趋化因子2促进肝再生中脂肪的形成

目的探讨趋化因子2(CCL2)对肝再生的影响以及作用机制。方法大鼠随机分为3组,每组10只。液压转基因技术将质粒转入大鼠体内,6 h后荧光显微镜下观察转染效率。称量再生肝重量,计算肝再生率和肝脏指数以观察肝脏再生情况。测量血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)与总胆红素(TBIL)的含量以评估肝脏功能情况。苏丹Ⅳ染色观测脂肪聚积情况。Real-time PCR检测脂肪代谢相关基因的表达。Western blotting检测磷酸化丝裂原细胞外激酶1/2(p-MEK1/2)和磷酸化细胞外信号调节激酶l/2(p-ERKl/2)的表达情况。结果转质粒后6 h各组绿色荧光蛋白表达量均大于30%。p EGFP-N1-CCL2转染组肝再生率、肝脏指数、ALT、AST和TBIL含量均高于p EGFP-N1组。随转基因时间延长,脂肪代谢相关基因表达量增加,有较多猩红色脂肪滴出现,pMEK1/2和p-ERKl/2表达量增多。结论趋化因子2可能通过MEK/ERK通路增加脂肪合成,促进肝脏再生。

CC趋化因子配体2与肝疾病

近年来CC趋化因子配体2(chemokine(C-C motif)ligand 2,CCL2)在肝脏疾病发病机制中的作用越来越受到重视.大量研究表明,CCL2在各种肝损伤中表达上调.CCL2是炎症反应的主要调节因子,通过与其受体CCR2相互作用,使血液中的单核细胞穿过血管内皮向炎症部位迁移.白色脂肪组织分泌的CCL2能直接诱导肝细胞的脂肪聚集,与非酒精性肝病的发病机理密切相关.肝实质细胞分泌的CCL2能激活并募集肝星形细胞,参与肝纤维化甚至肝硬化的形成.CCL2能介导肝癌细胞的转移和浸润,刺激肿瘤血管生成,其与肿瘤的关系也成为研究的热点.本文将阐述CCL2与病毒性肝炎、酒精性肝炎、非酒精性脂肪性肝炎、肝纤维化、肝硬化和肝癌的研究进展.

干细胞外泌体减轻肝缺血再灌注损伤的研究进展

肝缺血再灌注损伤(HIRI)是肝脏在血流供应减少或者血流被阻断一定时间后恢复血供时引起的损伤,也是肝移植术和肝脏肿瘤切除术后常见的并发症,该过程会显著增加移植免疫排斥与感染导致的肝功能损伤的风险,因此,如何缓解HIRI亟待解决。外泌体(exosomes,Exo)是许多细胞都可以分泌的一种微小囊泡,具有诸多特性,可以作为细胞间进行沟通的一种媒介。间充质、骨髓干细胞来源的外泌体因具有抗炎和抗凋亡等作用,使得器官缺血再灌注损伤的缓解和修复成为了可能,因此具有一定潜在的临床应用价值。

CCL2促进肝再生中细胞外基质的形成

为阐明CC趋化因子配体2〔chemokine(C-C motif)ligand 2,CCL2〕对肝再生(liverregeneration,LR)的影响,构建CCL2的表达载体CCL2-N1及其干涉载体CCL2(255).为确定合适的转基因时间,观测内外源性CCL2的表达高峰.Rat Genome 230 2.0芯片、实时定量PCR和Western印迹显示,内源性CCL2的表达高峰在部分肝切除(partial hepatectomy,PH)后72 h.与CCL2融合表达的绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的表达和实时定量PCR显示,外源性CCL2的表达高峰在转基因后的24 h.所以,为使内源性和外源性CCL2的作用叠加,选择PH后48 h进行转基因.此时将CCL2-N1质粒转入大鼠体内,发现转基因后大鼠肝系数、增殖细胞核抗原(PCNA)表达量显著高于对照,透明质酸和层粘连蛋白含量显著升高.相反,干涉质粒CCL2(255)能降低肝系数,减少PCNA表达量,并且Ⅲ型前胶原肽、Ⅳ型胶原、透明质酸和层粘连蛋白含量与对照相比,有显著或极显著降低.综上所述,CCL2是肝再生相关基因,它能提高肝系数,可能通过调节细胞外基质(extracellular matrix,ECM)合成而促进肝脏再生.

