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Sindbis病毒的繁殖与宿主细胞BHK—21的凋亡 被引量:8
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作者 张小青 裘霁 +2 位作者 丁明孝 任显辉 邱殷庆 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期165-170,共6页
详细报道了Sindbis病毒诱导BHK-21细胞凋亡的过程,病毒感染6h后即可观测到核染色质的断裂,病毒感染12h后染色质可见明显的凝集,感染后24h DNA电泳出现明显的DNA“阶梯”(DNA ladder)。电镜观察更清楚地显示了凋亡小体形成的某些细节:在... 详细报道了Sindbis病毒诱导BHK-21细胞凋亡的过程,病毒感染6h后即可观测到核染色质的断裂,病毒感染12h后染色质可见明显的凝集,感染后24h DNA电泳出现明显的DNA“阶梯”(DNA ladder)。电镜观察更清楚地显示了凋亡小体形成的某些细节:在染色质凝集处核外膜突起,最后与细胞核分离形成凋亡小体。在此基础上将一段病毒非结构蛋白nsP2基因克隆到真核表达载体pMAMneo中,并得到瞬间表达,在其中一些细胞中出现DNA断裂这一细胞凋亡的基本特征,通过对nsP2氨基酸序列的分析,结合以前的实验结果推测nsP2可能与诱导细胞凋亡直接相关。 展开更多
关键词 病毒 细胞凋亡 Sindbis病毒 繁殖 宿主细胞
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人食管癌细胞核基质的研究 被引量:7
2
作者 陈海滨 邱殷庆 +3 位作者 张锦堃 陈玲 任显辉 杨蕾 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期65-68,I013,共5页
目的 研究人食管癌细胞株 EC1和 EC18的核基质形态及蛋白成分。 方法 应用细胞的选择性抽提、DGD包埋 -去包埋剂电镜制样观察核基质形态 ,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、双向电泳和免疫印迹等分析核基质蛋白成分。 结果 抽提后 ,两种细... 目的 研究人食管癌细胞株 EC1和 EC18的核基质形态及蛋白成分。 方法 应用细胞的选择性抽提、DGD包埋 -去包埋剂电镜制样观察核基质形态 ,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、双向电泳和免疫印迹等分析核基质蛋白成分。 结果 抽提后 ,两种细胞内均存在精细的核基质 -核纤层 -中间丝网架。低分化的 EC1细胞核基质较高分化的 EC18更细密。核基质蛋白电泳显示 ,两株细胞有数种相同的核基质蛋白成分 ,也有各自的特异性核基质蛋白。在免疫印迹分析中 ,使用抗人 Nu MA单克隆抗体检测到两株食管癌细胞中都存在 Nu MA蛋白。 结论 在食管癌细胞中 ,存在特异的核基质蛋白 ,核基质 -核纤层 -中间丝形成一个连续的体系 ,对维持细胞核的完整性和细胞功能起重要作用。 展开更多
关键词 核基质 形态学 食管肿瘤 肿瘤细胞
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VP-16诱导细胞凋亡及其细胞核基质中热休克蛋白表达的研究 被引量:1
3
作者 金梅林 丁明孝 +3 位作者 云径平 张萍 陈约翰 邱殷庆 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期88-92,共5页
目的 研究VP 16诱导HL 6 0细胞凋亡的变化特点以及凋亡细胞及核基质中热休克蛋白 (HSP)表达的变化。 方法 琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞基因组DNA断裂 ;TUNEL法观察凋亡细胞的形态学变化 ;用免疫印迹方法显示凋亡细胞核基质蛋白、细... 目的 研究VP 16诱导HL 6 0细胞凋亡的变化特点以及凋亡细胞及核基质中热休克蛋白 (HSP)表达的变化。 方法 琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞基因组DNA断裂 ;TUNEL法观察凋亡细胞的形态学变化 ;用免疫印迹方法显示凋亡细胞核基质蛋白、细胞总蛋白中HSP表达的差异。 结果 VP 16作用HL 6 0细胞 0 5h出现早期凋亡特征。作用 4h可见明显的DNA梯状条带。与未凋亡的细胞比较 ,凋亡细胞核基质蛋白中HSP70和HSC70表达明显上调 ;VP 16作用 2、3及 4h细胞总蛋白中HSP70的表达随时间延长略显增加 ;诱导 2 2h比诱导 4h时去除VP 16后孵至 2 2h凋亡细胞总蛋白HSP70表达量增强了 3 4倍。 结论  1 HL 6 0细胞早期凋亡形态出现在DNA梯状条带形成之前。 2 凋亡细胞核基质中HSP70、HSC70的表达明显增加 ,经 2、3及 4h作用的细胞总蛋白中HSP70表达差异不显著。这提示细胞凋亡后HSP70的活性位点主要位于核基质上。 3 VP 16作用细胞时间增长至2 2h 。 展开更多
关键词 细胞凋亡 HL-60细胞 核基质蛋白 细胞总蛋白 热休克蛋白
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树突状细胞对LPAK抗人肝癌细胞的促进作用 被引量:5
4
作者 孙劲旅 张锦堃 +2 位作者 陈海滨 程继东 邱殷庆 《中国肿瘤临床与康复》 1998年第6期16-18,共3页
