三七脂肝丸对非酒精性脂肪性肝病大鼠脂肪酸代谢的影响

目的探讨三七脂肝丸对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠脂肪酸代谢的影响。方法大鼠随机分为正常组、模型组、奥贝胆酸组(0.514 mg/kg)和三七脂肝丸低、中、高剂量组(0.77、1.54、3.08 g/kg),每组8只。除正常组外,其余各组采用高脂饲料喂养12周诱导建立NAFLD大鼠模型。第9周,正常组和模型组灌胃给予去离子水,其余各组分别灌胃给予相应剂量药物,连续4周,给药结束后(第12周末)收集血清和肝、回肠组织样本。生化法检测大鼠血清肝功能、脂质水平及肝组织TG、FFA水平,HE、油红O染色观察肝组织病理学变化,蛋白免疫印迹法检测肝组织FAS、ACC1、SREBP-1c、CD36、SCD-1及回肠组织ZO-1、Occludin蛋白表达。结果与正常组比较,模型组肝指数、血清ALT、AST、TG、TC、LDL-c、FFA水平、肝组织FFA、TG水平升高(P<0.05,P<0.01),血清HDL-c水平降低(P<0.01),肝组织病理可见脂肪变性,伴有炎性细胞浸润,NAS积分和油红O阳染面积比例升高(P<0.01),肝组织FAS、ACC1、SREBP-1c、CD36蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),肝组织SCD-1及回肠组织ZO-1、Occludin蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,三七脂肝丸组上述指标均有改善(P<0.05,P<0.01),其中高剂量作用更佳。结论三七脂肝丸能够改善NAFLD大鼠肝功能、血脂水平、肝细胞脂肪变及肠道黏膜机械屏障损伤,其作用机制可能与调节肝脏脂肪酸摄入、脂肪酸从头合成,降低脂肪酸脂毒性的相关蛋白以及肠道紧密连接蛋白表达有关。

茵陈蒿汤和黄芪汤调控线粒体途径细胞凋亡防治胆汁淤积性肝损伤的比较研究

目的:基于线粒体途径细胞凋亡探讨的茵陈蒿汤和黄芪汤治疗慢性胆汁淤积性肝损伤效应机制的共性和特异性。方法:40只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、茵陈蒿汤组、黄芪汤组,每组10只,除正常组外,其余各组采用α-萘异硫氰酸酯橄榄油溶液灌胃,隔日1次,连续12周,诱导慢性胆汁淤积性肝损伤模型。于第9周首日,给药组分别给予茵陈蒿汤和黄芪汤灌胃,第12周末次给药后收集血清和肝组织样本。检测血清肝功能变化,HE染色观察肝脏组织病理学变化,透射电镜观察肝细胞线粒体形态变化,Western Blot法检测肝组织胆汁酸转运体胆盐输出泵(BSEP)、多药耐药相关蛋白(MRP)2、MRP3以及线粒体途径细胞凋亡相关蛋白细胞色素C(Cyt-C)、半胱氨酸蛋白酶3(Cleaved Caspase-3)、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(Cleaved PARP)、Bax、Bcl-2表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠肝组织病理、线粒体形态均发生改变,血清ALT、AST、ALP活性及TBA、TBIL含量升高,肝组织BSEP、MRP2、MRP3、Bcl-2蛋白表达降低,Cyt-C、Cleaved Caspase-3、Cleaved PARP、Bax蛋白表达及Bax/Bcl-2比值升高(P<0.01);与模型组比较,茵陈蒿汤和黄芪汤均能够改善肝组织病理学和线粒体形态结构,血清ALT、AST活性及TBA、TBIL含量显著降低,肝组织BSEP、MRP2、MRP3、Bcl-2蛋白表达升高,Cyt-C、Cleaved Caspase-3、Cleaved PARP、Bax蛋白表达及Bax/Bcl-2的比值降低(P<0.01,P<0.05)。与茵陈蒿汤组比较,黄芪汤组肝组织BSEP、MRP2、MRP3、Bcl-2蛋白表达显著升高,肝组织Cyt-C、Cleaved Caspase-3、Cleaved PARP、Bax蛋白表达以及Bax/Bcl-2的比值显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论:茵陈蒿汤和黄芪汤治疗慢性胆汁淤积性肝损伤的作用机制均与调控胆汁酸转运体表达、抑制线粒体途径的细胞凋亡、减轻肝细胞损伤密切相关,黄芪汤调控胆汁酸排泌、抑制线粒体途径细胞凋亡的作用优于茵陈蒿汤。

