微小RNA-138/NGAL对缺血再灌注诱导人肾小管上皮细胞的影响

目的探究微小RNA-138(microRNA-138,miR-138)调控中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)对缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)诱导人肾小管上皮(HK-2)细胞损伤的影响。方法HK-2细胞构建I/R模型,分别转染miR-138模拟物、miR-138抑制剂、NGAL、NGAL+miR-138模拟质粒,qRT-PCR测定不同细胞miR-138或NGAL mRNA表达鉴定转染结果,细胞活力检测(cell counting kit-8,CCK-8)法和流式细胞术测定细胞活性和凋亡。ELISA、Western blot法分别测定miR-138模拟物、miR-138抑制剂对I/R细胞白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平,以及Toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)、核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)、NF-κB抑制蛋白(inhibitor-NF-κB,IκBα)、磷酸IκBα(p-IκBα)、NGAL蛋白表达的影响。结果I/R细胞miR-138 mRNA表达、细胞活力降低,凋亡增加(P<0.01)。质粒转染成功,miR-138模拟物促进IR细胞活力,降低凋亡和NGAL mRNA表达(P<0.01);miR-138抑制剂、NGAL模拟降低IR细胞活力,增加凋亡和NGAL mRNA表达(P<0.01);NGAL模拟对IR细胞的损伤作用可被miR-138模拟逆转。miR-138抑制剂可增加I/R细胞IL-6、IL-1β、TNF-α水平和凋亡,上调TLR4、NF-κB、p-IκBα、NGAL蛋白表达,下调IκBα蛋白表达(P<0.05);miR-138模拟物可降低I/R细胞IL-6、IL-1β、TNF-α水平和凋亡,下调TLR4、NF-κB、p-IκBα、NGAL蛋白表达,上调IκBα蛋白表达(P<0.05)。结论miR-138通过调节NGAL和TLR4/NF-κB途径降低细胞凋亡和炎症因子水平,对I/R诱导的HK-2细胞发挥保护作用。

前列地尔合并肾康片对2型糖尿病肾病患者血清TNF-α、IL-6及IL-8水平的影响

目的研究前列地尔合并肾康片对2型糖尿病肾病患者血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)及白介素-8(IL-8)水平的影响。方法选取2014年6月~2015年5月我院收治的62例2型糖尿病肾病患者,根据随机抽签法分为试验组与对照组,各31例。对照组使用20 m L的生理盐水和10μg的前列地尔混合后,静脉推注的方式给药,1次/d。试验组在对照组治疗的基础上口服肾炎康复片,一次5片,一天3次。所有患者的治疗疗程均为4周。观察治疗前和治疗4周后的空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、TNF-α、IL-6及IL-8水平变化,评判两组患者的不良反应。结果治疗后,试验组的TNF-α、IL-6及IL-8水平显著低于对照组[(7.30±0.41)ng/L vs(9.44±1.78)ng/L,(9.39±0.31)ng/L vs(11.36±0.66)ng/L,(7.25±0.95)ng/L vs(11.35±1.07)ng/L](P<0.05)。试验组的FBG、Hb A1c水平显著低于对照组[(6.52±0.40)mmol/L vs(9.32±0.64)mmol/L,(6.53±0.60)%vs(7.44±0.68)%](P<0.05)。试验组和对照组的不良反应率比较差异无统计学意义[12.90%(4/31)vs 16.13%(5/31)](P>0.05)。结论前列地尔合并肾康片能明显降低2型糖尿病肾病患者血清TNF-α、IL-6、IL-8、FBG、Hb A1c水平,临床疗效良好,安全性高。