目的观察人血树突状细胞(DC)联合LPAK细胞(L)体外抗人肝癌BEL-7402细胞(B)的杀伤效应,并对死亡细胞进行形态学分析.材料和方法LD组为DC+L+B,L组为L+B,二组均采用L:B为5:1和10:1两种放靶比,应用TUNEL法及杀伤细胞检测技术,比... 目的观察人血树突状细胞(DC)联合LPAK细胞(L)体外抗人肝癌BEL-7402细胞(B)的杀伤效应,并对死亡细胞进行形态学分析.材料和方法LD组为DC+L+B,L组为L+B,二组均采用L:B为5:1和10:1两种放靶比,应用TUNEL法及杀伤细胞检测技术,比较LD和L组的抗肿瘤效应。结果人血DC联合LPAK细胞与单用LPAK细胞的抗肿瘤活性比较,LD组>L组(P<0.01),但二者均能诱导BEL-7402细胞调亡;调亡的肿瘤细胞是TUNEL阳性,在LD组较L组明显增多。结论DC能明显增强LPAK细胞对人肝癌细胞的杀伤活性,但不改变LPAK细胞诱导肿瘤细胞调亡的死亡模式。 展开更多
关键词 树突状细胞 免疫疗法 凋亡 肝脏肿瘤
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PtK2细胞的核骨架—核纤层——中间纤维体系 被引量:1
5
作者 焦仁杰 陈建明 +2 位作者 翟中和 杨蕾 邱殷庆 《实验生物学报》 CSCD 1996年第4期337-349,共13页
本文用选择性系列抽提的方法结合整装细胞电镜技术和DGD包埋-去包埋超薄切片技术,在电镜下清晰地显示了PtK 2细胞的核骨架-核纤层-中间纤维体系的精细结构。处于分裂中期的细胞经抽提后可以看到,染色体残余与中间纤维仍然保持一定的联... 本文用选择性系列抽提的方法结合整装细胞电镜技术和DGD包埋-去包埋超薄切片技术,在电镜下清晰地显示了PtK 2细胞的核骨架-核纤层-中间纤维体系的精细结构。处于分裂中期的细胞经抽提后可以看到,染色体残余与中间纤维仍然保持一定的联系。用免疫荧光技术对抽提后的PtK 2细胞进行分析结果表明:其中间纤维能同时与AE1和AE3反应;能与Lamin B反应的单抗可以特异地定位于其核周,而Lamin A(C)的单抗除了与其核纤层蛋白有很强的反应外还与中间纤维有交叉反应。此外,在分裂期细胞中可以看到Lamin A(C)可能与染色体能特异结合;与HeLa细胞不一样。PtK 2细胞的核骨架成份不能与280kD的核骨架蛋白单抗反应。双向电泳结果显示出PtK 2细胞的核骨架-核纤层-中间纤维体系的组成成份与HeLa细胞相比有较大的差异,而且这种差异主要反映在核骨架组份上,TdR的处理也能导致其组份发生变化。 展开更多
关键词 细胞 PtK2细胞 核骨架 核纤层 中间纤维
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三氧化二砷对肝癌细胞系HepG2生长及核基质蛋白的影响 被引量:6
6
作者 于鼎 蔡志明 +2 位作者 朱立元 王子慧 邱殷庆 《华中医学杂志》 2000年第1期10-11,15,F004,共4页
目的 探讨三氧化二砷 (As2 O3)对人肝癌细胞系 Hep G2的生长及核基质蛋白的影响。方法 应用生长指数分析和高分辨 SDS-聚丙烯酰胺凝胶双向电泳比较用 As2 O3处理后的 Hep G2细胞生长及核基质蛋白的改变。结果  As2 O3抑制Hep G2的生... 目的 探讨三氧化二砷 (As2 O3)对人肝癌细胞系 Hep G2的生长及核基质蛋白的影响。方法 应用生长指数分析和高分辨 SDS-聚丙烯酰胺凝胶双向电泳比较用 As2 O3处理后的 Hep G2细胞生长及核基质蛋白的改变。结果  As2 O3抑制Hep G2的生长 ,双向电泳显示经 As2 O3处理后 Hep G2细胞内出现新的核基质蛋白 ,并且该蛋白是细胞特异性的。结论 核基质蛋白是某些抗癌药物的作用靶子 ,As2 O3抑制肝癌细胞的生长可望用于临床治疗。 展开更多
关键词 三氧化三坤 HEPG2 核基质蛋白 肝肿瘤
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人血树突状细胞联合LPAK细胞体外诱导肝癌细胞株凋亡的形态学观察<英文>
7
作者 孙劲旅 张锦堃 +4 位作者 程继东 陈海滨 邱殷庆 陈建新 何群 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1999年第2期131-137,共7页
研究人外周血树突状细胞(dendritic cell,DC)联合LPAK(lymphokine and PHA activatedkiller)细胞体外诱导人肝癌细胞株BEL-7402凋亡的作用,并进行形态学分析。实验分LD(BEL-7402+LPAK+DC),L(BEL-7402+LPAK),D(BEL-7402+DC)和 B(BEL-7402... 研究人外周血树突状细胞(dendritic cell,DC)联合LPAK(lymphokine and PHA activatedkiller)细胞体外诱导人肝癌细胞株BEL-7402凋亡的作用,并进行形态学分析。实验分LD(BEL-7402+LPAK+DC),L(BEL-7402+LPAK),D(BEL-7402+DC)和 B(BEL-7402)四组,采用中性红摄入比色法检测细胞毒活性,原位末端标记(TUNEL)技术、电镜技术观察细胞的光镜形态和超微结构。结果显示,D组与B组比较吸光度值无显著性差异(P>0.05),即无杀伤活性;LD组与L组比较,细胞毒活性为LD组>L组(P<0.01)。光镜下凋亡的肿瘤细胞呈TUNEL阳性,细胞核染成棕黄色或深棕色,大小不等,形态也不一;电镜下肿瘤细胞核染色质凝聚、固缩和胞质浓缩,凋亡小体多见;少部分LPAK细胞内形成自噬体,发生自噬性凋亡。结论提示,人血DC联合LPAK细胞能有效地诱导肝癌细胞凋亡,在此过程中LPAK细胞同时发生自噬性凋亡。 展开更多