茵陈蒿汤调控脂肪代谢改善代谢相关脂肪性肝病的效应组分及其机制

目的:探索茵陈蒿汤调控代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)的效应组分及其机制。方法:64只雄性C57BL/6J小鼠随机分为8组,除正常组,其余各组采用高脂饲料喂养12周诱导MAFLD小鼠模型。于第9周首日,正常组和模型组给予去离子水灌胃,其余各组分别给予茵陈蒿汤、绿原酸、大黄多糖、没食子酸、栀子苷及组分复方灌胃,第12周末收集血清和肝组织样本。检测血清肝功能、血脂及肝组织甘油三酯(TG)变化;HE、油红O染色观察肝脏组织病理学变化;UPLC-TQ-MS定量检测血清、肝组织脂肪酸代谢物谱;蛋白免疫印迹法检测肝组织脂肪代谢相关蛋白及核激素受体蛋白表达。结果:模型组肝组织病理,血清ALT、AST、ALP活性及TC、TG、LDL-c、FFA、HDL-c、肝组织TG含量,血清及肝组织乙酸、棕榈油酸浓度,肝组织脂肪代谢相关因子SREBP-1c、ChREBP、ACC1、FAS、CD36、SCD1及核激素受体FXR、LXRα蛋白表达均发生显著改变(P<0.01)。茵陈蒿汤组及各组分均能不同程度地显著改善MAFLD小鼠相关指标变化(P<0.05,P<0.01),其中绿原酸组、大黄多糖组改善血清及肝组织TG、肝组织ACC1及核受体LXRα蛋白表达效果显著优于茵陈蒿汤组、组分复方组及没食子酸组(P<0.05,P<0.01),栀子苷组对血清脂肪酸代谢、肝组织CD36、SCD-1蛋白表达调控作用显著优于其它组分组(P<0.05,P<0.01),大黄多糖组、栀子苷组显著降低小鼠肝组织ChREBP蛋白表达(P<0.05,P<0.01),而没食子酸组、组分复方组、茵陈蒿汤组进一步显著升高模型小鼠肝组织ChREBP蛋白表达(P<0.01)。结论:绿原酸、大黄多糖、栀子苷是茵陈蒿汤治疗MAFLD的效应组分,其机制在于绿原酸和大黄多糖调控FXR/LXRα信号通路,改善脂肪生成代谢,减少新生脂肪形成;栀子苷通过调控脂肪转运及氧化代谢,减少肝细胞脂肪蓄积。

岩黄连对急性肝内胆汁淤积大鼠的干预作用及胆汁酸转运体表达的影响

目的:观察岩黄连对α-萘基异硫氰酸酯(ANIT)诱导的大鼠急性肝内胆汁淤积的防治作用及其可能作用机制。方法:32只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、岩黄连组、熊去氧胆酸组,分别给予相应药物灌胃,连续7d。造模大鼠于第5天进行ANIT灌胃,诱导急性肝内胆汁淤积模型。HE染色法观察大鼠肝组织病理形态;检测血清肝功能指标;Western blot检测大鼠肝组织胆汁酸转运体MRP2、MRP4、BSEP、NTCP蛋白表达。结果:岩黄连能够减轻模型大鼠肝组织汇管区小叶间胆管增生及炎性细胞浸润,改善肝功能指标(P<0.01,P<0.05),增加模型大鼠肝组织胆汁酸转运体BSEP、NTCP蛋白表达(P<0.01)。结论:岩黄连有效防治ANIT诱导的大鼠急性肝内胆汁淤积,其机制可能与增加肝脏胆汁酸转运体BSEP、NTCP蛋白表达有关。

不同剂量和疗程栀子苷调控慢性胆汁淤积的疗效/肝毒性效应机制

目的:探究不同剂量和疗程栀子苷调控慢性胆汁淤积的疗效/肝毒性关系,解析其肝保护及肝损伤效应机制。方法:80只Wistar大鼠随机分为正常组,模型组,栀子苷低、中、高剂量(55、110、220 mg/kg)组。采用ANIT灌胃12周诱导慢性胆汁淤积大鼠模型,于第9周给予对应剂量栀子苷灌胃,每日1次,分别于干预7、28 d采集标本。观察肝、回肠组织病理学改变;Western blot法检测血清肝功能及肝组织BSEP、NTCP、MRP3、MRP4、FXR、CAR及回肠组织ZO-1、Occludin蛋白表达。结果:与模型组比较,桅子苷低剂量组给药7、28 d,大鼠血清ALT、AST、TBA水平均降低(P<0.01,P<0.05);给药7 d,回肠组织固有层水肿和炎症细胞浸润减轻,回肠组织ZO-1、Occludin和肝组织BSEP蛋白表达升高(P<0.01);给药28 d,回肠组织ZO-1、Occludin蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。栀子苷中、高剂量组给药7、28 d,血清TBIL、DBIL和GGT水平均升高(P<0.05,P<0.01),肝、回肠组织病理损伤加重;给药28 d回肠组织ZO-1、Occludin及肝组织BSEP、FXR、CAR蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),MRP4蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。栀子苷高剂量组给药7、28 d,血清ALB含量均降低(P<0.01);给药28 d,血清ALT、AST活性升高(P<0.05)。结论:不同剂量和疗程栀子苷调控慢性胆汁淤积产生疗效和肝毒性差异的效应机制,与肠黏膜屏障和肝细胞转运功能损伤密切相关。