二妙散对植皮小鼠细胞免疫功能的影响

本文观察了二妙散（Ｅｒ－ＭｉａｏＳａｎ，ＥＭＳ）和组成该方的单味药黄柏（ｃｏｒｔｅｘｐｈｅｌｌｏｄｅｎｄｒｉ，ＣＰ）和苍术（ｒｈｉｚｏｍａａｔｒａｃｔｙｌｏｄｉｓ，ＲＡ）对植皮小鼠皮片存活时间和细胞免疫功能的影响，并以抗小鼠胸腺细胞血清（ａｎｔｉｔｈｙｍｏｃｙｔｅｓｅｒｕｍ，ＡＴＳ）作为阳性对照。结果表明：用药各组移植皮片的半数生存期均有明显的延长，与生理盐水组相比Ｐ＜０．０５～０．０１。ＥＭＳ，ＣＰ和ＡＴＳ组的细胞免疫功能明显地受到抑制，其外周血Ｔ细胞值和脾细胞毒指数与生理盐水组比较Ｐ＜０．０１～０．００１，ＲＡ组的抑制作用较弱。上述结果提示，实验用药各组植皮小鼠的细胞免疫功能都有一定抑制作用，其抑制强度的顺序为ＡＴＳ＞ＥＭＳ＞ＣＰ＞ＲＡ。

中药对白细胞-内皮细胞黏附作用的研究

细胞黏附是同种或异种细胞间以及细胞与细胞外基质间互相接触、连接的过程,在胚胎分化发育、器官构成、正常组织结构的维系、细胞的游走移行、免疫应答反应、炎症反应、血栓形成、损伤的修复以及肿瘤转移等生理和病理过程中均有重要作用.研究资料证明,黏附分子介导了细胞与细胞以及细胞与基质间的黏附.

宣肺解毒颗粒剂对DNFB致敏小鼠细胞免疫功能的影响

本文主要报道宣肺解毒颗粒剂对小鼠细胞免疫功能的作用。用宣肺解毒颗粒剂水溶液灌胃1天后,以二硝基氟苯(DNFB)按常规致敏Balb/c小鼠,再连续给药5天后,于耳廓部发敏,36h后,用7mm直径打孔器分别切取耳片,称量,实验侧与对照侧耳片重量之差即为耳肿胀度,以此示小鼠迟发超敏反应程度。同时,取各组小鼠脾脏,按常规做体外脾细胞增殖实验,比较脾细胞及在ConA或LPS刺激下细胞增殖程度(用MTT法)。并用成淋巴细胞法测各组脾细胞体外诱生IL-2的能力。结果表明宣肺解毒颗粒剂12.8g/kg·d^(-1)和32g/kg·d^(-1)

沉痛悼念我敬爱的恩师杨贵贞教授

千言万语难以表达我对您的思念之情!万语千言无法表述您对我谆谆教导的培育之恩!泪眼中呈现了您在革命征途中历尽坎坷，无悔无怨，您一生为我国免疫学的科教事业，尤其对中医药免疫事业忘我地耕耘、无私地奉献，对学生言传身教，视如己出。您的一生是伟大的一生，光辉的一生。您对免疫学事业的贡献已永载光荣史册。

抗人淋巴细胞再循环受体单克隆抗体的制备与鉴定

用人外周血高纯度的淋巴细胞做抗原，通过杂交瘤技术，获得一鼠抗人单克隆抗体（ＭｃＡｂ）－ＱＭ５（ＩｇＧ＿１，Ｋ轻链）。ＭｃＡｂＱＭ５能特异地与９８％的淋巴细胞，５２％的单核细胞和１０％左右的胸腺细胞反应，而不与红细胞、血小板和多核白细胞反应，与ＯＫＴ＿３和ＯＫＴ＿８抗原亦不相关。ＭｃＡｂＱＭ５尤其能特异地阻断人淋巴细胞与周围淋巴结内毛细血管后静脉内皮细胞结合，阻断作用与剂量相关，３０μｇ的ＭｃＡｂＱＭ５可完全抑制其结合。定量分析ＭｃＡｂＱＭ５的结合特性，证明每一淋巴细胞表面能结合大约１．２×１０￣５个ＭｃＡｂＱＭ５分子。用Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ分析，ＭｃＡｂＱＭ５能与淋巴细胞蛋白溶解产物中一种多肽成分结合，其分子量为１３５±３Ｋｄ（还原条件下为１４８±３Ｋｄ）。出此，ＭｃＡｂＱＭ５可用于鉴定新的淋巴细胞再循环受体。