吗替麦考酚酯治疗难治性肾病综合征效果及对肾功能的影响分析

目的探讨吗替麦考酚酯治疗难治性肾病综合征(RNS)效果及对肾功能的影响。方法依据随机数表法将102例RNS患者分为观察组和对照组,各51例。对照组给予常规治疗观察组在常规治疗基础上加用吗替麦考酚酯治疗,疗程均为6个月。比较两组尿蛋白定量、尿素氮(BUN)、血清蛋白(Alb)、血肌酐(SCr)、疗效及不良反应情况。结果治疗后,两组肾功能各项指标均明显改善,且观察组尿蛋白定量、A1b、SCr改善优于对照组(均P<0.05);观察组总有效率高于对照组(P<0.05)。两组不良反应差异无统计学意义(P>0.05)。结论吗替麦考酚酯能显著改善RNS患者肾功能各项指标,疗效显著,安全性好。

以肾功能受损为首要表现的抗磷脂综合征报道1例

抗磷脂综合征(antiphospholipid syndrome,APS)是由抗磷脂抗体(antiphospholipid antibody,aPL)引起的临床综合征,主要表现为动脉/静脉血栓和/或病理妊娠。肾脏病变虽不是APS的诊断标准之一,但却是APS的主要靶器官,肾血管的任何部位都可发生血栓,从而引起APS肾病(APSN)。本文就以肾功能受损为首要表现的抗磷脂综合征1例报道如下。

梅毒相关性肾病的报道及分析1例

目的对梅毒相关性肾病病例进行临床分析,为临床工作中此类疾病的诊治提供依据。方法根据对我院近期收治的1例梅毒相关性肾病患者病史资料的总结,对其临床症状的主要特点、病理结果进行总结性分析。结果在采用驱梅治疗后效果明显,症状改善,各项指标逐步恢复正常。结论梅毒相关性肾病较易出现误诊误治,因此应详细了解患者的病史,加强对梅毒相关性肾病的认识,重视梅毒血清学检查,做到早诊断、早治疗。

急性肾损伤患者尿液IL-18、NGAL的变化

目的:探讨急性肾损伤(AKI)患者尿液中白细胞介素-18(IL-18)、中性粒细胞明胶酶相关脂蛋白(NGAL)的改变及临床意义。方法:AKI患者30例,原发性慢性肾脏病(CKD)患者30例,健康对照者30例,应用酶联免疫吸附检测法(ELISA)测定三组患者尿液IL-18、NGAL水平的变化;测定三组血清肌酐值。结果:血清肌酐AKI组较CKD组及健康对照组增高(P<0.001),而CKD组与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。AKI组尿IL-18水平高于CKD组(P<0.05),显著高于健康对照组(P<0.001)。CKD组尿IL-18水平高于健康对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。AKI组尿NGAL水平高于CKD组(P<0.05),显著高于健康对照组(P<0.001);CKD组尿NGAL水平高于健康对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。尿IL-18与尿NGAL之间存在正相关关系(r=0.994)。结论:尿IL-18、NGAL在急性肾损伤患者中均增高,是反映AKI较敏感的生物学标志物。

慢性肾病患者中低T3综合征的发生率及临床意义

目的:探讨低T3综合征在各期慢性肾病(CKD)非透析患者中的发生率,及低T3水平与肾脏病进展及贫血、营养不良、微炎症等疾病状态的相关性。方法:回顾性分析了176例CKD非透析患者的甲状腺功能指标,包括血清总三碘甲状腺原氨酸(TT3)、总甲状腺素(TT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺素(TSH),以及反应肾功能、营养状况及微炎症状况的相关生化指标,包括血清肌酐(Scr)、白蛋白(Alb)、胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高敏C反应蛋白(CRP)及贫血指标血红蛋白(Hb)。根据CKD分期将所有患者分为4组,分析低T3综合征的各组中的发生率,及TT3、FT3与肾功能、贫血、营养状况、微炎症状况相关指标的线性关系。结果:CKD1～2期患者中低T3综合征的发生率为7.14%,3～5期中分别为33.33%、81.25%、92.5%。TT3与eGFR(r=0.498,P=0.001)和Hb(r=0.48,P=0.001)呈显著正相关,与Alb、TG、TC、CRP无相关性。FT3与eGFR(r=0.783,P<0.0001)和Hb(r=0.706,P<0.0001)呈显著正相关,与CRP(r=-0.38,P=0.011)呈显著负相关,与Alb、TG、TC无相关性。结论:低T3综合征在CKD患者中普遍存在,并且低T3水平与肾脏损害程度、贫血、微炎症状态等疾病状态密切相关,因此监测血清甲状腺激素水平对于判断CKD患者病情严重程度和预后具有一定意义。

