红霉素对烟草烟雾刺激下人巨噬细胞TNF-α释放的抑制作用及其机制

目的探讨红霉素对烟草烟雾刺激下人巨噬细胞TNF-α释放的抑制作用及其机制。方法应用佛波酯(PMA)诱导人单核细胞系U937(以下称U937细胞)为巨噬细胞,用0.1%、1%、2.5%的烟草烟雾提取物(CSE)和0.1、1、10μg/mL的红霉素分别作用于巨噬细胞24、48、72 h,筛选对巨噬细胞增殖活性影响最小的红霉素、CSE作用浓度和作用时间。经筛选,选用1μg/mL红霉素溶液和1%CSE溶液、作用时间24 h进行后续实验。将U937细胞诱导分化为巨噬细胞,随机将细胞分为空白对照组、CSE组、CSE+红霉素组、TSA组。空白对照组不予处理;CSE组加入1%CSE溶液孵育24 h;红霉素+CSE组先加入1μg/mL红霉素溶液预孵育24 h,再加入1%CSE溶液孵育24 h;TSA组加入100 ng/mL TSA孵育24 h。收集各组培养液上清,采用ELISA法检测培养液上清TNF-α含量,采用Western blotting法检测各组HDAC1、NF-κB蛋白表达。结果空白对照组培养液上清TNF-α含量为(274.96±182.39)pg/mL,CSE组为(744.46±638.38)pg/mL,红霉素+CSE组为(646.57±603.53)pg/mL(P均<0.05)。与空白对照组比较,CSE组、红霉素+CSE组、TSA组HDAC1蛋白表达降低、NF-κB蛋白表达升高(P均<0.05);与CSE组比较,红霉素+CSE组HDAC1蛋白表达升高,NF-κB蛋白表达降低(P均<0.05);与红霉素+CSE组比较,TSA组HDAC1蛋白表达降低,NF-κB蛋白表达升高(P均<0.05)。结论红霉素能抑制烟草烟雾刺激下巨噬细胞TNF-α释放;其作用机制可能是通过恢复受烟草烟雾抑制的HDAC1蛋白表达,抑制NF-κB蛋白表达,使NF-κB依赖的TNF-α释放减少,继而减轻炎症反应。

沉默信息调节因子1与肺部疾病关系研究进展

肺是重要的呼吸器官,常见的肺部疾病包括有哮喘、慢性阻塞性肺病（chronic obstructive pulmonary disease,OPD）和肺癌等.这些疾病的发病机制及治疗尚有很多不明之处.研究显示,沉默信息调节因子1（sirtuins1,SIRT1）与多种肺部疾病关系密切,参与调控多种肺部疾病的发病、进展,并在治疗中起重要作用.本文就SIRT1与肺部疾病的关系综述如下.

红霉素对烟草烟雾提取物作用下人巨噬细胞释放相关炎症因子的影响

目的:研究红霉素(EM)对烟草烟雾提取物(CSE)作用下人巨噬细胞释放相关炎症因子的影响。方法:体外培养人类单核细胞系U937细胞,在细胞培养液中加入佛波酯(PMA)将其诱导分化为人巨噬细胞。将细胞分为3组:对照组、CSE组、EM+CSE组。CSE组用1%浓度CSE刺激24h,EM+CSE组用1mg/L EM预处理24h后,用1%浓度CSE刺激24h。用液相芯片技术检测各组细胞上清液中嗜酸细胞活化趋化因子(eotaxin)、白介素(IL)-17A、巨噬细胞炎症蛋白(MIP)-1β、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、IL-8、MIP-1α、IL-1β、IL-6含量。结果:CSE显著促进人巨噬细胞释放eotaxin、IL-17A、MIP-1β、MCP-1、IL-8、MIP-1α、IL-1β、IL-6(P<0.05),而EM能抑制CSE引起的上述炎症因子释放增加(P<0.05)。结论:EM可能通过抑制CSE刺激引起的人巨噬细胞释放eotaxin、IL-17A、MIP-1β、MCP-1、IL-8、MIP-1α、IL-1β、IL-6等细胞因子,抑制烟草烟雾暴露相关疾病进展。

