高通量测序解析冰鲜刀鲚细菌群落变化特征

为了研究养殖刀鲚冰鲜保存过程中细菌群落组成及变化情况,采用Illumina Miseq高通量测序方法对冰鲜条件不同贮藏时间(0、3、6、9、12、15、18 d)刀鲚肌肉样本细菌的16S rRNA基因的2个高变区(V3—V4)进行测序,比较其细菌多样性及门、属水平的细菌相对丰度,并进行主成分分析、Heatmap分析以及特定腐败菌分析。结果显示,7组样品细菌分布于40门787属,冰鲜条件下刀鲚肌肉的优势致腐败菌属为假单胞菌、微杆菌属和气单胞菌属。主成分分析显示,刀鲚腐败前后的微生物结构存在差异。Heatmap图分析显示新鲜样本的细菌丰度最大。3组冰鲜贮藏6 d前的样品群落结构较相似。贮藏12 d时常见致腐菌(微杆菌属、假单胞菌属、气单胞菌属)占比显著提高,其细菌的多样性及丰富度最低。随着冰鲜保存时间的延长,刀鲚肌肉的细菌菌落结构产生了动态变化。冰鲜保存6~9 d后刀鲚肌肉的细菌菌落结构变化较大,研究结果可以为预测冰鲜刀鲚货架期提供参考。

台湾泥鳅人工繁殖及早期发育的研究

为了解台湾泥鳅的早期发育情况，对其进行人工催产，使用解剖镜观察并记录其早期发育的形态特征和发育过程。观察结果：台湾泥鳅的受精卵为半黏性卵，膜径约0．9mm；胚胎发育包括受精期、卯裂期、囊胚期、原肠胚期、神经胚期、器官形成期和出膜期等7个阶段；在21℃水温条件下，受精卯约26h孵化出仔鱼，初孵仔鱼长约2．1mm。3日龄仔鱼开口，10～15日龄时鳍条逐渐形成，17日龄时出现鳞片进入稚鱼期。结果表明，台湾泥鳅的早期发育与大鳞副泥鳅较为相似，与泥鳅的早期发育略有不同。

中国明对虾血蓝蛋白C末端片段在毕赤酵母中的表达及其抗菌活性

为研究中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)血蓝蛋白C末端(FcHC-C)的抗菌功能,将血蓝蛋白基因FcHC的2个C末端基因片段连接到毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建酵母表达载体pPIC9K/FcHC-C。该载体经Sal I酶切后,采用PEG法转化毕赤酵母(Pichia pastoris GS115)。转化子经过PCR鉴定后,阳性克隆通过含有G418的YPD平板筛选,获得高拷贝重组子。重组毕赤酵母利用甲醇诱导表达目的基因。经Tricine-SDS-PAGE和Western blot分析结果表明,利用酵母工程菌成功表达了血蓝蛋白C末端片段(rFcHC-C1和rFcHC-C2)。抑菌活性鉴定实验结果显示,重组蛋白rFcHC-C1和rFcHC-C2作为阴离子抗菌肽具有抗真菌和抗细菌的活性。

台湾泥鳅人工繁育技术初步研究

为了探讨台湾泥鳅(Paramisgumus dabryanus ssp.)的人工繁育技术,为该品种在上海的规模化养殖提供理论依据和技术参考,分别对1龄和2龄的台湾泥鳅亲本进行人工催产,并在圆形流水孵化系统中进行了受精卵孵化和仔鱼培育试验。催产素为促黄体素释放激素类似物(LHRH-A_2)和马来酸地欧酮(DOM),剂量为DOM 0.5 mg+LHRH-A_22μg/尾,共催产台湾泥鳅384尾。结果表明:2龄台湾泥鳅在水温22.3℃的效应时间为17 h,催产率为92.7%,受精率为80.8%,获受精卵36.9万粒,孵化率为67%,繁育水花苗约20万尾;1龄台湾泥鳅在水温22.3℃的效应时间为17~21 h,催产率为67.1%,受精率为70.8%,获受精卵34.7万粒,孵化率为57.7%,繁育水花苗约20万尾。仔鱼在容量300 L的循环水孵化桶中培育30 d后,体长约为3 cm。

