骨内置入硫酸钙产品的生物相容性与安全性评价

背景:在硫酸钙材料中载入抗生素是制备硫酸钙产品的一个新方向,但此类产品在当前尚没有获得系统的研究,其生物相容性与安全性还需要作深入探究。目的:分析载万古霉素硫酸钙、载庆大霉素硫酸钙骨内置入硫酸钙产品的生物相容性,并评价其安全性。方法:①溶血实验:在兔抗凝血中分别加入载万古霉素硫酸钙浸提液、载庆大霉素硫酸钙浸提液、双蒸水及生理盐水。②微核实验:在小鼠腹腔内分别注射载万古霉素硫酸钙浸提液、载庆大霉素硫酸钙浸提液、环磷酰胺与生理盐水。③急性毒性实验:在小鼠腹腔内分别注射载万古霉素硫酸钙浸提液、载庆大霉素硫酸钙浸提液与生理盐水。④热原实验:通过小鼠耳缘静脉分别注射载万古霉素硫酸钙浸提液、载庆大霉素硫酸钙浸提液。⑤皮内刺激实验:分别在兔的脊柱一侧注射载万古霉素硫酸钙浸提液、载庆大霉素硫酸钙浸提液。⑥肌内埋置实验:分别在兔背部肌肉内置入载万古霉素硫酸钙与载庆大霉素硫酸钙。⑦骨内埋置实验:分别在兔股骨缺损处植入载万古霉素硫酸钙与载庆大霉素硫酸钙。结果与结论:两种硫酸钙产品无溶血反应、遗传毒性反应、急性毒性反应、热原反应与皮内刺激反应,具有良好生物相容性与安全性。

共转录因子CITED1在小鼠骨代谢中的调控作用

目的在体研究CITED1在骨代谢即成骨/破骨平衡中的调节作用,为骨质疏松的治疗提供相应的理论基础。方法利用野生型小鼠(WT小鼠)和构建的CITED1基因敲除小鼠(KO小鼠),显微电子计算机断层扫描(CT)定量测量WT小鼠和KO小鼠股骨长度、骨量和骨皮质以及骨松质厚度等骨骼表型。用ELISA检测骨代谢的血液学相关指标。用RT-qPCR检测骨标志基因的表达,从分子水平探究骨代谢改变的原因。结果 KO小鼠颅骨成骨细胞中CITED1表达极少,表明敲除成功。KO小鼠股骨长度、骨量和骨皮质以及骨松质厚度显著高于WT小鼠。KO小鼠外周血血清中I型原胶原肽(P1NP)、骨钙素(OC)和骨碱性磷酸酶(BALP)浓度均显著高于WT小鼠,而抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的浓度显著低于WT小鼠。RT-qPCR结果显示,KO小鼠颅骨成骨细胞中OC和BALP基因表达较WT小鼠显著增加(P<0. 001);同时,KO小鼠颅骨成骨细胞中抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的表达较WT小鼠显著降低(P<0. 05)。结论小鼠CITED1敲除后可以通过上调OC和BALP基因表达,下调TRAP基因的表达,促进骨形成,抑制骨吸收。

基于CRISPR/Cas9系统的猪内皮细胞UHRF1定向编辑及其对单核细胞趋化蛋白-1影响的研究

目的对基于CRISPR/Cas9系统的猪内皮细胞泛素样含PHD和环指域1(UHRF1)定向编辑进行研究,并分析其对单核细胞趋化蛋白-1表达的影响。方法靶向设计并构建UHRF1基因外显子区域gRNA序列载体,并将其与h Cas9载体共转染猪内皮细胞制备单克隆抗体,并分析单核细胞趋化蛋白-1表达变化。结果本研究共获重组质粒5个,转染后获得细胞株a、细胞株b和细胞株c三株UHRF1蛋白表达极低细胞株;UHRF1蛋白敲除后单核细胞趋化蛋白-1和MMP9、IL1、IL2及Bax蛋白表达分析水平明显降低而Bcl2表达明显升高,且与野生型细胞株相比差异有显著的统计学意义(P<0.05)。结论成功获得基于CRISPR/Cas9系统的猪内皮细胞UHRF1定向编辑,且获得细胞株内单核细胞趋化蛋白-1表达明显降低。

