cDNA末端快速扩增技术的研究进展

cDNA末端快速扩增技术是一种基于多聚酶链式反应的技术 ,它的发展大大便利了应用其它方法获得的部分cDNA序列后克隆全长cDNA 5’和 3’末端的工作。不仅RACE方法能在短时间内得到完整的cDNA末端序列 ,而且一些截短的cDNA末端常常也能在RACE的过程中被扩增 ,而这些截短的产物破坏了全长cDNA克隆的获取。许多研究者对RACE的流程提出了改进方案 ,从而提高了该技术的效力。本文介绍了许多已发表的RACE技术关键步骤的改良 ,包括一些具体有效的操作流程 ,如RNA连接酶介导的RACE/连接锚定PCR等 ,还有其有效性的例证。

加强医科生科研思维的早期培养和训练

本文主要探讨通过课堂讲解分析实例、参与研究领域的专题讲座以及尽早进入科研小组参加科研工作,来进行医科生科研思维的早期培养和训练,从而增强医学院校培养和选拔实用型科研人才的成效。

自毁式注射器生物相容性的实验研究

目的了解一次性自毁式注射器的生物相容性。方法进行细胞毒性试验、豚鼠迟发型超敏反应试验、兔皮内刺激试验等,并根据相关标准对试验数据进行分析和评估。结果一次性自毁式注射器的细胞毒性试验、迟发型超敏反应试验、皮内刺激试验均为阴性。结论一次性自毁式注射器具有良好的生物相容性。

莲必治氯化钠注射液的安全性试验研究

目的:评价莲必治氯化钠注射液的安全性。方法:采用豚鼠全身主动过敏试验、主动皮肤过敏试验及被动皮肤过敏试验、体外溶血试验,兔血管刺激性试验和肌肉刺激性试验观察莲必治氯化钠注射液的安全性。结果:莲必治氯化钠注射液有轻微的过敏反应症状,无皮肤过敏反应,无溶血现象,对静脉血管、肌肉无刺激反应。结论:在该实验条件下莲必治氯化钠注射液,除有轻微的过敏反应症状外,是安全的。

使用DNA特异基因标记—W316bp鉴定平湖王浆高产意蜂的研究初报

选择浙江平湖 5个养蜂场 ,每个养蜂场各任取 5群工蜂蛹分别提取纯化DNA ,以随机引物W (5′_CGGCCCCGGT_3′)进行PCR扩增并对其扩增产物进行电泳 ,染色 ,获得平湖不同群浆意蜂的DNA多态性图谱。结果发现 2 5个样品有 5个样品的DNA多态性图谱中 ,代表优良浆意蜂的W 31 6bp条带没有出现 ,为阴性 ,而其余 2 0个样品的DNA多态性图谱中均出现了清晰的W31 6bp条带 。

使用DNA特异基因标记——W316bp鉴定平湖王浆高产意蜂的研究再报

20 0 2年选择浙江平湖 5家蜂场任取 2 5群蜂的工蜂蛹样品。经检测 ,有 2 0群蜂的工蜂蛹样品出现清晰的DNA特异基因标记———W316bp ,即为阳性。为探讨该蜂种的遗传稳定性以及与其生产性能和经济效益间的相关性 ,2 0 0 3年 4月又从 7家蜂场任取 30群蜂的工蜂蛹样品 ,进行再测定 ,得出其中 2 8个样品出现清晰的DNA特异基因标记———W 316bp ,即为阳性。说明王浆高产基因频率稳定 。

生长因子诱导骨髓基质细胞向胆碱能神经元分化的研究

目的建立生长因子定向诱导骨髓基质细胞(BMSCs)分化为胆碱能神经元的体系。方法 SD大鼠原代BMSCs体外培养,分别用神经生长因子(NGF)、NGF加碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、NGF加bFGF和表皮生长因子(EGF)诱导1、3、5 h,免疫荧光染色鉴定神经元表面标志微管联合蛋白-2(MAP-2)和胆碱能神经元标志物胆碱乙酰转移酶(ChAT),计数阳性细胞率。结果原代培养BMSCs传至第5代已基本纯化,NGF 100 ng/ml能有效诱导BMSCs分化为神经元,NGF、bFGF和EGF联合诱导可使BMSCs定向分化为胆碱能神经元,分化率为(67±8)%。结论 NGF、bFGF和EGF联合使用是诱导BMSCs定向分化为胆碱能神经元的有效组合,细胞分化率高。

南美响尾蛇神经毒素对吉非替尼诱导人肺鳞癌SK-MES-1细胞凋亡的影响

目的探讨南美响尾蛇神经毒素(crotoxin)对吉非替尼(iressa)诱导人肺鳞癌SK-MES-1细胞凋亡及其对吉非替尼的抗肿瘤效果的影响。方法应用MTT法和流式细胞仪annexinV-PI双标法研究crotoxin及其与iressa联用对人肺鳞癌SK-MES-1细胞促凋亡作用。结果 Crotoxin作用浓度大于或等于25μg/ml时对人肺鳞癌SK-MES-1细胞有明显生长抑制作用,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),与iressa联合作用明显高于单用crotoxin和iressa,其Q值均在0.85～1.15之间,两者呈现出相加的抗肿瘤效果。结论 Crotoxin对人肺鳞癌SK-MES-1细胞的生长有抑制作用,并呈浓度依赖性,与iressa联合应用对人肺鳞癌SK-MES-1细胞有明显的促凋亡作用。

南美响尾蛇神经毒素联合吉非替尼对人肺腺癌A549细胞的作用

目的探讨南美响尾蛇神经毒素(Crotoxin)对人肺腺癌A549细胞的作用及其对吉非替尼(Iressa)的抗肿瘤效果。方法通过细胞生长抑制实验和细胞集落形成实验观察Crotoxin及其与Iressa联用对人肺腺癌A549细胞的作用,生长抑制实验采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法,集落形成实验采用平板克隆法。结果Crotoxin对人胚肺成纤维细胞的生长无明显影响,但可明显抑制人肺腺癌A549细胞的生长,与Iressa联用可增强Iressa的抗肿瘤效果。结论Crotoxin对人肺腺癌A549细胞的生长有抑制作用,与Iressa联用效应为协同或相加。