关键词 树突状细胞 肝癌细胞株 BEL-7402 细胞凋亡
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核基质研究现状与展望
8
作者 王子慧 任显辉 邱殷庆 《今日应用医学》 1997年第U07期50-53,共4页
引言Berezney和Coffey首先报导了真核细胞内核基质蛋白的存在。核基质是细胞桩内的一种动态非染色质结构,它调节DNA的功能并提供调控核酸功能活动的场所.近年来研究表明,视网膜母细胞瘤基因产物与棱基质间的互相作用对细胞周期的调... 引言Berezney和Coffey首先报导了真核细胞内核基质蛋白的存在。核基质是细胞桩内的一种动态非染色质结构,它调节DNA的功能并提供调控核酸功能活动的场所.近年来研究表明,视网膜母细胞瘤基因产物与棱基质间的互相作用对细胞周期的调节显得十分重要。核基质蛋白数量庞大且可变化,因化学修饰.浓度或某种新型蛋白出现而使核基质蛋白发生改变, 展开更多
关键词 核基质 形态学 临床应用 特异性DNA
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NUCLEAR MATRIX PROTEIN IN LEUKEMIA CELLS
9
作者 李娟 任显辉 +3 位作者 黄兆伟 金月英 王子慧 邱殷庆 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 1999年第2期125-127,共3页
Objective: To compare the composition of nuclear matrix proteins (NMP) between leukemia cells and normal bone marrow cells. Methods: NMP was isolated by high-salt extraction and identified in acute and chronic myeloge... Objective: To compare the composition of nuclear matrix proteins (NMP) between leukemia cells and normal bone marrow cells. Methods: NMP was isolated by high-salt extraction and identified in acute and chronic myelogenous leukemia cells as well as in the blast phase of chronic leukemia. On SDS-PAGE, NMPs with molecular myelogenous ferment from what were seen in normal bone marrow cells were present in both acute and chronic myelogenous leukemia. Conclusion: Marked changes of NMP, not only in contents but also in compositions, exist in leukemic cells compared with normal bone marrow cells. NMP may serve as a target of chemotherapeutic drug against leukemia. 展开更多
关键词 Leukemia cell Nuclear matrix proteins Bone marrow cells
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ULTRASTRUCTURAL STUDY ON THE INVASION OF RETINAL INNER LIMITING MEMBRANE BY THE MALIGNANT TUMOR CELLS
10
作者 王惠华 邱殷庆 莫自豪 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 1989年第3期14-17,共4页
To observe the process of invasion, retina of rat was used as a model to substitute the inner limiting membrane of retina for the basement membrane. Retina invaded by esophageal carcinoma cells and B16 melanoma cells ... To observe the process of invasion, retina of rat was used as a model to substitute the inner limiting membrane of retina for the basement membrane. Retina invaded by esophageal carcinoma cells and B16 melanoma cells upon the inner limiting membrane was studied by scanning and transmission electron microscopy. The results