单侧椎弓根钉棒固定单节段腰椎及其邻近节段生物力学研究

目的分析单侧椎弓根钉棒固定对单节段腰椎的生物力学稳定性及其对邻近节段活动度的影响。方法新鲜成人尸体腰椎标本6具,测定L4～5不稳固定节段及其上下邻近节段屈伸、左右侧弯、左右旋转6个方向ROM,按4组顺序依次测试:A组(完整组);B组(模拟L4～5不稳组);C组(单侧椎弓根钉棒固定+椎间单枚cage);D组(双侧椎弓根钉棒固定+椎间单枚cage)。结果L4～5节段除左侧弯外,C组与D组相比各运动方向ROM差异无统计学意义(P>0.05);L3～4、L5～S1节段除左、右侧弯外,C组与D组相比各运动方向ROM差异无统计学意义(P>0.05)。结论单侧椎弓根钉棒固定对单节段腰椎在大部分运动方向上具有与双侧固定相似的即刻稳定性,邻近节段侧弯活动度较双侧固定后更少。

胸椎椎弓根外固定技术的临床应用

应用椎弓根外内固定技术2004/2007年在中山大学附属第三医院骨科治疗34例患者,固定前采用CT加密扫描测量进钉点、进钉点至椎体前缘的深度、进钉角度和直径,固定中椎弓根钉入点为横突尖,进钉方向为平均向头侧倾斜10°～20°、与中线成角30°～40°,顺椎弓根外侧皮质进入椎体,固定后CT加密扫描观察螺钉周围的皮质骨是否完整、是否靠近节段血管、是否穿透皮质骨,评价置入钉的准确性和安全性。34例患者共置入160枚胸椎椎弓根螺钉,固定后CT加密扫描和X射线片观察到148枚(92.5%)螺钉置入准确,12枚(7.5%)螺钉发生错置。实验结果表明,胸椎椎弓根根外内固定与椎弓根内固定相比,具有更宽的置入宽度,更长的螺钉长度,以及更大的内聚角度,具有安全可靠、简单实用等优点,并具有生物力学优越性,是胸椎后路内固定的一种良好选择。

牛淫合剂与阿仑膦酸钠治疗绝经后骨质疏松疼痛的成本-效果分析

目的:采用成本-效果分析比较牛淫合剂与阿仑膦酸钠在治疗绝经后骨质疏松疼痛方面的差异,从药物经济学角度为临床治疗用药提供最佳方案。方法:将64例绝经后骨质疏松症患者随机分为治疗组和对照组,每组32例。治疗组给予口服牛淫合剂治疗,对照组给予口服阿仑膦酸钠片治疗。对2组患者治疗后第2,4周的疼痛改善情况进行评价,成本-效果用药物经济学方法进行分析。结果:1治疗后2组疼痛情况均得到明显改善,改善程度及总有效率相似,差异无统计学意义(P>0.05);2治疗组成本-效果优于对照组,经敏感度分析后结果仍成立。结论:对于改善绝经后骨质疏松症患者的疼痛症状牛淫合剂效果显著,其疗效与阿仑膦酸钠片无明显差异,但牛淫合剂的成本-效果更好,因此对比阿仑膦酸钠片,牛淫合剂能以更小的经济代价获得更大的治疗收益。

牛淫合剂治疗绝经后骨质疏松症及其疼痛的疗效观察

目的:观察具有补肾壮骨、活血化瘀作用的牛淫合剂在治疗绝经后骨质疏松症及其疼痛方面的疗效。方法:将64例患者随机分为两组各32例,观察组予口服牛淫合剂;对照组予口服阿仑膦酸钠片治疗。对治疗后两组患者骨代谢指标、骨密度及疼痛改善情况进行观察,并进行统计学分析。结果:(1)两组患者治疗后骨代谢及骨密度均有明显改善,两组间差异无统计学意义(P>0.05)。(2)治疗后两组患者骨质疏松疼痛均有显著改善,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:对于改善绝经后骨质疏松症患者的骨代谢异常及疼痛症状牛淫合剂有效,其疗效与阿仑膦酸钠片相仿。