人参皂苷Rg_1及其肠内菌代谢产物Rh_1对小鼠免疫细胞功能的影响

目的 初探人参皂苷Rg1 及其肠内菌代谢产物Rh1 对正常小鼠免疫功能的影响。方法 用Rh1 与Rg1 分别处理脾T细胞 ,B细胞及腹腔巨噬细胞 (Mφ) ;MTT比色法测T和B细胞增殖能力 ;中性红比色法测Mφ的吞噬功能 ;Griess法测Mφ释放NO的水平。 结果 Rh1 能促进脾细胞增殖、下调ConA诱导的T细胞增殖 ;Rh1 与Rg1 对LPS诱导的B细胞增殖均无明显作用 ;Rg1 和Rh1 能提高Mφ的吞噬能力和促进NO的释放。 结论 Rg1 及其代谢产物Rh1 可共同作用于T细胞和Mφ而产生免疫调节作用。

黄芪多糖促进中性粒细胞与血管内皮细胞黏附及相关黏附分子表达

目的 观察黄芪多糖对中性粒细胞与血管内皮细胞黏附作用及相关黏附分子表达的影响,以探讨黄芪托毒生肌作用与其对伤口愈合中炎症反应作用的关系。方法 以黄芪多糖或黄芪多糖加白细胞介素1(IL-1)、肿瘤坏死因子(TNF)处理人中性粒细胞(PMN)或人脐静脉内皮细胞(HUVEC)后,用蛋白染料染色法研究黄芪多糖对PMN与HUVEC黏附的作用,用Cell-ELISA、APAAP法研究黄芪多糖对细胞表面黏附分子表达的影响。结果 黄芪多糖作用于HUVEC能明显促进其与PMN的黏附,而作用于PMN未见其作用增强。黄芪多糖与IL-1共同处理HUVEC,能促进IL-1诱导的PMN与HUVEC的黏附增强,且能增加由IL-1、TNF诱导的HUVEC表达黏附分子ICAM-1的表达;黄芪多糖处理PMN后对黏附分子CD18的表达无作用。结论 黄芪多糖可通过促进内皮细胞表面ICAM-1的表达而促进中性粒细胞与内皮细胞的黏附,促进伤口愈合中的炎症反应,这可能是黄芪托毒生肌作用的生物学基础之一。

小檗碱对IL-1或TNF诱导的多形核白细胞与内皮细胞粘附的影响

目的 :通过研究小檗碱对IL - 1、TNF诱导的多形核白细胞 (PMN)与血管内皮细胞粘附及粘附分子表达的影响 ,探讨小檗碱抗炎作用机制。方法 :以小檗碱加IL - 1、TNF处理人PMN或人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)后 ,用蛋白染料染色法研究小檗碱对PMN与HUVEC粘附的作用 ,用细胞ELISA、APAAP法研究小檗碱对细胞表面粘附分子表达的影响。结果 :小檗碱与IL - 1或TNF共同处理HUVEC ,能抑制IL - 1、TNF诱导的PMN与HUVEC间的粘附增强 ,且能下调由IL - 1、TNF诱导的HUVEC表面粘附分子ICAM - 1表达的增高 ;小檗碱与TNF共同处理PMN ,能抑制TNF诱导的PMN与HUVEC的粘附增强 ,亦能降低TNF诱导的PMN表面粘附分子CD18的表达。结论 :通过抑制细胞表面粘附分子的表达而抑制PMN与内皮细胞的粘附 ,可能是小檗碱发挥抗炎作用的机制之一。

