EB病毒抗体及其DNA联合检测在鼻咽癌筛查和早期诊断中的价值

目的探讨EB病毒(EBV)抗体及EBV DNA联合检测在鼻咽癌筛查和早期诊断中的价值。方法收集2011年7月至2014年8月广东省第二人民医院经病理确诊的鼻咽癌患者272例,采用酶联免疫法(ELISA)测定血清RTA-IgG、VCA-IgA和EA-IgA;荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定血浆EBV-DNA。结果四项指标联合检测时,其敏感度最高(99.63%);早期鼻咽癌的阳性率为97.62%(41/42),晚期鼻咽癌的阳性率为100.00%(230/230)。四项指标中任意两项及两项以上指标为阳性的特异性在93.00%以上。结论四项指标联合检测可用于早期鼻咽癌的筛查,任意两项以上指标阳性时应高度怀疑鼻咽癌。

DcR3表达对宫颈癌侵袭和转移的影响及机制研究

目的研究诱饵因子3(decoy receptor 3,DcR3)在宫颈癌细胞株中的表达,并在体内体外探讨其对Caski细胞侵袭转移的影响以及作用机制。方法 Western-blot用于检测DcR3蛋白在He La、Caski宫颈癌细胞株及1株永生化人宫颈上皮细胞H8中的表达水平。胰酶消化呈对数生长期的Caski后铺置6孔板中,采用沉默慢病毒感染Caski,分为sh-DcR3组和sh-NC组,Western-blot检测沉默Caski细胞中DcR3基因的表达后,体外采用boyden实验检测细胞侵袭能力;transwell小室实验检测细胞转移能力;体内实验经尾静脉注射构建宫颈癌裸鼠转移瘤模型,观察DcR3对Caski细胞在裸鼠内转移能力的影响;Western-blot法检测STAT3以及下游蛋白MMP-7的表达情况。结果 Western-blot检测发现DcR3在宫颈癌细胞株Hela(7. 81±0. 11)、Caski(10. 96±0. 14)中的表达显著高于永生化人宫颈上皮细胞H8(1. 00±0. 02)(P <0. 05);沉默Caski细胞中DcR3的表达后,与sh-NC组相比,DcR3蛋白表达量明显降低(P <0. 05),细胞的侵袭和转移能力显著减弱(P <0. 05);尾静脉注射sh-DcR3的裸鼠肺转移灶的个数显著少于sh-NC细胞。STAT3以及下游蛋白MMP-7的表达量显著降低(P <0. 05)。结论 DcR3基因可能是通过调控STAT3/MMP-7信号通路,促进宫颈癌细胞Caski侵袭转移。

连续性静脉-静脉血液滤过对危重型手足口病患儿的临床疗效研究

目的分析连续性静脉-静脉血液滤过(CVVH)对危重型手足口病患儿的临床疗效研究。方法回顾性选取2015年12月至2017年12月该院收治的危重型手足口病患儿48例,根据治疗方法不同分为对照组和观察组。对照组患儿采用常规治疗,观察组在常规治疗基础上联合CVVH治疗,分析两组患儿治疗后的临床效果。结果治疗前,两组患儿炎性因子、脑尿肽(BNP)、去甲肾上腺素(NE)、心率、平均动脉压、左心室射血分数(LVEF)、一氧化碳(CO)、静脉血乳酸水平及细胞免疫功能指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗24、48h时,观察组患儿肿瘤坏死因子-α、转化生长因子β1、白细胞介素10、BNP、NE、心率、平均动脉压、静脉血乳酸水平低于对照组,LVEF、CO水平高于对照组;治疗48h时,观察组患儿CD8+水平低于对照组,CD4^+、CD4^+/CD8^+水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CVVH治疗危重型手足口病可降低炎性细胞因子水平,改善心脏功能,平稳生命体征,提高免疫功能。

多种肿瘤标志物联合检测对乳腺癌诊断的临床意义

目的探讨CA153、CA125及CEA单独及联合检测乳腺癌的临床意义。方法免疫化学分析仪分别检测乳腺癌患者(65例)、乳腺良性疾病组(60例)及正常女性体检者(75例)血清中CA153、CA125及CEA浓度。结果乳腺癌组血清中CA153、CA125及CEA浓度及阳性率显著高于良性疾病组及正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);良性疾病组与正常对照组间无显著性差异;单独检测时CA153灵敏度最高,三种指标联合检测可明显提高乳腺癌诊断的灵敏度。结论 CA153、CA125及CEA联合检测可明显提高乳腺癌诊断的敏感性,对临床早期诊断具有一定的参考意义。