经皮椎体后凸成形术治疗骨质疏松性椎体压缩骨折后非手术椎体骨折的原因分析

目的探讨骨质疏松性椎体压缩骨折(osteoporotic vertebral compression fracture,OVCF)行经皮椎体后凸成形术(percutaneous kyphoplasty,PKP)后非手术椎体骨折的相关影响因素。方法回顾性分析2014年1月至2015年12月于深圳市第二人民医院行PKP治疗OVCF的133例(174椎)病人的临床资料,根据有无椎体新发骨折,分为再骨折组与对照组。随访时间为12~18个月,平均为(15.48±2.28)个月,统计分析病人的性别、年龄、身体质量指数(body mass index,BMI)、腰椎骨密度、受伤椎体个数、骨水泥用量、手术入路、骨水泥是否渗透至椎间盘、术后伤椎前缘高度恢复率以及Cobb角恢复率等因素。结果术后28例(21.05%,28/133)病人再发骨折,再骨折组的平均年龄为(76.32±7.59)岁,5例发生骨水泥渗透至椎间盘(17.86%,5/28),腰椎骨密度T值为(-3.60±0.79)SD,椎体前缘高度恢复率为(50.39±1.87)%,Cobb角恢复率为(53.07±3.91)%,以上指标与未再发骨折的病人比较,差异均有统计学意义(P均<0.05)。对以上指标进行多因素Logistic回归分析结果显示仅骨密度与再骨折的发生存在显著相关性(P=0.031)。结论骨密度、年龄、骨水泥向椎间盘渗漏、椎体前缘高度恢复率及Cobb角恢复率是PKP术后出现非手术椎体骨折的相关因素,但术前骨密度是其独立危险因素。

中药牛淫合剂干预骨代谢与骨密度的研究

目的研究牛淫合剂对绝经后骨质疏松症患者骨代谢与骨密度的影响,评价牛淫合剂抗骨质疏松治疗的疗效及可行性。方法选取2014年6月至2015年6月于深圳市第二人民医院骨科就诊的绝经后骨质疏松症患者64例,随机分为研究组32例,予口服牛淫合剂(由牛膝、淫羊藿、狗脊、丹参、仙茅、杜仲组成);对照组32例,予口服阿仑膦酸钠片治疗;两组同时予口服钙尔奇600 mg/d与骨化三醇0.25μg/d作为基础治疗。治疗时间为6个月,并分别于服药前、服药后3个月、服药后6个月采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清中骨特异性碱性磷酸酶(serum bone alkaline phosphatase,BAP)、血清骨钙素(bone gla-protein,BGP)、抗酒石酸酸性磷酸酶5b(tartrate-resistant acid phosphatase isoform-5b,TRACP-5b),于服药前、服药后6个月采用双能X线骨密度仪(dual energy X-ray absorptiometry,DEXA)测量腰椎及髋部骨密度。结果对照组和研究组各发生2例不良反应。研究组和对照组治疗3、6个月后的BAP、BGP、TRACP-5b均较治疗前明显降低,治疗6个月后的骨密度均较治疗前显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.05);研究组与对照组之间各时间点的各项指标比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论牛淫合剂具有抗骨质疏松症的作用,其效果接近阿仑膦酸钠,并可能具有促进成骨及抑制破骨的作用。

网页教案的制作及其在病理教学改革中的应用

为了使学生由被动知识接受者和灌输对象转变为信息加工的主体,从而提高学习效率,我们尝试将网页制作技术与病理教学改革有机结合起来,制作出了一套基于肿瘤病理的网页教案,文章介绍了其设计思路、制作方法及应用效果.

PTH在治疗骨质疏松症及其作用机制的研究进展

随着我国逐渐步入老龄化社会,骨质疏松症及其并发症将给社会带来巨大的负担。甲状旁腺激素(Parathyroid hormone,PTH)是由84个氨基酸组成的直链肽,与传统的抗骨质疏松药物不同,其可以调整骨转换状态,重塑骨小梁,使得骨量增加,降低骨质疏松骨折风险,因此在众多抗骨质疏松药物中备受关注。随着对PTH治疗骨质疏松症的研究不断深入,甲状旁腺相关肽PTHrP、甲状旁腺1型受体PTH1R、胰岛素样生长因子1(IGF-1)等先后被发现在PTH激活PTH1R抗骨质疏松中发挥作用,本文将有关研究进展做一综述。

