黄鳝载脂蛋白apoAI基因的克隆及序列分析

以黄鳝(Monopterus albus)肝脏为研究材料,提取总RNA,利用同源克隆技术获得了黄鳝的载脂蛋白apoAI基因的部分编码区(GenBank登录号:HQ603782)和3′UTR,其cDNA序列长度为1 145 bp,其中编码区长度为772 bp,编码256个氨基酸。序列同源性分析表明,黄鳝的apoAI基因的氨基酸序列与其他鱼类的apoAI基因的氨基酸序列具有非常高的同源性,是载脂蛋白家族的一个新成员。黄鳝apoAI基因的克隆为进一步深入研究该基因的功能积累了基础资料,在黄鳝育种及医药研制方面具有潜在的应用价值。

黄鳝抗菌肽hepcidin基因大肠杆菌表达载体的构建

[目的]构建黄鳝抗菌肽hepcidin基因大肠杆菌表达载体。[方法]根据Genbank中黄鳝hepcidin基因序列设计引物进行PCR扩增,将测序正确的基因片段连接入载体pET-28a中。[结果]以黄鳝cDNA为模板,扩增出hepcidin基因片段,长度为291 bp,连接到pET-28a上。经PCR扩增、双酶切验证,证实成功构建原核表达载体。[结论]成功构建了黄鳝hepcidin基因大肠杆菌表达载体。

右旋糖酐铁和嗜水气单胞菌感染对泥鳅GSTs活力的影响

以泥鳅为试验材料,利用嗜水气单胞菌和右旋糖酐铁作为诱导刺激物,以不同浓度嗜水气单胞菌菌液和右旋糖酐铁对泥鳅进行腹腔注射,研究病原细菌和金属离子对泥鳅GSTs酶活性的影响。在分别注射病原微生物后02,6,,101,62,44,0,50 h以及注射右旋糖酐铁后12,,3,4,5 d取泥鳅肝胰组织,测定其谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)的活力,并研究其变化规律。结果表明:不同浓度的嗜水气单胞菌对泥鳅GSTs均有诱导作用,2.1×109 cfu.mL-1浓度组对泥鳅GSTs的诱导作用最大,2.1×107和2.1×105 cfu.mL-1浓度组则相对来说诱导作用较小。各处理组GSTs活力在处理后一段时间内达到峰值后逐渐降低到正常水平,实验组的GSTs活力均显著高于对照组。不同浓度的右旋糖酐铁对GSTs的作用不同,低剂量组(10μg.g-1)对GSTs活性有显著性的诱导作用(P<0.05),且在第1天时诱导作用达到最大,随后逐渐降低到正常水平;中剂量组(25μg.g-1)和高剂量组(50μg.g-1)对GSTs活性有一定抑制作用,且在第4天时抑制作用达到最大,但随后逐渐增加而趋近于正常水平。

结直肠癌患者二代测序鉴定微小RNA单核苷酸多态性位点及其对微小RNA功能的影响

目的：探讨微小RNA（ miRNA）相关单核苷酸多态性（ SNP ）与结直肠癌发生发展之间的关系。方法收集30例结直肠癌患者的癌和癌旁组织，提取基因组DNA。将癌和癌旁组织混合，应用NimbleGen私人订制的芯片对685个miRNA基因目的区域进行捕获，经过洗脱扩增处理后，采用二代测序技术对捕获区域进行深度测序，并对测序数据进行分析。结果共鉴定43个miRNA的64个SNPs，其中60个SNPs为新发现。 TargetScan和mirSNP 检测结果显示， hsa-mir-1273-G／A、hsa-mir-548h-3-C／U、hsa-mir-1290-A／G和hsa-mir-1273-C／U突变后，其成熟miRNA的表达量降低。 hsa-mir-1268-U／C、hsa-mir-1268-C／U和hsa-mir-1285-1-U／C突变后其表达量增加。 hsa-mir-376b-C／G、hsa-mir-604-T／C、hsa-mir-1268-T／G 和 hsa-mir-146a-C／G 突变前后的靶基因均发生改变。 mir-146a rs1052918 C＞G突变促进肿瘤的发展。结论 miRNA突变影响肿瘤的发生发展，在无Wnt信号的情况下，hsa-mir-146a突变后导致Wnt信号通路一直处于激活状态，导致细胞无限增殖。

膀胱癌尿液中微小RNA类肿瘤标志物的研究进展

膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤，发病率与复发率居泌尿系统恶性肿瘤的首位。现行诊断的“金标准”膀胱镜检缺乏对未成瘤早期阶段膀胱癌的检测敏感性，且属于有创检查。因此，开发可用于早期诊断及复诊用的高敏感性、高特异性、快捷经济且无创的膀胱癌标志物诊断方法对减轻患者痛苦，提高总体生存率具有一定的临床意义。