血流感染合并肺部感染患者的临床特征、预后及其影响因素

目的探讨血流感染合并肺部感染患者的临床特征、预后及其影响因素。方法纳入164例血流感染合并肺部感染患者。回顾性分析其血流感染类型、血流感染致病菌分布情况、肺部CT表现、基础疾病及其他易感因素、预后。分析影响血流感染合并肺部感染患者预后的影响因素。结果(1)血培养分离的病原体中,革兰阴性菌(46.3%)与革兰阳性菌(42.1%)所占比例相似;最常见的致病菌为凝固酶阴性葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、念珠菌属。(2)45.1%患者为医院获得性血流感染,54.9%患者为社区获得性血流感染。(3)86.0%患者存在基础疾病,主要有血液系统疾病、中枢神经系统疾病、2型糖尿病;61.6%患者存在其他易感因素。(4)革兰阳性菌所致血流感染的患者肺部影像学主要表现为多发团块状、结节状影,边界清楚,伴空洞形成;革兰阴性菌所致血流感染的患者主要表现为多发斑片状、条索状阴影,部分空洞形成,多伴有胸腔积液;真菌所致血流感染的患者则以结节状、斑片状和磨玻璃样改变为主,可伴有坏死空洞形成。(5)经治疗后好转127例(77.4%),预后不良37例(22.6%)。年龄≥60岁、有创机械通气、恶性肿瘤均为患者不良预后的危险因素(均P<0.05)。结论血流感染合并肺部感染的患者血培养出革兰阳性菌比例有上升趋势,不同致病菌的肺部影像学表现各有特点,预后不良的患者比例较高,而患者预后与基础疾病合并情况、侵入性操作、年龄等易感因素有关。

红霉素抑制烟草烟雾提取物诱导人巨噬细胞炎症及其机制的研究

目的:初步探讨红霉素(EM)对烟草烟雾提取物(CSE)诱导的人巨噬细胞炎症的抑制作用及其可能机制。方法:将体外培养的人单核细胞U937用佛波脂(PMA)诱导分化为人巨噬细胞。CCK-8法检测不同浓度、不同时间CSE及EM对细胞活性的影响。细胞分为对照组、CSE组(1%CSE刺激24 h或48 h)、CSE+EM组(1μg/mL EM预孵育24 h或48 h后加1%CSE刺激24 h或48 h)、CSE+核因子(NF)-кB抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)组(20 nmol/L PDTC预孵育24 h或48 h后加1%CSE刺激24 h或48 h)、I型组蛋白去乙酰化酶(HDAC3)抑制剂曲古霉素(TSA)组(100 ng/mLTSA孵育24 h)。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞培养上清中炎症介质白介素(IL)-8浓度,应用凝胶迁移率阻滞实验(EMSA)检测NF-кB的活性,Western blotting法检测HDAC3和NF-кB蛋白表达。结果:与对照组比较,CSE组IL-8浓度、NF-кB转录活性明显增高,HDAC3蛋白表达下降(P<0.05),TSA组HDAC3蛋白表达下降,NF-кB蛋白表达升高;与CSE组比较,CSE+EM组和CSE+PDTC组IL-8浓度、NF-кB转录活性及NF-кB蛋白表达明显下降,HDAC3蛋白表达升高(P<0.05)。结论:EM能够抑制CSE诱导的人巨噬细胞炎症介质IL-8释放,其抗炎活性可能与抑制NF-кB的转录活性和表达以及上调HDAC3表达有关。

地塞米松对烟草烟雾刺激的人巨噬细胞沉默信息调节因子1表达影响的实验研究

目的:探讨地塞米松(DEX)对烟草烟雾提取物(CSE)刺激的人巨噬细胞中沉默信息调节因子1(SIRT1)表达的影响及其机制。方法:体外培养人类单核细胞系U937细胞,用佛波酯将其诱导分化为人巨噬细胞,将细胞分为5组:对照组(Control)、CSE组(CSE)、地塞米松组(DEX)、烟酰胺组(NAM)、吡咯烷二硫氨基甲酸组(PDTC)。CSE组用1%浓度烟草烟雾提取物刺激24 h;地塞米松组用10-6mol/L地塞米松预处理24 h后,用1%浓度CSE刺激24 h;烟酰胺组20 mmol/L浓度烟酰胺孵育24 h;吡咯烷二硫氨基甲酸组用20 nmol/L浓度吡咯烷二硫氨基甲酸孵育24 h。处理后分别用荧光酶标仪检测各组细胞ROS释放水平,ELISA试剂盒检测细胞上清液IL-6的浓度;蛋白印迹实验(Western blot)检测SIRT1和NF-κB蛋白表达。结果:烟草烟雾引起人巨噬细胞释放ROS增加(P <0. 01),促进IL-6释放(P <0. 01),抑制细胞中SIRT1表达以及促进转录因子NF-κB蛋白表达(P <0. 01)。DEX可抑制烟草烟雾诱导的人巨噬细胞上清中IL-6的含量(P <0. 01),降低烟草烟雾暴露引起的人巨噬细胞内ROS释放(P <0. 01);下调烟草烟雾诱导的人巨噬细胞NF-κB的表达(P <0. 01),增强烟草烟雾抑制的人巨噬细胞SIRT1蛋白表达(P <0. 01)。结论:DEX通过抑制CSE引起的ROS释放从而降低CSE对SIRT1的损害,进而抑制NF-κB表达,最终减少炎症介质IL-6释放。