ANCA相关性肾小球肾炎的肾脏病理分型对评估临床预后的意义

目的：探索Berden等提出的抗中性粒细胞胞浆抗体（antineutrophil cytoplasmic antibodies,ANCA）相关性肾小球肾炎的肾脏病理分型在临床实践中评估患者预后的意义。方法：收集了47例2010年1月-2013年12月在我院及浙江大学医学院附属第二医院肾内科首诊断为ANCA相关性肾小球肾炎,接受经皮肾活检,并在诊断后2年内规则随访的患者的临床及肾脏病理资料,进行回顾性分析。根据Berden分型将入选患者分为四组,比较四组患者初诊时的基础肾小球滤过率（GFR）、各随访时间点的GFR、终末期肾病（ESRD）或需长期透析治疗的发生率、死亡率、肾脏存活率之间的差异,分析该病理分型对评估患者预后的意义。结果：（1）局灶型患者基础及各随访时间点的GFR水平均较硬化型患者高,差异具有统计学意义（P均〈0.0001）;新月体型、混合型近远期肾功能水平大致介于以上两型之间,两组之间差异无统计学意义（P均〉0.05）。（2）随访2年时,肾脏存活率在局灶型、硬化型、新月体型、混合型患者中分别为90%、38%、57%、50%。KaplanMeier生存曲线进一步分析四组之间肾脏存活率的差异,局灶型的肾脏存活率明显高于硬化型,差异有统计学意义（P=0.010）;其他两型介于二者之间,但差异无统计学意义（P均〉0.05）。结论：局灶型患者的近远期肾功能均较好,肾脏存活率较高,硬化型患者较差。新月体型及混合型介于上两者之间,该两组间差异无统计学意义。此研究证明Berden分型对ANCA相关肾小球肾炎患者的预后评估有一定意义,尤其对局灶型和硬化型患者。

外周血T淋巴细胞CD_(69)在狼疮性肾炎患者中的变化及意义

目的:探讨狼疮性肾炎(LN)患者外周血中T淋巴细胞CD69的变化及意义。方法:收集LN患者活动组35例、稳定组25例和健康对照组30例,采用流式细胞仪测定外周血中T淋巴细胞CD4.CD69、CD8.CD69浓度变化;利用酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清可溶性细胞间黏附分子-1表达,并分析其与系统性红斑狼疮活动性指标的关系。结果:(1)活动组LN患者淋巴细胞表达CD4.CD69、CD8.CD69、sICAM-1均明显升高,与狼疮性肾炎稳定组比较,差异有统计学意义P均<0.01;(2)LN患者血浆CD4.CD69与SLEDAI评分、sICAM-1、24 h尿蛋白呈正相关(P均<0.01),与补体C3、C4呈负相关(P均<0.01);(3)LN患者血浆CD8.CD69与SLEDAI评分、24 h尿蛋白呈正相关(P均<0.01),与补体C3呈负相关(P均<0.01)、与C4亦呈负相关(P<0.05);(4)LN患者SLEDAI评分与补体C3、C4负相关(P均<0.01),与24 h尿蛋白定量呈正相关(P<0.01);(5)LN患者血清sICAM-1与SLEDAI评分正相关(P<0.05)、与CD4.CD69、CD8.CD69、24 h尿蛋白定量正相关(P均<0.01)、与24 h尿蛋白定量呈正相关(P<0.05)与补体C3、C4负相关(P均<0.01)。结论:LN患者体内存在T细胞CD69表达可早期反映LN的活动,sICAM-1可能参与CD69引起肾脏的内皮细胞损伤,测定外周血CD69、sICAM-1有助于判断LN的活动性,有可能成为判断LN早期活动指标之一。