AKT、ATM、D4-GDI和p53 4条细胞凋亡通路基因在大鼠肝再生过程中的表达变化

目的探讨AKT、ATM、D4-GDI和p53 4条细胞凋亡通路基因在肝再生(LR)过程中的表达变化。方法将大鼠随机分为实验组和对照组,每组6只,雌雄各半,用Rat Genome 230 2.0芯片检测大鼠部分肝切除(PH)后不同恢复时间点4条细胞凋亡通路基因表达情况,并用生物信息学方法对其进行分析。结果 AKT、ATM、D4-GDI和p53 4条细胞凋亡通路中63、8、6和7个基因与肝再生相关。它们主要在肝再生启动阶段起始表达。表达的相似性分为均上调、上调占优势、均下调、下调占优势、上调和下调相近等5类,大多数基因表达加强,少数基因表达降低。它们表达的时间相关性分为11组。基因协同作用模型(Et)分析表明,AKT通路几乎在整个肝再生中抑制细胞凋亡;ATM、D4-GDI和p53 3条细胞凋亡通路几乎在整个肝再生中促进细胞凋亡。结论 AKT、ATM、D4-GDI和p53 4条细胞凋亡通路与再生肝生长、发育和肝量控制密切相关。

血清对脐带间充质干细胞体外培养的影响

目的探讨血清对脐带间充质干细胞体外培养的影响。方法将人脐带间充质干细胞分别培养在不含血清、含灭活血清和含未灭活血清的低糖达尔伯克改良伊格尔培养基(L-DMEM)中。每天用显微镜观察脐带间充质干细胞在3种培养基中的生长情况,并计算细胞总数、统计细胞成活率。结果脐带间充质干细胞在含未灭活血清的L-DMEM中生长状况最好,在不含血清的L-DMEM中生长状况最差。结论含未灭活血清的L-DMEM是脐带间充质干细胞体外培养的最佳培养基。

细胞分裂相关基因Spc25的分子进化研究

采用生物信息学手段分析代表真菌、无脊椎动物和脊椎动物共16种生物Spc25基因的分子进化情况。结果表明,Spc25是一个较为保守的基因,在动物-微管的连接中发挥了重要作用。该研究为进一步研究该基因参与染色体分离和肿瘤发生的作用机理提供资料。

细胞分裂相关基因Ndc80的分子进化研究

多数肿瘤细胞都表现出染色体的不稳定。有丝分裂过程中动粒—微管是否正确结合与染色体的稳定性有重要关系。Ndc80复合体由Ndc80,Nuf2,Spc24和Spc25组成,它们在动粒—微管的结合中发挥着关键作用。本文采用生物信息学手段分析代表真菌、无脊椎动物和脊椎动物的共16种生物的Ndc80基因的分子进化情况。结果表明:从真菌到脊椎动物,Ndc80基因的开放阅读框变化都比较小,大部分生物有以TGA作为终止密码子的倾向,Ndc80基因外显子有从少到多的过程,最后趋于有17个外显子;哺乳动物间氨基酸序列高度同源,全长都比较保守。研究结果提示Ndc80是一个较为保守的基因,在动粒—微管的连接中发挥了重要作用,它的稳定表达对染色体的稳定性和抑制肿瘤发生起着关键作用。

GZMA、GZMB、TSP-1、TLR和IL-15条细胞凋亡通路基因在肝再生中的表达变化

目的探讨颗粒酶A(GZMA)、颗粒酶B(GZMB)、血小板反应蛋白-1(TSP-1)、Toll样受体(TLR)和白细胞介素-1(IL-1)5条细胞凋亡通路基因在肝再生(LR)过程中的表达变化。方法大鼠随机分为33组,每组6只,用Rat Genome 230 2.0芯片检测大鼠部分肝切除(PH)后不同恢复时间点5条细胞凋亡通路基因的表达情况,采用Real-time PCR和Western blotting技术对芯片结果进行验证,并用生物信息学方法对凋亡通路基因在肝再生中的表达变化进行分析。结果 Real-time PCR和Western blotting均与Rat Genome 230 2.0芯片的检测结果趋势一致;GZMA、GZMB、TSP-1、TLR和IL-1 5条细胞凋亡通路中9、8、24、31和34个基因与肝再生相关。它们主要在肝再生启动阶段起始表达,在细胞增殖阶段表达的基因数最多。表达的相似性分为均上调、上调占优势、均下调、下调占优势、上调和下调相近等5类,大多数基因表达加强,少数基因表达降低。它们表达的时间相关性分为13组。基因协同作用模型(Et)分析表明,GZMA介导的细胞凋亡通路在肝再生后期促进细胞凋亡;TLR介导的细胞凋亡通路几乎均在整个肝再生中促进细胞凋亡;GZMB、TSP-1和IL-1介导的细胞凋亡通路可能在肝再生中不发挥细胞凋亡作用。结论 GZMA和TLR两条通路调控肝再生中的细胞凋亡。