泥鳅属鱼类遗传多样性的研究进展

分别从表型、染色体、蛋白质、DNA等4个层面概述了泥鳅属鱼类遗传多样性的研究进展,为今后开展泥鳅属遗传育种和种质资源保护方面的研究提供参考。

复合生物保鲜剂对冰鲜菊黄东方鲀微生物多样性变化的影响

为探究4种复合生物保鲜剂对冰鲜菊黄东方鲀的作用效果,测定了菌落总数并采用Illumina Miseq高通量测序方法对复合生物保鲜剂处理的菊黄东方鲀肌肉细菌的16S rRNA基因的2个高变区(V3~V4)进行测序分析。结果显示,复合生物保鲜剂A(0.5%茶多酚+0.2%乳酸链球菌素+0.3%溶菌酶)可使菊黄东方鲀贮藏期间的菌落总数显著降低(P<0.05)。冰鲜18 d时的细菌群落多样性最高,表明复合生物保鲜剂A可将菊黄东方鲀冰鲜保存时间延长到18 d或以上。复合生物保鲜剂B(0.5%茶多酚+0.2%乳酸链球菌素)、C(0.2%乳酸链球菌素+0.3%溶菌酶)和D(0.5%茶多酚+0.3%溶菌酶)可将菊黄东方鲀冰鲜保存时间货架期延长至15 d左右。冰鲜条件下菊黄东方鲀肌肉5组15个样品细菌分布于21门187属,优势菌门分别为变形菌门、放线菌门和厚壁菌门,主要优势菌属包括假单胞菌属、无色杆菌属与红球菌属。复合生物保鲜剂改变了菊黄东方鲀肌肉的群落结构,菊黄东方鲀特定腐败菌可能为假单胞菌属。试验结果为后期开展菊黄东方鲀保鲜技术研究提供了理论参考。

乳酸菌及其代谢产物对刺参幼体肠道菌群和非特异性免疫的影响

以初始体质量为(2.74±0.17)g的刺参(Apostichopus japonicus)为研究对象,在室内养殖池进行60 d饲喂实验,研究饲料中添加乳酸菌制剂和乳酸菌代谢产物对刺参肠道菌群、部分免疫指标及生长的影响。在基础饲料中分别添加乳酸菌制剂和乳酸菌代谢产物各2 mL/m3(按饲养水体折算),配制2种实验饲料。实验结果显示:与对照组比,饲料中添加乳酸菌与乳酸菌代谢产物均显著降低了刺参肠道弧菌数及大肠杆菌数(P<0.05);饲料中添加乳酸菌及其代谢产物能使刺参肠道酸性磷酸酶和碱性磷酸酶活力显著升高,溶菌酶活性有所提升,其中乳酸菌制剂实验组与代谢产物实验组免疫酶活力差异不显著;两实验组刺参的特定生长率显著高于对照组(P<0.05)。上述结果表明,乳酸菌制剂与乳酸菌代谢产物对刺参的肠道菌群平衡、免疫力及生长均具有良好的促进作用,且两者之间差异不显著。

不同水域条件下中华绒螯蟹的形态和元素分布

以江苏省阳澄湖、滆湖、长荡湖和江西省军山湖产的中华绒螯蟹为对象,对其形态和第三步足元素积累特征进行了比较研究。基于17个形态数据的框架测量结果的多元统计分析表明,不同产地的中华绒螯蟹个体形态学差异不显著,很难作为不同水域产地的判别依据。但不同产地中华绒螯蟹第三步足元素积累类型的研究结果显示,检出的12种元素的环境"指纹"特征极显著,产地间判别的准确率可达100%,具有可区别不同水域产中华绒螯蟹的潜力。

可用于水体污染控制的氨氮转化菌筛选及部分降解特性的实验研究

从南京禄口水产养殖基地淡水鱼塘取淤泥作为分离菌株的土源,采用选择性富集培养法,从中分离到能以硫酸铵为氮源的菌株7株,对7个菌株进行氨氮降解实验,它们氨氮转化率分别为14.8%、19.7%、53.4%、94.2%、29.1%、63.5%和41.7%,其中AN-4菌株的转化率最高且生长良好。通过AN-4菌株16S rRNA基因序列分析以及生理生化方法,鉴定此菌株为克雷伯氏菌属(Klebsiellasp.)。对菌株AN-4转化氨氮的特性及温度、pH值、氨氮初始浓度和菌株接种量对其氨氮转化率的影响研究,结果表明,菌株AN-4降解氨氮的最适条件为:温度为30℃和pH值为8.0;当氨氮初始浓度为30mg/L时,AN-4菌株在24 h内的氨氮降解率可达85%以上,且能耐受高达200 mg/L的氨氮浓度;AN-4活化菌液浓度为108cfu/mL,当接种量为3×106cfu/mL时,AN-4菌株在24 h内的氨氮降解率为87.75%。综合上述结果,符合淡水养殖水环境条件,说明AN-4菌株适合在水产养殖中应用,为将菌株AN-4应用于水产养殖环境修复提供了理论依据。