贝伐珠单抗对小鼠肾脏损害作用及机制研究

目的了解贝伐珠单抗及不同剂量鼠源贝伐珠单抗对小鼠肾脏的损害作用并探讨其机制。方法将42只C57BL-/6小鼠随机分为对照组(12只)及贝伐珠单抗组、低剂量鼠源贝伐珠单抗组、高剂量鼠源贝伐珠单抗组(各10只)。4周后处死小鼠,收集尿液、血清,检测尿微量白蛋白(MA)、血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys-C)、血尿素氮(BUN)及血肌酐(Cr);取肾脏组织,HE染色后光镜观察肾脏组织结构,免疫荧光染色观察免疫复合物IgM、IgG、IgA沉积,免疫组化染色观察IgM、IgG、IgA、血管内皮生长因子(VEGF)及Nephrin表达,电镜观察肾脏组织超微结构。结果贝伐珠单抗组、低剂量鼠源贝伐珠单抗组及高剂量鼠源贝伐珠单抗组尿MA、血清Cys-c水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。贝伐珠单抗组和高剂量鼠源贝伐珠单抗组血清BUN、Cr水平均高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。高剂量鼠源贝伐珠单抗组血清BUN及Cr水平与贝伐珠单抗组、低剂量鼠源贝伐珠单抗组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。贝伐珠单抗组免疫荧光IgG+^++;高剂量鼠源贝伐珠单抗组免疫荧光IgM++,免疫组化VEGF表达下调,电镜见肾小球足细胞足突融合。结论贝伐珠单抗引起肾脏损害的机制可能是下调VEGF的表达,引起免疫复合物沉积,导致肾小球内皮细胞足突融合,损害肾小球滤过膜,最终导致蛋白尿的形成及肾功能的损害。

退出腹膜透析患者的转归及其危险因素分析

目的:分析杭州市第一人民医院腹膜透析中心7年间所有维持性腹膜透析患者的转归情况,研究退出原因,探寻腹透患者不良转归的危险因素,从而改善预后。方法:收集杭州市第一人民医院腹膜透析中心自2010年01月~2016年12月间所有行腹膜透析管置入术开始腹膜透析患者的临床资料,回顾性分析退出腹透的原因(死亡、转血透、肾移植、肾功能恢复),并对腹透不良转归(死亡、转血透)进行危险因素分析。结果:共有158例患者在本中心接受腹膜透析治疗,男72例,平均年龄(60.0±15.1)岁,平均透析龄(41.4±33.2)个月。其中共103例患者退出,退出原因包括死亡48例、转血透46例、肾移植8例和肾功能恢复1例。死亡患者的原因包括心脑血管事件22例、感染20例、消化道出血3例、肿瘤2例、家属放弃治疗1例;转血透患者的原因有腹透相关感染23例、透析不充分11例、导管功能障碍7例、超滤衰竭5例。进一步分析腹透不良转归的危险因素,结果发现年龄≥60岁、男性、患糖尿病、血红蛋白<10 g/L、血浆白蛋白<35 g/L、总肌酐清除率<50 ml/min、残肾e GFR≤2 ml/min、腹膜高转运状态、腹腔感染等均提示转归不良。结论:在我中心,腹透最常见退出原因为死亡,其次是转血透;心脑血管事件、腹膜透析相关感染分别为死亡、转血透的最常见原因。老龄、男性、糖尿病、营养不良、透析不充分、残余肾功能丧失、腹膜高转运状态、炎症状态等是腹透转归不良的危险因素。