前路腰椎融合术治疗复发性腰椎间盘突出症的临床效果和安全性分析

目的分析前路腰椎融合术治疗复发性腰椎间盘突出症的临床效果和安全性。方法回顾性研究前路腰椎融合术治疗复发性腰椎间盘突出症患者12例,记录其VAS(visual analogue scale)、ODI(oswestry disability index)、手术节段椎间隙高度、椎间孔高度、椎间隙矢状面Cobb角、腰椎前凸角、椎间融合情况、并发症等。结果患者术后3个月和末次随访的腰痛和腿痛VAS评分及ODI均较术前改善;术后手术节段椎间隙前高度增加3.6 mm(P<0.05);术后手术节段椎间孔高度、矢状面Cobb角和腰椎前凸角均有改善;所有患者椎间植骨融合良好。2名患者发生融合器下沉。结论在严格选择适应证的前提下,前路腰椎融合术应用于复发性腰椎间盘突出症的治疗,效果较好,创伤小,术中出血少,围手术期并发症少,安全性较高。

IL-6,IL-1β及TNF-α与大鼠骨质疏松形成的关系

目的:研究白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与大鼠骨质疏松形成的关系,为研究细胞因子与骨质疏松之间的相关作用机制提供参考。方法:选择2015年1月至2015年11月我院采购的90只雌性大鼠作为研究对象,按照数字随机法将大鼠分成观察组(n=45)以及对照组(n=45)。观察组制成骨质疏松模型,对照组不作处理,对比两组局部骨密度,成骨细胞,骨小梁以及破骨细胞在视野面积中的比例,骨组织相关细胞因子水平,分析IL-6、IL-1β以及TNF-α水平与大鼠骨质疏松的相关性。结果:观察组椎体骨密度(BD)和椎间盘BD以及小关节BD均明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组骨小梁和成骨细胞在视野面积中的比例明显低于对照组,而破骨细胞在视野面积中的比例明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组IL-6和IL-1β以及TNF-α均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。IL-6、IL-1β以及TNF-α水平与大鼠椎体BD、椎间盘BD以及小关节BD均呈明显负相关。结论:去卵巢大鼠的细胞因子与其骨质疏松具有紧密联系,表现在IL-6、IL-1β以及TNF-α水平与大鼠椎体BD、椎间盘BD以及小关节BD均呈明显负相关。

阿仑膦酸钠片联合阿法骨化醇胶囊治疗围绝经期骨质疏松的临床研究

目的观察阿仑膦酸钠片联合阿法骨化醇胶囊治疗围绝经期骨质疏松的临床疗效及安全性。方法将56例围绝经期骨质疏松患者随机分为对照组28例和试验组28例。对照组阿法骨化醇每次0.25μg,qd,口服;试验组在对照组治疗的基础上,予以阿仑膦酸钠每次70 mg,qd,口服。比较2组患者的临床疗效、血清水通道蛋白1(AQP1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、骨碱性磷酸酶(BALP)、Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)水平及药物不良反应的发生情况。结果治疗后,试验组和对照组的总有效率分别为92.86%(26/28例)和71.43%(20/28例),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,试验组和对照组的AQP1分别为(23.53±3.02),(30.65±4.31)μg·L^(-1);MMP-2分别为(60.37±8.35),(66.45±8.47)μg·L^(-1);BALP分别为(20.04±2.57),(24.38±3.32)μg·L^(-1);CTX-I分别为(0.75±0.06),(0.83±0.09)ng·L^(-1),差异均有统计学意义(P<0.05)。试验组发生的药物不良反应主要有腹泻和恶心,对照组发生的药物不良反应主要有便秘和恶心。2组患者的药物不良反应发生率均为7.14%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论阿仑膦酸钠片联合阿法骨化醇胶囊治疗围绝经期骨质疏松的临床疗效确切,能够显著降低患者的血清AQP1、MMP-2、BALP及CTX-Ⅰ水平,且不增加药物不良反应的发生率。

