九龙牦牛H-FABP与ADD1基因的表达谱研究

为了研究心脏型脂肪酸结合蛋白（Heart fatty acid—binding protein，H—FABP）与脂肪细胞决定和分化因子1（Adipocyte determination and differentiation factor-1，ADD1）在九龙牦牛肉质形成中的作用，试验以九龙牦牛为研究对象，利用半定量RT—PCR检测其在九龙牦牛不同组织和不同发育阶段的表达差异，获得其组织表达和时序表达谱。结果表明：检测到H—FABP基因在九龙牦牛的心脏、脾脏、背最长肌和脂肪组织中表达，在肝脏和肾脏中未表达；ADDl基因仅在九龙牦牛的背最长肌和脂肪中表达，在心脏、肝脏、脾脏和肾脏中均未表达。时序表达谱分析结果显示，H—FABP与ADD1基因在0．5岁牦牛背最长肌中的表达丰度显著高于3．5～5．5岁和9岁以上的牦牛（P〈0．05），3．5—5．5岁牦牛背最长肌中的表达丰度显著高于9岁以上的牦牛。

成都麻羊FTO基因组织表达及其与IMF含量的相关性研究

为了研究脂肪肥胖相关基因(FTO)在成都麻羊不同组织中的表达水平以及肌肉组织中FTO相对表达量与肌内脂肪(intramuscular fat,IMF)含量的相关性,试验采用实时荧光定量PCR方法检测FTO在成都麻羊各组织中的表达水平,采用索氏化学抽提法测定肌肉组织中IMF含量。结果表明:FTO在各组织中广泛表达,在脾脏中表达量最高,显著高于脂肪组织(P<0.05),极显著高于背最长肌、股二头肌、臂三头肌、心脏(P<0.01)。成都麻羊背最长肌IMF含量显著高于股二头肌、臂三头肌(P<0.05);背最长肌、股二头肌中FTO相对表达量与IMF含量呈不显著正相关(P>0.05),臂三头肌中FTO相对表达量与IMF含量呈显著负相关(P<0.05)。说明FTO可能对山羊肌内脂肪沉积有重要调控作用。

MyHC基因在C2C12成肌细胞分化过程中的时序表达

以体外培养的C2C12成肌细胞为研究对象,然后利用荧光定量PCR检测肌球蛋白重链(myosin heavy chains,MyHC)的3种亚型MyHC1、MyHC2x和MyHC2b在成肌诱导分化中(0-8 d)中的时序表达规律.结果表明,MyHC1基因在诱导分化的0-4 d表达呈上升趋势,4-8 d又呈下降趋势,在第4 d和第6 d的表达水平显著高于其他天数(p<0.05).MyHC2x基因在诱导分化的0-6 d表达呈上升趋势,但在第8 d又开始下降.MyHC2b在诱导分化的0-8 d中表达一直呈上升趋势,第6 d和第8 d表达水平显著高于其他天数(p<0.05).

MRFs家族基因在鲤鱼红肌和白肌中的表达差异

为探索生肌调节因子(myogenic regulator factors,MRFs)家族基因在鲤鱼肌纤维形成中的基本作用,利用荧光定量PCR技术分别检测MRFs家族各成员在鲤鱼红肌、白肌中的表达差异,并与红肌纤维的标志基因My HCⅠ及白肌纤维的标志基因My HCⅡ的表达水平进行关联分析。结果表明,Myo D基因在鲤红肌中的表达极显著高于在白肌中的表达,并与My HCⅠ基因的表达呈显著正相关,Myf6在鲤鱼白肌中的表达极显著高于其在红肌中的表达水平,并与My HCⅡ基因的表达呈显著正相关,Myf5、Myo G在鲤鱼红肌、白肌中的表达水平差异不显著。

山羊DLK1基因分子克隆、生物信息学分析及表达研究

本研究旨在克隆山羊DLK1基因,预测编码蛋白的结构与功能,同时研究该基因在山羊组织器官中的表达规律及其与肌内脂肪含量的相关性。以简州大耳羊为试验动物,采用RT-PCR克隆DLK1基因序列,结合生物信息学方法分析其生物学特性,荧光定量检测DLK1mRNA表达情况,并将表达量与肌内脂肪含量进行相关性分析。结果显示,克隆得到山羊DLK1长度为1 137bp,开放阅读框(ORF)长度为927bp(GenBank登录号:KP686197),编码308个氨基酸,山羊核苷酸序列和氨基酸序列与牛的相似性最高(97%),系统进化树分析表明山羊与牛亲缘关系最近;生物信息学预测显示,该蛋白属于不稳定酸性疏水蛋白;有8个磷酸化位点和1个N-糖基化位点;亚细胞定位于内质网(44.4%)、高尔基体(33.3%)和质膜(22.2%),属于分泌跨膜蛋白;具有5个表皮生长因子结构域和2个表皮生长因子家族特有的保守结构域EGF-CA;预测二级结构由12.99%β-折叠和87.01%无规则卷曲组成的非常规蛋白。荧光定量PCR结果显示,DLK1基因在山羊不同组织中都存在表达,其在肾中表达水平最高,在脂肪组织中表达水平最低;DLK1基因在羔羊背最长肌组织中表达水平最高,高于育成羊和成年羊,但差异不显著(P>0.05);相关分析显示,山羊背最长肌、腿肌、臂三头肌中DLK1mRNA表达与肌内脂肪含量分别呈显著负相关(R=-0.6,P<0.05)、无显著正相关(R=0.2,P>0.05)和无显著负相关(R=-0.2,P>0.05)。研究结果显示,DLK1可能对山羊肌内脂肪沉积起着重要作用。本结果为进一步研究DLK1在肌内脂肪沉积过程中的作用提供了参考。