小檗碱对人胃癌细胞增殖、细胞周期及CD44V6表达的影响

目的 :研究小檗碱对人胃癌MGC 80 3细胞增殖、细胞周期及CD4 4V6分子表达的影响 ,探讨其抗肿瘤及抗肿瘤转移作用机制。方法 :MTT法检测小檗碱对人胃癌MGC 80 3细胞体外增殖作用。激光共聚焦显微镜观察用药后细胞形态的改变并用流式细胞仪检测细胞周期的变化。应用免疫组化和流式细胞术技术检测药物对细胞表面CD4 4V6表达的影响。结果 :小檗碱对MGC 80 3细胞有显著抑制作用 ,在 10、2 0、4 0 μg ml浓度下 ,其抑制率分别为 36 2 %、4 9 7%和 5 9 3% ,有明显剂量依赖关系。激光共聚焦显微镜下细胞核固缩 ,并可见凋亡小体。药物可将细胞阻滞在G0 G1期 ,并使细胞表面的CD4 4V6表达降低。结论 :小檗碱可通过诱导MGC 80 3细胞凋亡并将细胞阻滞在G0 G1期 ,发挥抑制瘤细胞的体外增殖作用 ;小檗碱可降低MGC 80 3细胞株CD4 4V6的表达 。

麝香酮抑制血管内皮细胞与中性粒细胞黏附及其表面ICAM-1、VCAM-1和CD44表达

目的：从中性粒细胞与血管内皮细胞黏附的角度探讨麝香对创伤愈合的作用基础。方法：以TNF处理体外培养的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）为模型，应用MTT法、虎红法、荧光免疫组化法研究麝香酮对人外周血中性粒细胞（PMN）与HUVEC黏附及HUVEC表面黏附分子表达的影响。结果：TNF处理HUVEC12小时，能明显增强PMN与HUVEC黏附（P〈0．01），并能明显促进HUVEC表面ICAM-1、VCAM-1和CIM4表达（P〈0．05）。75～150ml麝香酮作用于TNF活化的HU-VEC，明显抑制PMN与HUVEC黏附（P〈0．01），仅150μg/ml时降低HUVEC表面ICAM-1表达（P〈0．05），37．5μg/ml和150μg/ml时减少其表面VCAM．1表达（P〈0．05），75-150μg/ml时抑制其表面CD44表达（P〈0．05或P〈0．01）。结论：麝香酮通过降低HUVEC表面ICAM-1、VCAM-1和CD44表达而抑制中性粒细胞与血管内皮细胞黏附，可能是麝香促进慢性创面愈合的机制之一。

黄芪多糖对细胞增殖及血管内皮细胞与白细胞粘附作用的影响

目的观察黄芪多糖对成纤维细胞与血管内皮细胞增殖效应及对血管内皮细胞与白细胞粘附作用的影响。方法采用MTT法观察体外培养的人正常成纤维细胞和慢性创面的创缘成纤维细胞的增殖和人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)增殖;采用虎红法、荧光免疫组化法在TNF刺激的HUVEC模型上观察黄芪多糖对人外周血中性粒细胞(PMN)、单核细胞TPH-1与HUVEC粘附及HUVEC表面粘附分子的表达。结果在244-156mg/L范围内,黄芪多糖作用下创缘成纤维细胞增殖率明显高于对照组(P<001);244-39mg/L黄芪多糖作用下人正常皮肤的成纤维细胞增殖率明显高于对照组(分别P<001,P<005);在975-156mg/L浓度范围内对HUVEC未表现出明显的增殖作用。在4h时25mg/L黄芪多糖组PMN与HUVEC的粘附量明显低于TNF组(P<005);25mg/L和100mg/L黄芪多糖组TPH-1与HUVEC的粘附量明显低于TNF组(分别P<001和P<005);作用12h时,25-100mg/L黄芪多糖组HUVEC与PMN粘附量明显低于TNF组(分别P<005,P<001和P<001);50mg/L和100mg/L也使TPH-1与HUVEC粘附量明显低于TNF组(分别P<001和P<005)。与TNF组比较,在25-100mg/L黄芪多糖作用4h能明显降低VCAM-1、ICAM-1的荧光强度(分别P<001和P<005)。作用12h,与TNF组比,50mg/L黄芪多糖组CD44的荧光强度明显低于TNF组(P<005)。