嗜麦芽窄食单胞菌感染分布及药物敏感性分析

目的统计分析医院感染嗜麦芽窄食单胞菌分布特征及耐药情况,为临床控制感染提供依据。方法回顾性分析2011年我院住院患者各类标本中检出的嗜麦芽窄食单胞菌分布及药物敏感情况。结果共检出嗜麦芽窄食单胞菌87株,主要来源是痰液(82.8%),其次胸(腹)腔穿刺液(8.1%);临床分布则以呼吸科(25.3%)、神经外科(17.2%)和ICU(13.8%)多见。该菌对左旋氧氟沙星、复方新诺明敏感率最高,均大于75%。结论嗜麦芽窄食单胞菌对多种抗生素耐药,应严格根据CLSI要求选择进行药敏试验的抗菌药物,并根据药敏结果选用适当药物进行治疗。

沉默miR-345联合5-FU对胃癌MGC803细胞增殖能力及凋亡的影响

目的 观察沉默miR-345联合5-FU对胃癌MGC803细胞增殖及凋亡的影响。方法采用脂质体介导转染miR-345反义寡核苷酸至胃癌细胞MGC803以沉默miR-345表达。应用40μg/ml5-FU单独处理胃癌细胞MGC803或联合miR-345沉默组,克隆形成实验观察细胞的增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡水平。结果脂质体介导转染miR-345反义寡核苷酸至胃癌细胞MGC803可以抑制miR-345的表达;细胞克隆形成实验显示,反义miR-345+5-FU联合组与单独5-FU处理组相比,克隆形成率[(4.29±0.83)%vs(7.68±0.34)%]显著降低(P<0.01);流式细胞凋亡检测表明,反义miR-345+5-FU联合组细胞凋亡率显著高于反义miR-345组、5-FU组(P<0.01)。结论沉默miR-345联合5-FU能抑制5-FU对MGC803细胞增殖能力,并促进其凋亡。

培养法主动免疫治疗不明原因习惯性流产56例

目的探讨淋巴细胞分离后直接注射与经培养后注射对不明原因习惯性流产(UHA)患者进行主动免疫治疗的临床疗效。方法选择124例UHA患者,取患者丈夫或无血缘关系的健康第三者静脉血淋巴细胞于孕前、孕中注射入患者前臂,使之产生主动免疫。124例患者平均分成两组,第1组分离淋巴细胞直接注射;第2组分离淋巴细胞经体外培养5～7 d后注射,获得109例妊娠随访结果。结果经治疗后第1组成功率为91.3%,第2组成功率为91.7%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05),无畸形儿。结论主动免疫治疗UHA的临床疗效显著。培养法可简化疗程,提高效率。

糖类抗原125、细胞角蛋白19片段、癌胚抗原在非小细胞肺癌中的临床应用价值

目的探讨血清标志物糖类抗原125(CA125)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、癌胚抗原(CEA)在非小细胞肺癌(NSCLC)诊断中的临床价值。方法选择该院NSCLC患者130例、肺部良性疾病者80例,以及同期健康体检者90例(健康对照组),检测血清CA125、CYFRA21-1、CEA水平,采用Graph Pad Prism 5绘制ROC曲线,分析单独及联合检测时的诊断效能。结果 CA125、CYFRA21-1、CEA诊断NSCLC的ROC曲线下面积分别为0.836 8、0.842 4、0.785 2。CEA的灵敏度最高,CYFRA21-1的特异度最高;CYFRA21-1和CEA联合检测的准确度高于CA125和CEA。结论 CYFRA21-1和CEA联合检测不仅可用于NSCLC的诊断,还可用于特定病理类型NSCLC的鉴别诊断。

血清标志物pro-GRP、NSE在小细胞肺癌鉴别诊断中的价值

目的探讨血清标志物胃泌素释放肽前体(pro-GRP)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)对小细胞肺癌(SCLC)鉴别诊断的价值。方法选择SCLC患者120例(SCLC组)、非小细胞肺癌(NSCLC)患者130例、良性肺部疾病者80例,以及同期健康体检者90例(健康对照组),检测血清pro-GRP、NSE水平,SPSS13.0进行统计分析,分析各标志物的血清水平和阳性率。Graph-Pad Prism 5进行ROC曲线绘制。结果 SCLC组患者血pro-GRP、NSE水平明显高于NSCLC组、良性肺部疾病组和健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。SCLC组患者血清pro-GRP阳性率(80.00%)高于其他3组,差异有统计学意义(P<0.05)。SCLC组和NSCLC组NSE阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)。pro-GRP、NSE单独及联合诊断SCLC的ROC曲线下面积分别为0.890、0.810和0.915。结论 NSE只能鉴定良恶性肺部疾病,不能鉴定SCLC和NSCLC;pro-GRP既可鉴定良恶性肺部疾病,还可鉴定肺癌的SCLC和NSCLC病理分型;pro-GRP、NSE联合检测对SCLC的鉴别诊断有重要价值。