cAMP/PKA/CITED1信号通路介导的甲状旁腺激素在骨代谢中的作用机制

目的在动物整体水平上分析甲状旁腺激素(PTH)对成骨的调节作用,探讨Glu/Asp丰富羧基端域Cbp/p300相互作用反式激活因子1(CITED1)在骨代谢中的调节作用。方法以间断小剂量PTH皮下注射的野生型C57BL小鼠为实验组,同体积生理盐水皮下注射的野生型C57BL小鼠为对照组。处死后取股骨检测小鼠的骨代谢表型,如皮质骨、松质骨的厚度和骨量;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测量小鼠血清中Ⅰ型原胶原肽(PⅠNP)、骨钙素(OC)、骨碱性磷酸酶(BALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的浓度。取1日龄野生型C57BL小鼠头盖骨制备颅骨成骨细胞,分别经含PTH(PTH处理组)、含PTH和蛋白激酶A(PKA)信号通路特异性抑制剂H 89 2HCl(共处理组)及不含此两制剂(未处理组)的培养基培养,Real-time PCR和Western blot检测PTH处理组、共处理组、对照组颅骨成骨细胞中骨代谢相关分子的表达。结果显微CT定量测量结果,实验组小鼠反映皮质骨及松质骨的骨量和骨厚度指标均较对照组明显增高(P <0. 05,P <0. 01)。ELISA检测结果示,实验组小鼠外周血清中PⅠNP、OC、BALP水平较对照组显著增加,TRAP浓度较对照组显著降低(P <0. 01,P <0. 05)。Real-time PCR结果显示,共处理组颅骨成骨细胞OC、碱性磷酸酶(ALP)的mRNA表达较PTH处理组显著下降,TRAP的mRNA表达较PTH处理组增加(P均<0. 01)。Western blot细胞定位结果发现,不用PTH刺激的未处理组,CITED1蛋白均定位于细胞浆中;PTH处理组,CITED1明显转向细胞核;加H 89 2HCl的共处理组CITED1向胞核转移被抑制。结论PTH可能通过cAMP/蛋白激酶A(PKA)信号通路促进共转录因子CITED1出入细胞核,特异性地调节OC及ALP基因的表达,参与骨代谢的调节。

有限元分析在膝关节翻修胫骨缺损修复中的应用

目的探讨有限元分析在膝关节翻修胫骨缺损修复中的应用。方法选取1名正常健康男性志愿者，25岁，身高170cm，体质量62kg，通过螺旋CT扫描、计算机辅助设计与制造（CAD／CAM）软件，建立三维膝关节翻修胫骨缺损有限元模型。建立胫骨平台内侧5．0、7．5、10．0、12．5和15．0mm高的5种不同楔形及块形骨缺损，分别模拟采用骨水泥（水泥固定组）、骨水泥强化螺钉（水泥强化组）和金属垫片（金属垫片组）修复不同骨缺损。受力和边界条件模拟体内膝关节受力情况。通过有限无应力分析比较骨一水泥界面之间位移，以及界面间骨水泥的受力情况。结果当骨缺损高度为12．5、15．0Ii＇lnl时，水泥固定组和水泥强化组的相对位移超过松动的阈值，即〉150Ixm；当骨缺损的高度为7．5、10．0mm时，水泥固定组的位移〉150μm，但水泥强化组的位移〈150μm；当骨缺损的高度为5．0mm时，所有治疗组的位移均〈150μm。所有治疗组骨水泥的最大剪切力都随着骨缺损的增大而增加。随着骨缺损的减少，水泥强化组的最大剪切力较水泥固定组的剪切力分别提高了21％、16％、11％、9％和7％，而金属垫片组则显示出最小的骨水泥剪切力。结论在膝关节翻修胫骨缺损修复的有限元模型中．当楔形骨缺损高度〉10．0mm时，骨水泥强化螺钉修复发生松动的几率较高；当骨缺损高度〈10．0mm时，骨水泥强化螺钉修复块形骨缺损具有良好的生物力学稳定性。

3D打印技术应用于脊柱个性化椎体定制的实验研究

目的阐述应用3D打印技术制作猪脊柱个性化椎体的过程,探讨3D打印技术在脊柱外科应用的可行性,并为进一步进行人工椎体的生物相容性与生物力学性能测试提供实体。方法通过对20头紫金蓝塘草猪的腰椎进行连续断层CT影像采集,获得猪腰椎DICOM影像数据,将所获得的影响数据导入MIMICS软件中,并应用该软件对断面影像进行修补和擦除,得到满意的3D图像,并以STL格式保存,应用Solid Works软件优化设计具有不同孔隙大小、孔隙率等特征的复杂多孔结构,再通过选择性激光熔化(SLM)技术打印出最终的人工椎体。然后,手术取出猪的整个7节腰椎,并将对应节段置换成人工椎体。观察人工椎体与猪脊柱椎体形态差异及椎体置换后整个腰椎形态变化。结果通过3D打印的人工椎体与手术取出的猪的相应节段椎体形态结构完全相符,置换后脊柱形态与术前未发生明显变化。结论应用3D打印技术能够实现复杂结构的椎体个性化制作,为被破坏的椎体实现个性化人工椎体置换提供新的思路。