医学遗传与优生课堂教学模式探讨

医学遗传与优生的传统教学模式不注重培养学生的学习兴趣,无法调动学生的学习主动性。本文基于课程自身特点及内容,结合教学实践,探讨课堂教学模式改革,以提高教学效果和质量,培养出合格的医学人才。

一种快速筛选有效RNAi片段的方法

目的:介绍一种快速筛选有效RNAi片段的方法。方法:构建CC趋化因子配体2(chemokine(C-C motif)ligand 2,CCL2)的表达载体、干涉载体和检验载体;计算检验载体的绿色荧光蛋白(GFP)阳性细胞率;Real-time PCR检测干涉载体的干涉效果;计算PH72h和168h转基因大鼠的肝再生率。结果:检验载体及其对照在24h表达GFP的细胞数最多,其中检验载体CCL2-CCL2(255)在各时间点的表达量均最低;Real-time PCR结果显示干涉载体CCL2(255)干涉效果较好;表达载体CCL2-N1能提高转基因大鼠PH168h的肝再生率,达105%,而干涉载体CCL2(255)仅78%,与对照均有显著差异。结论:将靶基因和干涉片段构建到同一个载体上,通过观察、计算GFP的表达量可快速筛选有效RNAi片段,此法高效经济、省时省力。

谈课程思政促进新时代大学生就业

针对目前大学生就业竞争越来越激烈、传统的职业生涯规划课程指导无法完全满足新时代发展要求的情况,分析了目前课程思政主要存在着专业课教师政治站位有待提升,课堂中育人意识欠缺、思政元素挖掘程度不足、课程思政和专业课讲授融合欠佳等问题。因此提出通过借助课程思政教学体系,找准专业课程与思政课程的共同方向,形成协同效应;并让有课程思政实力的专业课教师引导学生树立正确的就业价值观,实现学生各方面素质的提升,促进大学生就业,提高就业质量。

液压转基因技术

外源基因靶向进入动物体内并高效表达是研究基因功能和进行基因治疗的基础。近几年建立的液压转基因技术能简便、快速、安全、高效地将质粒靶向导入动物体内,并能在靶部位高效、稳定表达。本文介绍了液压转基因技术概念、机制及其应用等。

急性肝损伤大鼠肝组织Caspase-3和Caspase-8的表达及其相关性研究

目的观察银杏叶提取物(GBE)对硫代乙酰胺(TAA)所致肝损伤大鼠的肝脏保护作用及其对肝组织Caspase-3、Caspase-8表达的影响。方法将70只Wistar大鼠随机分为正常对照组(n=10)、模型组(n=15)及GBE组(n=45),GBE组再分为GBE低剂量组(n=15)、GBE中剂量组(n=15)及GBE高剂量组(n=15)。GBE低、中、高剂量组大鼠分别灌服GBE 50、100、200mg/kg,1次/d,连续30d;正常对照组及模型组大鼠灌服生理盐水。模型组及GBE低、中、高剂量组大鼠于灌服第28天用TAA(300mg/kg)行腹腔注射,隔天注射1次,共3次;正常对照组大鼠腹腔注射生理盐水。所有大鼠均于末次注射后24、48、72h采血,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平。用逆转录PCR检测大鼠肝组织Caspase-3、Caspase-8mRNA的表达情况,并对Caspase-3、Caspase-8的活性进行检测。结果与正常对照组比较,模型组大鼠血清ALT、AST水平明显升高,肝组织Caspase-3、Caspase-8mRNA水平上调;而与模型组比较,GBE组大鼠血清ALT、AST水平明显降低,肝组织Caspase-3、Caspase-8mRNA水平下调。结论 GBE可通过调节Caspase-3、Caspase-8的表达抑制急性肝功能衰竭患者的肝细胞凋亡,从而对肝损伤发挥保护作用。