血清降钙素原对血液透析患者导管相关性感染的诊断价值

目的探讨血清降钙素原(PCT)在血液透析患者导管相关性感染中的变化及诊断价值。方法收集医院自2010年3月-2013年3月137例行颈内静脉留置长期导管的血液透析患者,根据导管是否感染分为3组:全身感染组45例和局部感染组47例和未感染组45例;全身感染组患者均采集外周静脉血和颈内静脉长期置管的导管动、静脉端血培养;采用免疫发光法定量测定所有患者血清PCT水平,计算PCT预测脓毒症的敏感性、特异度指标,使用SPSS 17.0软件进行统计分析。结果血液透析合并导管相关性感染患者中,全身感染组患者PCT、CRP水平明显高于局部感染组患者(P<0.01),也明显高于未感染组患者(P<0.01);全身感染组治疗后,血清PCT、CRP和白细胞计数明显下降,与治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.01);全身感染组患者血培养阳性率84.40%,分离革兰阳性菌33株占86.84%,分离革兰阴性菌5株占13.16%;以PCT>2μg/L为诊断脓毒症界限,诊断脓毒症的敏感性为97.80%、特异性为95.70%、阳性预测值是95.60%、阴性预测值是97.70%。结论血清PCT指标能早期正确鉴别血液透析患者合并导管相关性感染引起的全身感染,血清PCT水平高低可作为导管相关性感染是否合并脓毒症的指标以及观察使用抗菌药物疗效的参考依据。

降钙素原在颈内静脉导管相关性感染诊断和治疗中的应用

感染是导致血液透析患者死亡的主要原因之一，研究影响导管相关性感染（catheter—relatedbloodstreaminfections，CRBSI）的危险因素，寻找早期诊断CRBSI的敏感性指标，对降低导管相关性感染所致的脓毒症、改善血液透析患者的远期预后有积极的意义。近年来，血清降钙素原（procalcitonin，PCT）已被作为脓毒症的诊断指标之一。我们通过监测和分析血液透析合并CRBSI患者的血清PCT动态变化，评价PCT的临床应用价值，为血液透析合并CRBSI的诊断和治疗提供指导作用。

松弛素对高糖环境下肾小球系膜细胞分泌细胞外基质的影响及其作用机制研究

目的 观察人松弛素（RLX）对高糖培养人肾小球系膜细胞分泌细胞外基质的影响,初步探讨其可能作用机制.方法 将人肾小球系膜细胞株分组：正常糖组：含5.5 mmol/L葡萄糖;高糖组：含30 mmol/L葡萄糖;松弛素干预组：高糖（30 mmol/L葡萄糖）＋松弛素（10 ng/ml）;α-平滑肌动蛋白（α-SMA）的检测增加TGF-β1阳性对照组,即5.5 mmol/L葡萄糖＋TGF-β1（5μg/L）.CCK-8法检测松弛素对系膜细胞增殖的影响,ELISA法检测细胞上清中Ⅳ型胶原（ColⅣ）、纤连蛋白（FN）的表达.qPCR检测系膜细胞TGF-β1 mRNA表达.免疫印迹技术（Western blot）检测α-SMA表达,确定肾小球系膜细胞表型转化情况.结果 松弛素对正常糖组及高糖组系膜细胞活力均未发现有影响;与正常糖组相比,高糖组各时间点肾系膜细胞分泌ColⅣ、FN显著增加,48 h尤为明显（57.28±0.59 vs 41.85 ±0.03、56.52±0.88 vs 33.80±0.24,P＜0.01）,α-SMA表达增加（P＜0.05）.与高糖组比较,松弛素干预组ColⅣ、FN表达在48 h下降最为明显（47.08±0.03 vs 57.28±0.59、36.16±0.52 vs 56.52±0.88,P＜0.01）,α-SMA表达减少（P＜0.01）,TGF-β1 mRNA表达下降（P＜0.01）.结论 松弛素能抑制高糖培养的系膜细胞分泌细胞外基质,部分作用机制是通过抑制细胞表型转分化及抑制TGF-β1基因表达,具有抗纤维化作用.