探讨血清HE4、CA125与TSGF检测对卵巢癌诊断的价值

目的探讨血清人附睾上皮分泌蛋白(HE4)、糖类抗原125(CA125)和肿瘤特异性生长因子(TSGF)检测在卵巢癌诊断中的价值。方法采用ELISA法检测HE4、化学发光法检测血清CA125,全自动生化法检测TSGF水平。采集85例卵巢癌患者、60例卵巢良性肿瘤患者及55例健康体检者血清,分析各标志物单项和联合检测对卵巢癌的诊断价值。结果卵巢癌患者血清HE4、CA125和TSGF水平均明显高于卵巢良性疾病患者组和健康对照组(P<0.05),HE4、CA125和TSGF在卵巢癌组的阳性检出率分别为64.7%、72.9%和77.6%,与良性卵巢肿瘤组和健康对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。在卵巢癌单项标志物检测中,血清TSGF的灵敏度(77.8%)优于CA125、HE4;而血清HE4的特异度最高。HE4和TSGF联合检测的约登指数最高(64.8%)。血清HE4、TSGF联合检测对卵巢癌诊断的敏感度和阴性预测值均高于单项检测,分别为88.2%、82.1%,且高于HE4、CA125联合检测。结论在卵巢癌的早期诊断中血清HE4、TSGF联合检测比血清HE4、CA125联合检测更有意义。

CIK细胞联合树突状细胞治疗恶性肿瘤的研究进展

随着生物技术的发展,对恶性肿瘤进行免疫治疗已成为研究热点,免疫治疗是肿瘤治疗的一种崭新模式,部分已经进入临床应用阶段,并取得了明显的治疗效果,尤其是细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞联合树突状细胞(DC)对恶性肿瘤的治疗显示出良好的效果。本文综述了CIK细胞和DC的一些基础研究现状及近年的临床应用情况。

PPAR-γ对人胰腺癌BxPc-3细胞增殖的影响

目的通过促进人胰腺癌BxPc-3细胞中过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)的表达,分析其对BxPc-3细胞增殖的影响。方法培养BxPc-3细胞,分别给予终浓度为5、10、20、40μmol/L的PPAR-γ激动剂罗格列酮处理细胞,蛋白免疫印迹法检测PPAR-γ蛋白的表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察细胞增殖活性。结果BxPc-3细胞经5、10μmol/L罗格列酮处理后其PPAR-γ表达与对照组比较差异均无统计学意义(P均>0.05),经20、40μmol/L罗格列酮处理后PPAR-γ表达升高,与对照组比较差异有统计学意义(P均<0.05),且40μmol/L罗格列酮组PPAR-γ表达较20μmol/L罗格列酮组升高(P<0.05);BxPc-3细胞给予浓度为5、10μmol/L罗格列酮处理后BxPc-3细胞增殖活性分别为0.60±0.07、0.57±0.06,与对照组的0.62±0.09比较差异均无统计学意义(P均>0.05);经40μmol/L罗格列酮处理后BxPc-3细胞增殖活性为0.30±0.02,低于20μmol/L罗格列酮的0.45±0.03,且2组BxPc-3细胞增殖活性均低于对照组、5μmol/L罗格列酮组和10μmol/L罗格列酮组(P均<0.05)。结论促进PPAR-γ表达可以有效抑制人胰腺癌BxPc-3细胞增殖。

促进PPAR-γ表达对TGF-β1诱导人胰腺癌BxPc-3细胞上皮-间质转化的影响

目的通过促进过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptor-γ,PPAR-γ)的表达,分析其对TGF-β1诱导人胰腺癌BxPc-3细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程的影响。方法培养BxPc-3细胞,予TGF-β1诱导BxPc-3细胞,观察BxPc-3细胞形态学改变,Western blotting检测各组细胞EMT相关标志物,Transwell-matrigel实验检测细胞侵袭能力,建立BxPc-3细胞EMT模型。TGF-β1诱导前加入相应终浓度为5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L的PPAR-γ激动剂罗格列酮预处理,观察细胞侵袭能力的变化;选择20μmol/L、40μmol/L的PPAR-γ激动剂罗格列酮预处理组检测相应的PPAR-γ和EMT相关标志物上皮标记基因E-cadherin蛋白,间质标记基因Vimentin、N-cadherin蛋白的表达。结果BxPc-3细胞在TGF-β1作用下与对照组相比,其细胞形态逐渐变化为长梭形,出现EMT的特征性形态学改变;TGF-β1组穿膜细胞数较对照组差异有统计学意义(P<0.05);且TGF-β1组细胞间质标记基因Vimentin、N-cadherin蛋白表达与对照组相比均明显升高(P<0.05),上皮标记基因E-cadherin蛋白表达较对照组下降(P<0.05)。TGF-β1+20μmol/L、TGF-β1+40μmol/L罗格列酮组穿膜细胞显著低于TGF-β1组(P<0.05),而TGF-β1+5μmol/L、TGF-β1+10μmol/L罗格列酮组穿膜细胞与TGF-β1组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。BxPc-3细胞经TGF-β1作用后PPAR-γ表达较对照组明显下降(P<0.05),而TGF-β1+20μmol/L、TGF-β1+40μmol/L罗格列酮组细胞PPAR-γ表达逐渐升高(P<0.05);TGF-β1+20μmol/L、TGF-β1+40μmol/L罗格列酮组细胞上皮标记基因E-cadherin蛋白表达较TGF-β1组逐渐升高(P<0.05);TGF-β1+20μmol/L、TGF-β1+40μmol/L罗格列酮组细胞间质标记基因Vimentin、N-cadherin蛋白表达与TGF-β1组相比均明显降低(P<0.05),而前两组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论TGF-β1可以诱导人胰腺癌BxPc-3细胞EMT;促进PPAR-γ表达可以有效抑制人胰腺癌BxPc-3细胞EMT及侵袭性。

