胃癌HER-2免疫组化检测方法优化

目的对胃癌HER-2检测的染色条件进行探索,从内外部质控、程序验证方面建立较为完善的HER-2检测流程。方法从标本固定脱水时间、包埋方向、不同染色方式、烤片时间、一抗孵育时间、抗体差异几个方面分别进行试验。结果国产抗体染色强度弱于HER2/neu(4B5),但HER-2(3+)的标本在HER-2(UMAB36)抗体显色下细胞形态更清晰。结论标本固定脱水时间要适宜,脱水不足易导致免疫组化切片不完整,抗原表位丢失且有大面积非特异性着色;若条件可及,优先选择全自动免疫组化染色仪进行染色,如果选择手工染色,建议使用EDTA修复,一抗4℃孵育过夜,染色效果更佳;烤片时间要适宜,烤片时间太长会明显降低组织阳性信号,甚至产生非特异性信号,影响染色质量;HER-2(3+)的标本建议选用HER-2(UMAB36)进行染色,对于2+的标本,可选用HER2/neu(4B5)的抗体,染色强度更佳,可减少模棱两可的结果,更利于医师判读。