黄芪甲苷和三七的三种有效成分配伍对小鼠脑缺血/再灌注后氧化应激和Nrf2/HO-1途径的影响

目的研究黄芪的主要有效成分黄芪甲苷分别与三七的有效成分人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1配伍对小鼠脑缺血/再灌注后氧化应激和核转录因子E2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2 related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶(heme oxygenase,HO)-1途径的影响。方法C57BL/6小鼠随机分组,连续给药3 d,末次给药1 h后,结扎双侧颈总动脉造成脑缺血20 min,再灌注24 h。测定脑组织丙二醛(malonyldialdehyde,MDA)、一氧化氮(nitric oxide,NO)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽(glutathione,GSH),HO-1mRNA表达,脑组织胞核、胞质Nrf2和全细胞HO-1蛋白表达。结果①脑缺血/再灌注后,脑组织MDA、NO含量明显升高,SOD活性和GSH含量明显降低。黄芪甲苷可降低脑组织MDA、NO含量,人参皂苷Rg1能降低脑组织NO含量。黄芪甲苷+人参皂苷Rg1、黄芪甲苷+人参皂苷Rb1和黄芪甲苷+三七皂苷R1均能明显降低脑组织MDA和NO含量,且黄芪甲苷与人参皂苷Rb1、三七皂苷R1配伍的效应大于人参皂苷Rb1单用和三七皂苷R1单用。②脑缺血/再灌注后,脑组织胞核和胞质中Nrf2蛋白含量及核转位率升高,同时HO-1mRNA和蛋白表达增强。各给药组能不同程度地降低胞质Nrf2蛋白含量,升高胞核Nrf2含量,使Nrf2核转位率升高,且黄芪甲苷+人参皂苷Rg1、黄芪甲苷+人参皂苷Rb1、黄芪甲苷+三七皂苷R1的作用强于各有效成分单用。黄芪甲苷、人参皂苷Rg1、黄芪甲苷+人参皂苷Rg1、黄芪甲苷+人参皂苷Rb1、黄芪甲苷+三七皂苷R1可使脑组织HO-1mRNA和蛋白表达明显增加,黄芪甲苷+人参皂苷Rg1、黄芪甲苷+人参皂苷Rb1、黄芪甲苷+三七皂苷R1脑组织HO-1mRNA和蛋白的增加明显高于各有效成分单用。且黄芪甲苷+人参皂苷Rg1升高胞核Nrf2蛋白、提高Nrf2核转位率的作用强于黄芪甲苷+人参皂苷Rb1,增加HO-1基因和蛋白表达的作用强于黄芪甲苷+人参皂苷Rb1和黄芪甲苷+三七皂苷R1。结论黄芪甲苷分别与三七的3种有效成分配伍可增强其抗脑缺血/再灌注后氧化应激损伤的作用,其作用机制可能与激活Nrf2/HO-1信号途径,促进Nrf2合成和核转位,从而促进下游抗氧化基因HO-1等的表达有关,黄芪甲苷与人参皂苷Rg1配伍的效应更为明显。

黄芪甲苷、人参皂苷Rg_1、Rb_1和三七皂苷R_1抗小鼠脑缺血再灌注氧化应激损伤和促进能量代谢的配伍研究

目的从氧化应激和能量代谢研究黄芪甲苷、人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1抗小鼠脑缺血再灌注损伤的配伍关系,明确其有效的配伍剂量。方法采用L9(34)正交试验法,将C57BL/6小鼠随机分组,连续给药3 d后结扎双侧颈总动脉造成脑缺血20 min,再灌注30 min,测定脑组织三磷酸腺苷(ATP)、还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)含量、丙二醛(Malonaldehyde,MDA)的含量及超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)的活性。结果黄芪甲苷、人参皂苷Rb1、Rg1和三七皂苷R1能增加脑组织中ATP、GSH含量和SOD活性,降低MDA的含量,对脑缺血再灌注后的氧化应激损伤具有抑制作用,改善脑组织能量代谢。4种有效成分配伍具有增强抗脑缺血再灌注损伤的作用。结论 4种有效成分抗小鼠脑缺血再灌注后氧化应激损伤和改善能量代谢的有效配伍剂量为黄芪甲苷40 mg/kg,人参皂苷Rg150 mg/kg,人参皂苷Rb140 mg/kg,三七皂苷R110 mg/kg。

黄芪和三七4种有效成分配伍对小鼠脑缺血再灌注早期抗氧化应激物质活性的影响

目的:观察黄芪和三七的4种有效成分黄芪甲苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1配伍对小鼠脑缺血再灌注早期氧化应激物质活性的影响,并探讨其机制。方法:C57BL/6小鼠随机分组,灌胃给药,连续3d,末次给药1h后,制作脑缺血再灌注模型。取脑组织匀浆,测定脑组织还原型谷胱甘肽(GSH)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)3种抗氧化物质活性的含量。结果:脑缺血再灌注后,脑组织T-AOC能力,T-SOD活性和GSH含量显著降低。4种有效成分配伍、黄芪甲苷+人参皂苷Rg1、黄芪甲苷+人参皂苷Rb1能显著提高脑组织T-SOD活性;黄芪甲苷、4种有效成分配伍、黄芪甲苷+人参皂苷Rg1、黄芪甲苷+人参皂苷Rb1、黄芪甲苷+三七皂苷R1组能显著增加脑组织GSH含量;人参皂苷Rg1、三七皂苷R1、4种有效成分配伍、黄芪甲苷+人参皂苷Rg1、黄芪甲苷+人参皂苷Rb1、黄芪甲苷+三七皂苷R1组显著升高脑组织T-AOC能力。且黄芪甲苷+人参皂苷Rg1、黄芪甲苷+人参皂苷Rb1、黄芪甲苷+三七皂苷R1组升高GSH含量的效应分别大于人参皂苷Rg1,人参皂苷Rb1、三七皂苷R1单用组,升高T-AOC的效应高于黄芪甲苷组和人参皂苷Rb1单用组。4种有效成分配伍组与人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1组比较,脑组织T-SOD活性增加更显著,与黄芪甲苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1组和黄芪甲苷+三七皂苷R1组比较,脑组织GSH含量增加显著,与黄芪甲苷、人参皂苷Rb1组比较,脑组织T-AOC能力增加显著。结论:黄芪甲苷与人参皂苷Rg1,人参皂苷Rb1,三七皂苷R1合用后,能同时提高T-SOD活性、GSH含量和T-AOC能力,对脑缺血再灌注后氧自由基的清除和抗氧化应激损伤具有增强的作用。且对T-SOD的作用主要来自4种有效成分的合用,对GSH的作用主要来自黄芪甲苷,对T-AOC的作用主要来自人参皂苷Rg1和三七皂苷R1。