仿刺参饲用海泥资源质量评价的初步研究

试验测定了盐场沉积海泥的有机质含量与主要细菌类群变化等,并与几种已应用于仿刺参育保苗的商品化海泥产品比较,旨在寻找能够客观反映海泥质量的评价指标,为仿刺参饲用海泥资源的开发利用提供理论依据。采用元素分析仪测定海泥总碳、总氮,灼烧法检测有机质,平板计数法计数6类主要细菌类群(异养菌、弧菌、大肠杆菌、乳酸菌、芽孢菌及酵母)的菌落数量。结果表明,目标区域海泥的总碳、总氮与有机质含量与商品化海泥产品相近;经干燥处理后的海泥,其异养菌总量比商品化海泥显著提高,但大肠杆菌菌落无显著差异,弧菌菌落显著降低,乳酸菌、芽孢菌与酵母等有益菌菌落均显著提高。研究表明,盐场沉积物作为仿刺参饲用海泥具有一定的开发价值,但养殖效果有待验证。

循环水系统中养殖蓝鳃太阳鱼试验

为探索适合循环水养殖系统的新品种,将初始体质量为(19.2±4.6)g的蓝鳃太阳鱼共4 000尾在循环水系统中开展了养殖试验。试验结果:经140 d的养殖,试验鱼终末体质量为(103.5±31.4)g,增重率439.1%,特定生长率1.2%,成活率达93.3%。结果表明,蓝鳃太阳鱼在循环水养殖系统中生长良好,完全适应此种养殖模式,可进行进一步开发利用。

盐度变化对糠虾成活率的影响

糠虾（Mysis）属于节肢动物门、甲壳纲、软甲亚纲（Malacostraca）、糠虾目（Mysidacea）。糠虾是鱼类良好的天然饵料,在某些水域是海洋生物链中的重要部分。近几年来,随着大黄鱼、牙鲆、东方!、石斑鱼、海马等名贵鱼类人工养殖的大规模开展,糠虾作为活饵料来源具有很好的应用前景,尤其在育苗期间,它是鱼苗重要的活饵料,对提高苗种的成活率具有重要的意义。本文通过对糠虾的养殖水体盐度的调节,观察其对糠虾成活率的影响。

连续降温对大菱鲆成鱼代谢机能的影响

为了探寻连续降温对大菱鲆（Scophthalmus maximus）成鱼血清、肝脏及肌肉能量代谢等指标的影响,作者将大菱鲆从正常养殖水温18℃快速、连续降温至1℃,并在18℃、13℃、8℃、5℃、3℃和1℃共计6个温度点取血采样,分别测定血清中的总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、血糖（GLU）以及肝脏中的糖原和肌肉中的乳酸等指标。结果发现,随着温度降低,大菱鲆的血清TP浓度呈先下降后升高的趋势,各实验组与对照组无显著差异（P〉0.05）,但在13℃和3℃之间出现显著性差异（P〈0.05）;血清ALB浓度则呈现升高趋势,在3℃时显著高于1℃（P〈0.05）;血清TC浓度呈现升高趋势,且3℃时显著高于18℃（P〈0.05）;GLU浓度呈先降低后升高趋势,且8℃、5℃、3℃实验组浓度显著高于其余实验组（P〈0.05）;尿素浓度呈先降低后升高再降低趋势,且8℃时显著高于1℃（P〈0.05）;肝糖原浓度呈先降低后升高趋势,且8、5、3℃实验组浓度显著高于其余实验组（P〉0.05）;肌肉中乳酸含量呈先升高后降低趋势,且5℃时显著高于18℃（P〈0.05）;其余指标则无显著性差异（P〉0.05）。结果表明：当温度在18-8℃时,降温对大菱鲆体内代谢影响不大;当温度降到8-3℃时,大菱鲆体内开始出现应激反应;当温度继续降低至1℃时,大菱鲆体内的各种代谢基本处于停滞状态。综合分析各温度下的代谢指标得出结论,3-1℃温度区间与大菱鲆的生态冰温点比较接近,可以在此温度区间附近进一步进行无水保活的探索,在保证大菱鲆无水运输可行性的基础上优化经济成本。

