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异源CYP450酶的表达优化促进工程酿酒酵母合成熊果酸
1
作者
那雪梅
王雨
+3 位作者
姜尧竹
贾男
王颖
李春
《化工学报》
EI
2024年第7期2624-2632,共9页
熊果酸(UA)是具有多种生理及药理活性的植物来源五环三萜类羧酸,尽管在酿酒酵母中已经实现了UA的从头合成,但仍存在产量低、副产物积累、营养供给冗余等问题,无法实现工业化生产。为了提高酿酒酵母合成熊果酸的能力,通过多种方法优化了U...
熊果酸(UA)是具有多种生理及药理活性的植物来源五环三萜类羧酸,尽管在酿酒酵母中已经实现了UA的从头合成,但仍存在产量低、副产物积累、营养供给冗余等问题,无法实现工业化生产。为了提高酿酒酵母合成熊果酸的能力,通过多种方法优化了UA合成途径中异源CYP450酶的表达。探究了位置效应对CYP450基因表达的影响,初步筛选到CYP450的基因组最佳整合位点(HO位点),通过单独增加CYP450的拷贝数或同时增加CYP450及CPR的拷贝数,确定了同时存在3个CYP450和CPR拷贝时CYP450酶具有最佳催化活性,进行培养基优化后UA摇瓶产量达到(266.54±6.50)mg/L,最终在5 L发酵罐进行放大培养UA产量达到(2825.58±36.26)mg/L。本研究可为在酿酒酵母中通过表达优化策略调控其他三萜类化合物的合成提供参考。
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关键词
位置效应
熊果酸
酿酒酵母
代谢
发酵
合成生物学
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题名
异源CYP450酶的表达优化促进工程酿酒酵母合成熊果酸
1
作者
那雪梅
王雨
姜尧竹
贾男
王颖
李春
机构
北京理工大学化学与化工学院
出处
《化工学报》
EI
2024年第7期2624-2632,共9页
基金
国家重点研发计划项目(2019YFA0905700)
国家自然科学基金项目(22078020,22378022)。
文摘
熊果酸(UA)是具有多种生理及药理活性的植物来源五环三萜类羧酸,尽管在酿酒酵母中已经实现了UA的从头合成,但仍存在产量低、副产物积累、营养供给冗余等问题,无法实现工业化生产。为了提高酿酒酵母合成熊果酸的能力,通过多种方法优化了UA合成途径中异源CYP450酶的表达。探究了位置效应对CYP450基因表达的影响,初步筛选到CYP450的基因组最佳整合位点(HO位点),通过单独增加CYP450的拷贝数或同时增加CYP450及CPR的拷贝数,确定了同时存在3个CYP450和CPR拷贝时CYP450酶具有最佳催化活性,进行培养基优化后UA摇瓶产量达到(266.54±6.50)mg/L,最终在5 L发酵罐进行放大培养UA产量达到(2825.58±36.26)mg/L。本研究可为在酿酒酵母中通过表达优化策略调控其他三萜类化合物的合成提供参考。
关键词
位置效应
熊果酸
酿酒酵母
代谢
发酵
合成生物学
Keywords
position effect
ursolic acid
Saccharomyces cerevisiae
metabolism
fermentation
synthetic biology
分类号
Q815 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
异源CYP450酶的表达优化促进工程酿酒酵母合成熊果酸
那雪梅
王雨
姜尧竹
贾男
王颖
李春
《化工学报》
EI
2024
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