showed that the inner limiting membrane was destroyed by both kinds of tumor cells. The process of destruction was followed by a series of transformations in the inner limiting membrane, i.e. folding, swelling, thickening, and granular change. The inner limiting membrane was dissolved focally as a result of transformation, and then tumor cells invaded the retina through these dissolved regions. It seems that, as a barrier, the inner limiting membrane plays a similar role as the basement membrane. 展开更多
关键词 ULTRASTRUCTURAL STUDY ON THE INVASION OF RETINAL INNER LIMITING MEMBRANE BY THE MALIGNANT TUMOR CELLS
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人原发性肝细胞癌核基质蛋白的研究 被引量:6
11
作者 吴珊 刘宗石 +4 位作者 邱殷庆 任显辉 杨雷 李晓明 吴秉铨 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期339-341,共3页
目的比较正常肝与原发性肝细胞癌(HCC)核基质蛋白的异同,观察是否有HCC特异性核基质蛋白的存在。方法用双向电泳方法比较了3例正常肝和8例HCC核基质蛋白成分。结果正常肝和HCC的核基质蛋白组成极为相似,但在HCC中... 目的比较正常肝与原发性肝细胞癌(HCC)核基质蛋白的异同,观察是否有HCC特异性核基质蛋白的存在。方法用双向电泳方法比较了3例正常肝和8例HCC核基质蛋白成分。结果正常肝和HCC的核基质蛋白组成极为相似,但在HCC中发现至少有4个HCC的特异性核基质蛋白。其中以分子量为62000、等电点为5.3的蛋白最具代表性,它存在于所研究的8例HCC中。其余3个HCC特异性蛋白亦存在于大多数HCC中。3例正常肝组织中未见有这4个HCC特异性核基质蛋白。结论HCC确实有HCC特异性核基质蛋白的存在,它的发现可能会为HCC的发生、发展、发病机理的研究提供一个新途径。 展开更多
关键词 肝肿瘤 肝细胞癌 核基质蛋白
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白血病细胞核基质蛋白的初步研究 被引量:6
12
作者 李娟 任显辉 +3 位作者 黄兆伟 金月英 王子慧 邱殷庆 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期425-427,共3页
目的比较白血病细胞与正常骨髓细胞核基质成分的差异。方法用高盐法抽取细胞核基质蛋白,SDS-PAGE和WesternBlotting分析和观察了急性粒细胞性白血病和慢性粒细胞白血病慢性期、急粒变期及化疗前后白血病细胞核... 目的比较白血病细胞与正常骨髓细胞核基质成分的差异。方法用高盐法抽取细胞核基质蛋白,SDS-PAGE和WesternBlotting分析和观察了急性粒细胞性白血病和慢性粒细胞白血病慢性期、急粒变期及化疗前后白血病细胞核基质蛋白的改变。结果慢性粒细胞白血病慢性期、急粒变期及急性粒细胞白血病细胞核基质与正常者有明显差异,主要改变是白血病细胞分别在某些区带出现新的核基质蛋白或核基质蛋白含量的增加,慢性粒细胞白血病急性变后与慢性期相比也在某些区带出现新的核基质蛋白或核基质蛋白含量的增加。化疗前后白血病细胞核基质蛋白成分的比较,表现为化疗后核基质蛋白明显减少。结论白血病细胞与正常骨髓细胞相比,核基质蛋白有明显的差异,核基质蛋白成分的改变可能与白血病的发生、发展以及慢性粒细胞白血病的急性变有关,核基质是某些抗癌药物的作用位点。 展开更多
关键词 白血病 核基质蛋白 药物疗法
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树突状细胞联合LPAK细胞体外诱导肝癌细胞株凋亡的形态学研究(英文)
13
作者 孙劲旅 张锦堃 +3 位作者 程继东 陈海滨 邱殷庆 陈建新 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2001年第6期40-45,104-105,共8页
目的 研究人外周血树突状细胞 (DendriticCell,DC)联合LPAK细胞体外诱导人肝癌细胞株BEL 74 0 2凋亡的作用 ,并进行形态学分析。方法 实验分LD、L、D和B四组 ,采用中性红摄入比色法检测细胞毒活性 ,原位末端标记 (TUNEL)技术、电镜技... 目的 研究人外周血树突状细胞 (DendriticCell,DC)联合LPAK细胞体外诱导人肝癌细胞株BEL 74 0 2凋亡的作用 ,并进行形态学分析。方法 实验分LD、L、D和B四组 ,采用中性红摄入比色法检测细胞毒活性 ,原位末端标记 (TUNEL)技术、电镜技术观察细胞的光镜形态和超微结构。结果 D组与B组比较吸光度值无显著性差异 ,即无杀伤活性 (P >0 .0 5) ;LD组与L组比较 ,细胞毒活性为LD组 >L组 (P <0 .0 1)。光镜下凋亡的肿瘤细胞呈TUNEL阳性 ,细胞核染成棕黄色或深棕色 ,大小不等 ,形态也不一 ;电镜下肿瘤细胞核染色质凝聚、固缩和胞质浓缩 ,凋亡小体多见 ;少部分LPAK细胞内形成自噬体 ,发生自噬性凋亡。结论 人血DC联合LPAK细胞能有效地诱导肝癌细胞凋亡 ,在此过程中LPAK细胞同时发生自噬性凋亡。 展开更多
