血涂片基本可以达到与手工染色相同的效果,对血细胞异常形态的识别较准确,各实验室应建立适宜的最佳染色方案。

中国农产品反倾销会计理论探讨

中国是农业大国,但还远非农业强国。我国农产品出口面临各种类似"倾销"指控的贸易壁垒。目前,国内对反倾销的研究更多是从国际贸易、国际商法等宏观视角来考察,对农产品反倾销会计等微观问题的研究还存在许多不完善的地方。对中国农产品反倾销会计的基本理论作初步探讨,旨在为中国农产品反倾销问题的顺利解决作出微薄的贡献。

兔骨髓间充质干细胞向神经元的诱导分化

目的 :探讨兔骨髓间充质干细胞 (bonemarrowmesenchymalstemcells ,BM -MSCs)向神经元定向诱导分化及分化前后体外培养的条件。方法 :无菌条件下收集兔股骨骨髓 ,用相对密度为 1 0 77的淋巴细胞分离液分离出白膜层细胞群 ,贴壁法筛检其中的MSCs ,用DMEM H条件培养基进行原代及传代培养。分别取 5和 10代的MSCs向神经元定向诱导。诱导后更换为神经培养基继续培养 ,并在 1～ 2 0d用免疫细胞化学方法检测分化细胞的特异性表面标志。结果 :兔骨髓MSCs在DMEM H条件培养基中建立高纯度的细胞培养 ,能够稳定地连续传代达 10代以上。不同代数的MSCs诱导后均表达巢蛋白 (nestin)和神经特异性烯醇化酶 (neuron specificenolase ,NSE)。诱导后NSCs在神经培养基中继续存活 2 0d以上 ,但未见扩增。结论 :兔骨髓MSCs能够诱导表达神经元特异性标志 ,且诱导前后的MSCs均可在体外培养条件下存活。

中国省际粮食贸易中的虚拟水生态补偿——基于粮食净调出省(区)数据

2005年以来国家陆续实施了以种粮直补为主的4项补贴及产粮大县补贴,有效地调动了农民发展粮食生产的积极性。但是随着补贴激励效应的逐渐降低,抛荒、两季变一季等现象陆续出现,客观上要求出台进一步的粮食生产促进政策来有效改善这种状况。通过国内粮食贸易中的虚拟水流动来计算所产生的生态补偿金额,旨在以此为手段补偿粮食净调出省(区)因为发展粮食生产产生的成本,通过中央层面及粮食净调入省(区)多方筹集的方式实现补偿金的转移支付,改善粮食净调出省(区)农业生产基础条件,促进粮食的稳产、增产,最终实现保障国家粮食安全的目标。

王瑞平辨治胰腺癌经验探讨

胰腺癌是难治性消化系恶性肿瘤,具有早期确诊率低、恶性程度高的特点,中医药在胰腺癌综合治疗中处于重要地位。王瑞平老师从多年临床经验中总结出胰腺癌“脾虚肝郁”的核心病机,治疗上强调以健脾为第一要义,以肝脾同调为基本治则,并针对关键病理因素如湿、痰、瘀、毒建立化湿泄浊、化痰散结、化瘀消癥、抗癌解毒等具体治法。同时王老师认为辨治胰腺癌须在分期论治的基础上动态辨明患者整体正邪盛衰,将辨病论治与辨证论治有机结合,融入“孟河医派”学术思想,形成了个体诊疗、动态调治、用药醇正、和缓图之的诊疗特色,临床上取得良好疗效。现从病因病机、治法治则,处方特色等方面总结梳理了王瑞平教授临床治疗胰腺癌的经验,以期指导临床实践,为临床上治疗该病开拓新思路。

农产品价格炒作形成原因及预防措施研究

农产品作为居民基本生活必需品,关系到千家万户的利益。我国农产品价格长期保持在低位运行,因此从2009年下半年开始的农产品价格过快上涨引起了各界的普遍关注,对于农产品价格炒作及预防措施的研究也已经提上了议事日程。运用了分品种价格对比方法,报告了农产品价格过快上涨的现状,指出农产品市场存在价格炒作,对农产品价格炒作的形成原因及预防措施进行了初步研究,旨在从根本上杜绝农产品价格炒作的发生,切实保护消费者及种植户的根本利益。

粮食生产合作社外部效率评价体系构建研究

运用层次分析方法和模糊综合评价方法,选择经济价值增加、社会价值增加、生态价值增加、文化价值增加一级指标及其他若干等二级指标共同构建粮食生产合作社外部效率评价指标体系。结合实地调研数据,计算出粮食生产合作社的外部效率评价值,由于国内外目前并没有相对成形的合作社外部效率计算方法,因此选择了主观性较强的层次分析法进行尝试性探索,并提出了今后完善的建议。