嗜酸乳杆菌的应用研究进展

嗜酸乳杆菌为革兰阳性的益生菌,属于乳杆菌属,研究表明其安全无毒、不转移细菌耐药性。嗜酸乳杆菌的临床应用广泛,用途主要包括:配合抗病原体药物治疗动物肠道细菌病或某些病毒病;提高饲料营养价值和动物源食品的营养价值;通过调节机体免疫系统、限制体内病原体的定植、调节代谢等,提高动物机体免疫力;治疗动物过敏性疾病;显著改善AD模型大鼠的空间记忆损伤,恢复动物神经系统功能;抗炎,缓解小鼠肠黏膜炎症损伤等。本文阐述了嗜酸乳杆菌的应用及其作用机制,并对其未来研究重点提出了建议,以期为嗜酸乳杆菌动物专用产品和制剂的研发提供参考,拓宽嗜酸乳杆菌的临床应用范围,延长其使用寿命。

肿瘤病死因子α与β基因多态性与寻常性银屑病的相关性研究

银屑病（psoriasis vulgar，PV）是一种临床常见的以红斑鳞屑为表现的慢性炎症性皮肤疾病，可分为4种临床类型：寻常性、关节病性、红皮病性和脓疱性，其中寻常性银屑病占99％以上。目前普遍认为，银屑病是在环境因素刺激下由遗传背景控制的免疫失衡性疾病，遗传流行病学和遗传学研究均证实，银屑病是一种多因子遗传模式的复杂疾病，它涉及到多个基因间的相互作用及基因与环境的交互作用。迄今为止，

银杏叶提取物对急性肝衰竭大鼠肝脏Caspase-8的影响

为了研究银杏叶提取物(GBE)对由硫代乙酰胺(TAA)所致肝损伤大鼠肝脏的保护作用及其对Cas-pase-8的影响,并探讨其作用机制。将大鼠分为5组,每组10只,GBE低、中、高剂量组(50、100、200mg/kg)连续灌服GBE 30 d,1次/d,正常对照组和模型组分别给予等体积的生理盐水;模型组、GBE低、中、高剂量组第28天用TAA(300 mg/kg)腹腔注射,正常对照组腹腔注射等体积的生理盐水。结果表明,模型组与正常对照组相比,血清中谷丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平升高,肝组织中Caspase-8在mRNA水平上调表达;而GBE组与模型组相比,血清中ALT、AST水平降低,肝组织中Caspase-8在mRNA水平下调表达。GBE可通过调节Caspase-8的表达抑制急性肝衰竭肝细胞凋亡,从而对肝脏起到保护作用。

黄芩的药理作用研究

黄芩是一种草本植物,具有较高的药用价值,临床中应用十分广泛。其性寒、味苦,具有抗菌、抗病毒、抗炎、抗变态反应、解热、镇痛等作用。总结分析黄芩的药理作用,为新药开发提供参考。

CPBL与LBL相结合教学法提高法医学本科生的能力与素质的探讨

法医物证学是一门综合性医学科学,有很强的应用性,具有丰富的、可利用的案例资源。现行的CPBL与LBL各有其优势和不足,已经不能满足当前的形势需求。在我院现有的条件下,根据法医物证学的特点,构建实施CPBL与LBL相结合的教学方法,设计教学中的实施方案,探讨教学中取得的效果、新模式教学的特点及存在的问题,为法医物证学教学新模式的应用提供参考。CPBL与LBL相结合的教学方法既容易开展,又有可行性,同时提高了法医学本科生的能力与素质。

TNF及TNFR基因多态性与寻常性银屑病的相关性

目的研究TNF及TNFR基因多态性与中国豫北地区汉族人银屑病易感性的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性分析(PCR-RFLP)方法,检测107例中国豫北地区汉族寻常性银屑病患者(病例组)和110名健康对照者(对照组)TNFα-308,-238基因座多态性,TNFβ+252基因座多态性,以及TNFR1-329,TNFR2+676基因座多态性,用SPSS11.5软件分析这5个基因座多态性与银屑病遗传易感性的关系。结果 TNFα-238基因座、TNFβ+252和TNFR2+676基因座的基因型频率和等位基因频率分布在病例组和对照组间的差异有统计学意义(P<0.05);TNFα-308基因座和TNFR1-329基因座的基因型以及等位基因频率分布在两组间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论中国豫北地区汉族人群中TNFα-238,TNFβ+252和TNFR2+676基因座多态性与汉族人银屑病易感性相关。