内皮祖细胞的生物学特性及其应用

内皮祖细胞是血管内皮细胞的前体细胞,随着对其培养、鉴定、归巢和分化等研究的进行,内皮祖细胞被越来越多的引入到医学、细胞生物学等相关血管疾病的研究之中,内皮祖细胞可促进创伤愈合和血管功能恢复,是构建心血管组织工程的新力量。就内皮祖细胞的生物学特性及其在动物肢体缺血模型和临床实验中的应用进行了概述,并分析了内皮祖细胞应用所面临的挑战,最后对未来的研究方向进行了展望。

血管干/祖细胞的研究进展

血管壁中的干/祖细胞主要有骨髓间充质干细胞、周细胞、内皮祖细胞和平滑肌祖细胞4种,它们具有高度的增殖潜能和分化能力,这些细胞可以固定在某些部位也可以进入外周循环中,在出生后的血管发生和损伤后的血管新生中发挥重要的作用。分别介绍了以上几种祖细胞的来源、分布和生物学特性,以及在心血管病理状况下这些祖细胞所受到的影响,并概述了在病理状况下这些血管干/祖细胞之间在分布上和生物学特性方面的复杂性。最后肯定了血管干/祖细胞的作用,并对未来的研究进行了展望。

藏山羊SFRS18基因克隆、表达及其与肌内脂肪含量相关性研究

试验旨在克隆藏山羊SFRS18(splicing factor arginine/serine-rich 18)基因CDS序列,并进行生物信息学分析,同时分析其组织表达特征以及与肌内脂肪含量进行相关性分析,为深入研究该基因在山羊肌内脂肪沉积中的作用积累数据。采用RT-PCR技术获得藏山羊SFRS18基因序列,结合生物信息学分析蛋白的理化性质、结构和不同物种的同源性,实时荧光定量检测SFRS18mRNA表达情况,并将表达量与肌内脂肪含量相关联。结果表明,藏山羊SFRS18基因cDNA序列长为1 299bp,开放阅读框(ORF)长为1 272bp,编码423个氨基酸,蛋白分子结构式为C2003H3424N760O696S4,分子质量为49.42ku,等电点pI=11.20,SFRS18蛋白为不稳定的亲水性蛋白,无信号肽;有103个磷酸化位点,2个N-糖基化位点和39个O-糖基化位点;亚细胞定位于在细胞核(82.6%)、细胞质(8.7%)、细胞骨架(4.3%)和质膜(4.3%),属于非跨膜蛋白;预测二级结构由0.71%α-螺旋和99.29%无规则卷曲组成;藏山羊核苷酸序列和氨基酸序列与牛、绵羊和水牛的相似性最高(99%),系统进化树分析表明藏山羊与牛亲缘关系最近;实时荧光定量PCR结果显示,SFRS18基因在藏山羊的不同组织中都存在表达,其中在脾脏中表达水平最高,在背最长肌中表达水平最低;在藏山羊背最长肌和腿肌中SFRS18mRNA表达与肌内脂肪含量均呈显著正相关(r=0.081,P<0.05;r=0.373,P<0.05)。SFRS18基因可以作为调节山羊脂肪沉积的候选基因。

藏山羊DLK1基因的组织表达谱与肌内脂肪相关性分析

为了研究藏山羊DLK1基因组织表达谱和肌肉组织中DLK1 mRNA表达与肌内脂肪(intramuscular fat,IMF)含量的相关性,试验采用实时荧光定量PCR方法检测DLK1基因在藏山羊不同组织中的表达和与肌肉关联性分析。结果表明:DLK1基因在藏山羊心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、脂肪、背最长肌、腿肌和臂三头肌中均有表达,其中在肾脏中表达量最高,在肺脏中表达量最低。相关性分析结果表明,藏山羊背最长肌、腿肌和臂三头肌中DLK1 mRNA表达与肌内脂肪含量分别呈不显著正相关(R=0.226,P>0.05)、显著正相关(R=0.759,P<0.05)和显著负相关(R=-0.792,P<0.05)。说明DLK1基因可能对藏山羊肌内脂肪沉积具有重要的调控作用。