血清脂蛋白磷脂酶A2对筛查诊断前列腺增生的临床意义

目的探讨血清脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)对良性前列腺增生(BPH)筛查诊断的临床价值。方法选取临床确诊为BPH的65例血清作为BPH组,64例健康男性的血清作为对照组,分别检测两组血清中Lp-PLA2、总前列腺特异性抗原(tPSA)与游离前列腺特异性抗原(fPSA)的水平,并利用ROC曲线分析LpPLA2与F/T值对BPH诊断的特异性与敏感性。结果 BPH组血清中Lp-PLA2、tPSA与fPSA的水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析发现,Lp-PLA2的曲线下面积(AUC)为0.763,95%置信区间(CI)为0.680~0.833;F/T比值的AUC为0.715,95%CI为0.633~0.795;Lp-PLA2联合F/T比值的AUC为0.832,95%CI为0.756~0.892。结论血清Lp-PLA2可作为BPH的筛查指标,且其联合F/T比值对BPH的诊断效果比单项指标效果好。

p27^(kip1)在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的探讨p27kip1在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其临床意义。方法对45例NSCLC患者及40例正常对照者采用免疫组化方法(SP)检测两组患者p27kip1的表达,比较其差异。结果 NSCLC中p27kip1的阳性检出率为46.7%(21/45),p27kip1在NSCLC的表达明显低于正常组患者,两组间差异有统计学意义(P<0.05);NSCLC肿瘤的大小、恶性程度、淋巴结转移等与p27kip1表达降低之间具有相关性(P<0.05),其中肿瘤恶性程度及大小与p27kip1阴性表达呈正相关,而淋巴结转移与p27kip1阴性表达呈负相关,而肿瘤的组织学分类则与其表达无相关性(P>0.05)。结论 p27kip1的表达与NSCLC之间具有密切的关系,其表达缺失与NSCLC肿瘤的大小、恶性程度、淋巴结转移等具有相关性。

非酒精性脂肪性肝病患者外周血TH17/Treg细胞的变化及意义

[目的]探辅助性T淋巴细胞17(TH17)/调节性T淋巴细胞(Treg)动态平衡在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)中的作用,为其防治提供新途径和依据。[方法]选择2017年2月~2018年12月我院诊疗的NAFLD患者92例,另取我院体检中心健康体检者40例作为对照。根据CT影像学肝脂肪变分度标准,将NAFLD患者分为轻度、中度和重度肝脂肪变。流式细胞仪检测外周血TH17和Treg细胞比例。ELISA法检测白细胞介素(IL)-17和IL-10因子表达。[结果]NAFLD组TH17细胞比例为(14.26±2.18)%,显著高于对照组的(7.12±1.26)%(P<0.01),NAFLD组Treg细胞比例为(5.13±0.82)%,显著低于对照组的(6.35±1.04)%(P<0.05),NAFLD组TH17/Treg细胞比值为2.78±0.46,显著高于对照组的1.12±0.15(P<0.01)。NAFLD组IL-17因子表达水平为(22.74±4.62)μg/L,显著高于对照组的(12.52±2.13)μg/L(P<0.01),NAFLD组IL-10因子表达水平为(6.18±1.15)μg/L,显著低于对照组的(8.47±1.54)μg/L(P<0.05),NAFLD组IL-17/IL-10比值为3.68±0.60,显著高于对照组的1.48±0.25(P<0.01)。轻度、中度和重度肝脂肪变NAFLD患者间TH17、Treg细胞比例、TH17/Treg比值、IL-17、IL-10因子表达以及IL-17/IL-10比值间存在显著差异(P<0.05)。[结论]NAFLD患者存在Th17/Treg失衡,其失衡与患者肝脂肪病变的程度密切相关,调整Th17/Treg失衡有望成为NAFLD防治的新思路。