清开灵对白细胞-血管内皮细胞粘附的影响

目的:研究清开灵对白细胞与血管内皮细胞粘附的作用。方法:以TNF处理体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为实验模型,用不同浓度的清开灵作用HUVEC 2、12h后,用虎红染色法检测人外用血中性粒细胞(PMN)、淋巴细胞与HUVEC粘附的情况;并用Cell-ELISA检测HUVEC表面粘附分子E-selectin的表达。结果:TNF作用HUVEC 2、12h后,能明显增强PMN、淋巴细胞与HUVEC的粘附,不同浓度的清开灵能降低PMN、淋巴细胞与HUVEC的粘附;TNF作用HUVEC 2h后,能促进HUVEC表面E-selectin的表达,清开灵能抑制E-selectin的表达,TNF作用HUVEC 12h后,不能促进HUVEC表面E-selectin的表达,不同浓度的清开灵对E-selectin的表达没有作用。结论:清开灵能降低白细胞与HUVEC的粘附,抑制E-selectin的表达是其抗白细胞粘附的分子机制之一。

加味宣肺透解剂对流感病毒感染小鼠细胞因子的影响

目的:观察加味宣肺透解剂(JXT)对流感病毒感染小鼠细胞因子的影响。方法:复制流感病毒鼠肺适应株(FM1)小鼠肺炎模型,以加味宣肺透解剂灌胃治疗。ELISA法检测感染后第5天血清中IL-2、TNF-α、IL-6、IFN-γ的含量,肺组织切片HE染色。结果:加味宣肺透解剂明显升高血清中IL-2、IFN-γ水平,降低TNF-α、IL-6水平,减轻肺组织病变。结论:调节细胞因子的分泌,可能是加味宣肺透解剂减轻病毒感染小鼠肺组织损伤的机制之一。

小檗碱抗肿瘤新生血管形成作用机制的研究

目的:研究小檗碱对bFGF活化人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响,探讨其对肿瘤新生血管形成作用的机制。方法:MTT法检测小檗碱对bFGF活化HUVEC的增殖作用;流式细胞仪检测用药后细胞周期的变化;激光共聚焦扫描显微镜下观察药物对细胞形态、细胞内钙的影响;流式细胞仪检测小檗碱对细胞凋亡的作用。结果:小檗碱能明显抑制bFGF活化的HUVEC增殖,且存在剂量依赖关系;使细胞在G0-G1期的比例明显增多;使细胞核浓缩、甚至裂解成碎块,同时使细胞内钙增多;并诱导活化HUVEC发生细胞凋亡。结论:小檗碱可能通过将bFGF活化的HUVEC细胞周期阻滞在G0-G1期,抑制活化HUVEC的增殖;诱导活化HUVEC细胞发生凋亡等机制,阻止新生血管形成,发挥其抗肿瘤作用。

小檗碱对淋巴细胞与血管内皮细胞粘附及粘附分子的影响

目的：通过研究小檗碱对淋巴细胞与血管内皮细胞粘附及粘附分子的影响，探讨小檗碱免疫抑制作用机制。方法：以小檗碱处理人淋巴细胞或人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ） 后，用蛋白染料染色法研究对淋巴细胞与内皮细胞粘附的作用，用细胞ＥＬＩＳＡ、免疫细胞化学染色法研究对细胞表面粘附分子表达的影响。结果：小檗碱能抑制静息的及ＩＬ１、ＴＮＦ激活的内皮细胞与淋巴细胞间的粘附，其主要分子机制为下调内皮细胞表面粘附分子ＩＣＡＭ１ 的表达；小檗碱能抑制ＩＬ１ 激活的淋巴细胞与内皮细胞的粘附，对淋巴细胞表面粘附分子ＣＤ１８ 的表达无影响。结论：通过抑制细胞表面粘附分子的表达而抑制淋巴细胞与内皮细胞的粘附，从而抑制淋巴细胞再循环可能是小檗碱发挥免疫抑制作用的机制之一。