上海市鱼菜共生模式发展的瓶颈和对策

传统的水产养殖模式大量消耗水资源与营养要素,容易导致水环境污染,影响鱼类生长发育。鱼菜共生是一种新型的可持续循环性零排放的低碳生产模式,可控制养殖水体污染、维护水体生态平衡、实现水体的良性循环。论文针对鱼菜共生模式的内涵、特点、国内外发展现状和水平等进行简要阐述,通过调研分析上海鱼菜共生的两种典型模式,发现目前上海鱼菜共生模式发展存在前期投资较大、资金回笼较慢,系统设施复杂、运行稳定性不高,土地资源紧张、发展模式受限,复合人才匮乏、养殖经验较少等瓶颈问题,从优化发展环境、提升技术水平、加快示范推广、加大人才培养、拓宽市场渠道等方面提出切实可行的对策建议,以期为上海鱼菜共生模式的进一步发展和推广提供科学参考。

宽体金线蛭人工繁殖技术初步研究

为研究宽体金线蛭的人工繁殖技术,以野外采捕的宽体金线蛭成体作试验材料进行室外繁殖和室内孵化试验,统计其产茧量、空茧数、孵化率。试验结果：约5 000 kg种蛭共产卵茧351.5 kg;当种蛭投入产茧床时的土壤湿度为60%时,产茧量达到最大值;当孵化箱的土壤湿度为40%时,空茧数显著低于湿度为20%、50%、70%的组（P〈0.05）,孵化率显著高于湿度20%、50%、70%组（P〈0.05）,空茧数、孵化率与湿度30%组差异不显著（P〉0.05）。结果表明：宽体金线蛭人工繁殖采用室外繁殖、室内孵化的方案可行。当投入产茧床时,60%的土壤湿度有利于种蛭钻进土壤中产茧,显著提高种蛭的产茧量。孵化箱的土壤湿度控制在30%～40%时,孵化率最高。

三种生物保鲜剂结合冷藏对菊黄东方鲀的保鲜效果

为了研究生物保鲜剂对菊黄东方鲀品质的影响,以菌落总数、挥发性盐基氮及汁液流失率为指标,探讨在4℃贮藏条件下,不同生物保鲜剂(茶多酚、乳酸链球菌素以及溶菌酶)处理对菊黄东方鲀品质的影响。结果表明,在贮藏10 d时,0.5%浓度茶多酚组的菌落总数为4.71 lg(CFU/g),TVB-N值为12.82 mg/100 g,汁液流失率为6.12%。在贮藏15 d时,0.2%浓度乳酸链球菌菌落总数仅为4.44 lg(CFU/g),TVB-N值为13.16 mg/100 g,汁液流失率为6.91%。在贮藏10 d时,0.3%浓度溶菌酶组的菌落总数为4.68 lg(CFU/g),TVB-N值为13.25 mg/100 g,汁液流失率为4.47%。空白组在贮藏10 d时的菌落总数达到5.52 lg(CFU/g),显著高于其他保鲜剂处理组(P<0.05)。空白组汁液流失率显著低于保鲜剂组。结论:0.5%茶多酚、0.2%乳酸链球菌素及0.3%溶菌酶对菊黄东方鲀的保鲜效果均最佳。

鱼菜共生系统中植物根系微生物及氮转化影响因素研究进展

鱼菜共生系统是指水产养殖技术与水耕栽培结合的一种绿色养殖新模式.该系统内的微生物参与不同类型的氮循环,调节养殖水环境,其中植物根系微生物在鱼菜共生系统中同样发挥着重要的作用.在鱼菜共生系统养殖新模式的研究中,由于水生动物、菜种类繁多、环境多变、共生系统设计多样,导致植物根系微生态群落的研究面临巨大的挑战.本文在总结鱼菜共生基本情况的基础上,重点介绍了鱼菜共生系统中根系微生物群落的结构和作用、氮转化的影响因素和微生物群落研究技术手段的研究进展,并提出了4个有关鱼菜共生系统中植物根系微生物的研究方向:(1)开展微生物根定植的研究;(2)探究植物生长促进微生物的作用机制;(3)筛选植物根系优质菌种并加以应用;(4)验证植物生长促进微生物大规模应用的可行性.

