豆壳过氧化物酶几种提取方法的比较研究

目的:提高豆壳过氧化物酶酶活力和提取率。方法:对超声波提取法、高压脉冲电场提取法和机械匀浆法提取豆壳过氧化物酶进行比较,研究乙醇沉淀法、丙酮沉淀法和盐析法分离豆壳过氧化物酶的效果。结果:超声波法提取的酶活力远高于高压脉冲电场提取法和机械匀浆法,酶比活力和提取率分别达到7·03U/mg和20·59%,提取效果最佳,其最佳提取温度为35℃,pH为5·2。结论:超声波法和盐析法适用于豆壳过氧化物酶的提取和分离。

豆壳过氧化物酶的酶学性质研究

豆壳过氧化物酶(Soybean Hull Peroxidase,SHP)是从大豆豆壳分离得到的一类重要的氧化还原酶,试验通过缓冲溶液抽提法提纯豆壳过氧化物酶,采用愈创木酚法测定酶活力。结果表明,豆壳过氧化物酶是一种耐高温、耐酸碱的酶,其酶作用的最适温度为35℃,最适pH值为5.2,对愈创木酚和过氧化氢的表观Km值分别为1.53 mmol/L和0.36 mmol/L。常见化合物对豆壳过氧化物酶活性的影响也不尽相同,Fe3+对酶的抑制作用明显,而Mg2+对酶反应有一定的激活作用。