西南地区男/女儿童血清抗米勒管激素水平医学参考值范围的建立

目的建立西南地区健康体检儿童不同年龄段抗米勒管激素(AMH)的正常参考值区间。方法选取2021年4月至2022年1月该院健康体检儿童(0~16岁)为研究对象,采用化学发光免疫分析法测定血清AMH水平。经筛查最终纳入269例合格儿童的血清AMH值。采用统计学软件SPSS 19.0分析数据,正态分布的计量资料以95%置信区间(95%CI)表示参考范围,非正态分布的计量资料以百分位数法(P_(2.5),P_(97.5))表示,建立正常儿童不同年龄段AMH的医学参考区间。结果男/女新生儿(≤28 d)AMH平均水平分别为83.47、0.14 ng/mL,与出生时间相关性较低;>28 d的男/女童年龄与AMH值明显相关。男童婴儿(>28 d至1岁)、幼儿(>1~3岁)、学龄前(>3~6岁)、学龄期(>6~10岁)及青春期(>10~16岁)的AMH平均水平分别为123.13、145.84、105.88、71.16、26.70 ng/mL(中位数为20.60 ng/mL),女童各年龄段AMH平均水平分别为1.58、1.85、2.53、3.16、2.76 ng/mL。ANOVA检验结果显示,各年龄段AMH结果分布差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功建立西南地区不同年龄段儿童的血清AMH医学参考区间,其可为相关疾病诊疗预后提供依据。

重组质粒pcDNA3-dna J/蛋白Dna J异源免疫诱导Th1和Th17细胞免疫应答抵抗肺炎链球菌感染

目的:探索更有效的肺炎链球菌DNA疫苗和疫苗免疫策略,并探究其中的保护机制。方法:构建重组质粒pcDNA3-dnaJ并表达DnaJ蛋白,实验分别设置重组质粒pcDNA3-dnaJ/蛋白DnaJ免疫小鼠组及单独质粒pcDNA3-dnaJ免疫小鼠组,分别比较肺炎链球菌菌株攻毒后小鼠鼻腔灌洗液细菌载量及生存率,采用ELISA检测免疫小鼠血清抗体效价及炎症因子,流式细胞术分析体外BMDCs激活情况及Th1和Th17细胞免疫应答。结果:质粒pcDNA3-dnaJ免疫3次可诱导血清中抗原特异性抗体的产生,并减少肺炎链球菌攻毒后鼻咽部的细菌载量,但在防止致死性感染方面效果较差。然而,与重复质粒DNA接种三次相比,pcDNA3-dnaJ 1次/DnaJ蛋白加强1次的免疫策略可以显著减少鼻咽中的肺炎链球菌定植,并能够更好的预防致死性感染。此外,与DNA质粒加强免疫相比,DnaJ蛋白加强免疫后可产生更高水平的IFN-γ和IL-17A。结论:重组质粒pcDNA3-dnaJ/蛋白DnaJ异源免疫可能通过活化树突状细胞,进而诱导Th1和Th17细胞免疫应答,抵抗肺炎链球菌感染。

一种具有CaPi矿化外壳的新型肺炎链球菌减毒活疫苗的构建

为构建肺炎链球菌减毒活疫苗SPY1矿化菌,并进一步探究其自身稳定性、热稳定性等生物学特性的改变,本研究以肺炎链球菌D39基因组DNA为模板设计合成构建突变体lyt A基因所需引物,采用插入失活的方法构建SPY1-△lyt A突变株,并以缺陷菌的生长特性以及PCR的方法进行鉴定;将SPY1-△lyt A突变株于富钙环境中培养,用不同浓度的磷酸盐进行滴定,使其形成磷酸钙矿化壳,通过扫描电镜以及直接荧光反应来检测疫苗菌株矿化情况;并将矿化菌株与未矿化菌株同时置于37℃不同时间后通过比较其存活率来评价矿化菌的热稳定性。PCR结果以及细菌长时间不溶解的生长特性表明成功构建了SPY1-△lyt A突变株;扫描电镜以及直接荧光反应结果显示细菌表面形成Ca Pi矿化外壳,并且SPY1-△lyt A-Ca Pi矿化菌具有较好的热稳定性。本研究为肺炎链球菌活菌疫苗的进一步研发奠定了基础。