池塘鱼菜立体种养系统的微生物群落结构分析

为了解池塘鱼菜立体种养系统中微生物的群落结构特征,探究池塘鱼菜立体种养系统不同组成之间的相互关系,采用Illumina MiSeq高通量测序方法对系统不同组成的微生物16S rRNA V3~V4区进行测序,比较分析了水体、底泥、蕹菜Ipomoea aquatica Forsk根际与根表、暗纹东方鲀Takifugu obscures肠道及凡纳滨对虾Litopenaeus vanname肠道微生物群落多样性及差异。结果表明:池塘鱼菜立体种养系统的6组样品细菌分布于62门1503属,优势菌门包括变形菌门Proteobacteria(27.71%)、放线菌门Actinobacteria(16.37%)、蓝细菌门Cyanobacteria(16.05%)和拟杆菌门Bacteroidetes(10.07%),主要优势菌属包括红球菌属Rhodococcus、葡萄球菌属Staphylococcus、弓形杆菌属Arcobacter、红杆菌属Rhodobacter、硫杆菌属Thiobacillus和支原体属Mycoplasma;水体的优势菌门为放线菌门、变形菌门、蓝细菌门和拟杆菌门,底泥的优势菌门为变形菌门和拟杆菌门,蕹菜根际及根表的优势菌门为变形菌门、蓝细菌门和拟杆菌门,暗纹东方鲀肠道的优势菌门为厚壁菌门Firmicutes、Epsilonbacteraeota、蓝细菌门和拟杆菌门,凡纳滨对虾肠道的优势菌门为放线菌门和变形菌门;池塘鱼菜立体种养系统中的功能性细菌分布略有不同,蕹菜根表硝化细菌的相对丰度显著高于水体、鲀肠道和虾肠道(P<0.05),蕹菜根际反硝化细菌的相对丰度显著高于其他各组(P<0.05),水体和蕹菜根际固氮菌的相对丰度显著高于虾肠道、底泥和鲀肠道(P<0.05)。研究表明,池塘鱼菜立体种养系统的不同组成(底泥、水体、蕹菜根际与根表、养殖对象肠道)由于功能不同微生物群落结构存在较大差异,在蕹菜根际及根表包含有相对丰度较高的硝化细菌、反硝化细菌、固氮菌,有助于促进氮循环,提高系统中氮的利用率,而养殖对象肠道中既有有益菌也有致病菌属。

台湾泥鳅雌雄形态差异分析

台湾泥鳅(Paramisgumus dabryanus ssp.)是中国台湾地区改良的泥鳅养殖新品种,其分类地位暂不明确。从外观上看,台湾泥鳅的雌雄个体形态上存在差异。为了科学识别台湾泥鳅雌雄个体形态特征的差异,通过对采集到的160尾台湾泥鳅的全长、体长、头长、吻长、体高、体厚等25项形态学性状的测定,形成体厚/体长、体高/体长、颌须/头长等24项形态特征的比例性状,采用t检验、主成分分析与判别分析方法对台湾泥鳅雌雄群体的形态特征进行比较。结果显示:(1)t检验表明,24项形态特征的比例性状中,4项差异达到极显著水平(P<0.01),4项差异达到显著水平(P<0.05),其他性状差异不显著;(2)主成分分析表明,5个主成分的累计贡献率达到84.23%,台湾泥鳅雌雄的差异主要集中在头部、躯干部、颌须、体型肥瘦程度以及整体框架轮廓等方面;(3)经逐步判别分析,建立台湾泥鳅雌雄个体的判别函数。雌性(♀):func1=731.96x1+27.02x2+723.92x3-191.44;雄性(♂):func2=671.79x1+37.09x2+695.54x3-178.50,综合判别准确率为71.5%。研究表明,台湾泥鳅雌雄形态指标间差异显著,利用形态指标建立判别函数实现对台湾泥鳅雌雄个体的快速判别具有一定的可行性。

轮虫、卤虫营养强化研究进展

轮虫和卤虫具有丰富的营养价值,是鱼类和甲壳类幼体培育的重要饵料。文章从轮虫和卤虫营养强化剂的选择、营养成分、强化方法和时间等层面概述了该领域的研究进展,可为开展轮虫、卤虫的营养强化以及在水产养殖中的应用提供参考。