关键词 树突状细胞 肝脏肿瘤细胞 BEL-7402 凋亡
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Nuclear matrix associated protein PML: an arsenic trioxide apoptosis therapeutic target protein in HepG2 cells 被引量:5
14
作者 于鼎 王子慧 +1 位作者 朱立元 邱殷庆 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2003年第1期93-98,共6页
Objective To investigate arsenic trioxide (As 2O 3)-induced apoptosis and the effects on cell nuclear matrix related protein promyelocytic leukaemia (PML). Methods HepG2 cells were cultured in MEM medium and treat... Objective To investigate arsenic trioxide (As 2O 3)-induced apoptosis and the effects on cell nuclear matrix related protein promyelocytic leukaemia (PML). Methods HepG2 cells were cultured in MEM medium and treated with 0.5, 2, 5 and 10 μmol/L As 2O 3 for either 24 h or 96 h at each concentration. In situ terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT) labeling (TUNEL) and DNA ladders were used to detect apoptosis. Confocal microscopy and Western blotting were used to observe the expression of PML. Results The growth rates of HepG2 cells were slower in the As 2O 3 treated than the untreated control group. DNA ladder and TUNEL positive apoptotic cells could be detected in As 2O 3 treated groups. The expression of PML decreased in HepG2 cells with 2 μmol/L As 2O 3 treatment. Confocal images demonstrated that the expression of PML protein in HepG2 cell nuclei decreased after treatment with 2 μmol/L As 2O 3, and micropunctates characteristic of PML protein in HepG2 cell nuclei disappeared after treatment with 5 μmol/L As 2O 3.Conclusions Our results show that arsenic trioxide can significantly inhibit the growth of HepG2 cells in vitro. As 2O 3 induces apoptosis in HepG2 tumor cells in a time and concentration dependent manner. As 2O 3 may degrade the PML protein in HepG2 cell nuclei. The decreased expression of PML in As 2O 3 treated tumor cells is most likely to be caused by apoptosis. Nuclear matrix associated protein PML could be the target of As 2O 3 therapy. 展开更多
关键词 nuclear matrix arsenic trioxide PML protein APOPTOSIS HepG2 cell line
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恶性肿瘤细胞浸润视网膜内界膜的超微结构研究
15
作者 王惠华 邱殷庆 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1989年第1期56-58,共3页
关键词 视网膜 肿瘤浸润力 超微结构
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