人参皂苷Rg1与Rh1对树突状细胞表达HLA-DR、CD25、CD44、CD54、CD11c及E-selectin的影响

目的观察人参皂苷Rg1和Rh1对树突状细胞(Dendriticcell,DC)表面分子CD25、HLA-DR、CD44、ICAM-1、CD11c及E-selectin表达的影响。方法用不同浓度的Rg1和Rh1分别加入成熟DC中,刺激一定时间后,用免疫组化法观察,并用图像分析法分析结果。结果除E-selectin外,Rg1和Rh1均可不同程度地促进HLA-DR、CD25、CD11c、CD44和ICAM-1的表达。结论Rg1、Rh1可增强DC表面促进T细胞活化的第一、二类信号系统分子的表达,提高其抗原递呈能力,并促进DC-T细胞簇的形成而活化初始T细胞。

黄芪多糖对淋巴细胞与血管内皮细胞粘附的影响及其分子机制

目的从影响淋巴细胞与血管内皮细胞粘附的角度探讨黄芪多糖免疫增强作用的机制。方法以体外培养的人脐静脉内皮细胞 ( HU VEC)为模型 ,应用蛋白染料染色、细胞 EL ISA、免疫细胞化学等方法 ,研究黄芪多糖对淋巴细胞与血管内皮细胞粘附的影响及其分子机制。结果黄芪多糖作用于 HUVEC,能促进 HUVEC与淋巴细胞粘附 ,并与 IL - 1、TNF有协同增强作用 ,其主要分子机制为促进 HU VEC表面粘附分子 ICAM- 1的表达 ;黄芪多糖作用于淋巴细胞 ,不增强淋巴细胞与HUVEC粘附 ,同时也不提高淋巴细胞表面粘附分子 CD18的表达。结论通过提高细胞表面粘附分子的表达而促进淋巴细胞与内皮细胞的粘附 。

威麦宁抗小鼠Lewis肺癌转移作用及分子机制的研究

目的 :探讨威麦宁抗小鼠Lewis肺癌转移作用及其分子机制。方法 :接种Lewis肺癌细胞复制移植性肺癌转移模型 ,用药后计数肺表面转移灶的数目 ;免疫组化法检测瘤组织中血管内皮细胞CD34的表达情况、并计数微血管密度 (MVD)和瘤细胞表面E -cadherin蛋白表达率 ;RT -PCR法检测瘤细胞E -cadherinmRNA的表达水平。结果 :NS(生理盐水组 )、WL(威麦宁低剂量组 )、WH(威麦宁高剂量组 )、CTX(环磷酰胺组 )各组肺转移灶发生率依次为 10 0 %、90 %、6 0 %和 4 0 %。瘤组织内MVD计数 ,WH组MVD明显低于NS组 (P <0 0 1)。WH组瘤细胞膜表面E -cadherin蛋白表达率及E -cadherinmRNA水平明显高于NS组 (P <0 0 1)。结论 :威麦宁可能通过提高瘤细胞E -cadherinmRNA及E -cadherin蛋白的表达 ;减少瘤组织微血管形成等机制 ,发挥抗Lewis肺癌荷瘤小鼠移植性肺转移作用。

复圣散对血管内皮细胞活性及其与中性粒细胞粘附率的影响

目的 :探讨中性粒细胞 (PMN)与血管内皮细胞 (VEC)的粘附特性和影响因素 ,以及中药复圣散的干预作用。方法 :以培养人脐静脉内皮细胞作为靶细胞 ,观察在高脂、高糖、肿瘤坏死因子 (TNF -α)及缺氧再氧化条件下 ,对培养的VEC活性以及PMN与VEC相互粘附的影响。结果 :高脂、高糖、TNF -α和缺氧再氧化等均可抑制VEC活性 ,并显著增强PMN与VEC的相互粘附作用 ,其粘附率正常对照组为 1 0 0 % ,高脂组则为 1 67 7% ,缺氧再氧化组为1 5 1 4% ,TNF -α组为 1 3 6 7% ,高糖组为 1 2 9 6% (均P <0 0 1 )。如事先在试验体系中加入不同浓度的中药血清 ,则粘附率明显降低 ,大、小剂量均呈现有抑制粘附效应 ,并有统计学差异。结论 :中药复圣散有良好的保护VEC和抗粘附作用 ,这可能是该方防治缺血性心脑血管疾病的机制之一。