胎鼠真皮成纤维细胞皮内注射对UV诱导小鼠皮肤光老化的改善作用

目的:探索体外培养胎鼠真皮成纤维细胞(fibroblasts,FBs)皮内注射对小鼠背部光老化皮肤的改善作用。方法:分离培养10只第18.5天(E18.5)BALB/c胎鼠皮肤,体外培养FBs两天;用CM-Dil荧光染料进行活细胞标记,以示FBs注射后在体内存活情况。取BALB/c雄性小鼠20只,随机分为:未处理组5只、模型组5只(紫外线照射)、空白组5只(紫外线照射+注射PBS)、治疗组5只(紫外线照射+注射FBs),通过真表皮厚度及I型前胶原羧基端肽(PICP)的表达量评估胎鼠FBs对皮肤老化的改善作用。结果:胎鼠FBs形态多为梭型或不规则三角形,中央有卵圆形的细胞核,CM-Dil细胞示踪试验显示培养细胞皮内注射后第3天活性最强。治疗组小鼠真皮厚度(243.659±6.214)μm较空白组(126.198±12.352)μm明显增厚,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组PICP浓度(120.357±10.260)ng/mL高于空白组(95.357±13.471)ng/mL,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:胎鼠FBs皮内注射可改善紫外线诱导的小鼠皮肤老化。

异位表达受体蛋白在皮肤病中的研究进展

皮肤能够直接与环境中多种化学物质因素发生反应。除角质形成细胞和黑素细胞上表达的传统信号通路外,一些异位表达的受体蛋白[如嗅觉受体(ORs)和视蛋白(OPN)等]与皮肤生理作用和各项常见疾病均有一定联系。ORs主要存在于鼻内嗅觉神经元的表面,并在人体非嗅觉器官中表达,而OPN在眼外部分器官(视网膜)中大量表达,主要负责色觉(视锥蛋白)和弱光视觉(视紫红质),并参与各项生理机制,上述异位表达的受体蛋白参与了皮肤科临床疾病(银屑病、创伤愈合、脱发、皮肤肿瘤等)的病理发生。

人真皮网状层成纤维细胞在瘢痕疙瘩皮损组织中的表达与分布

目的探讨人真皮乳头层成纤维细胞(Fp)、网状层成纤维细胞(Fr)和肌成纤维细胞(MFB)在瘢痕疙瘩皮损组织中的表达与分布。方法2019年5-12月在武汉大学人民医院皮肤科门诊确诊的15例瘢痕疙瘩患者,男8例,女7例,年龄20~50岁,取皮损组织,以15例年龄匹配的女性乳房整形术正常皮肤组织为对照。采用双重免疫荧光染色法检测成纤维细胞活化蛋白(FAP)、CD90和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在瘢痕疙瘩和正常皮肤组织中的分布。从3例正常皮肤和3例瘢痕疙瘩组织中分离成纤维细胞原代培养,采用10 ng/ml转化生长因子β1(TGF-β1)体外处理两组细胞0~48 h,观察细胞表型的变化,荧光定量RT-PCR和Western印迹检测FAP、CD90和α-SMA mRNA和蛋白表达。两组间差异比较采用t检验。结果免疫荧光结果显示,正常皮肤组织中,FAP+/CD90-细胞主要分布在真皮浅层,FAP-/CD90+细胞集中在真皮深层,CD90+细胞几乎不表达α-SMA;瘢痕疙瘩组织深层可见大量FAP+和CD90+细胞,大量CD90+细胞同时表达α-SMA。双重免疫荧光染色显示,正常皮肤成纤维细胞几乎不表达α-SMA,瘢痕疙瘩成纤维细胞表达α-SMA;TGF-β1处理24 h时,正常成纤维细胞和瘢痕疙瘩成纤维细胞α-SMA+细胞荧光强度(21.058±0.709、27.112±0.097)均高于未处理组(11.312±0.636、21.306±0.464),t值为22.430、13.370,P<0.05。RT-PCR和Western印迹显示,TGF-β1处理48 h时,瘢痕疙瘩成纤维细胞FAP、CD90、α-SMA mRNA相对表达水平(92.610±3.667、1.366±0.105、3.240±0.141)与蛋白表达水平(0.652±0.073、1.046±0.119、0.946±0.117)均高于处理前(均P<0.05)。结论瘢痕疙瘩组织真皮深层的CD90+(Fr)细胞异常增生,提示针对真皮深层异常增殖活跃的FAP-/CD90+(Fr)细胞群进行定向干预可能提高瘢痕疙瘩治疗疗效。