裂果薯总皂苷对人肝癌细胞增殖、迁移、凋亡的影响及对正常肝细胞的毒性作用

目的观察裂果薯总皂苷(SFSP)对人肝癌细胞株SMMC-7721增殖、迁移、凋亡的影响及对人正常肝细胞HL-7702的毒性作用。方法取对数生长期的SMMC-7721细胞,分为给药组和对照组(不加SFSP),给药组分别加入0.625、1.25、2.5、5μg/mL的SFSP培养24 h,采用MTT法观察并计算细胞增殖抑制率和IC50;分别以0、2、4、6μg/mL的SFSP作用于SMMC-7721细胞,分别于培养24、48 h采用划痕实验观察细胞迁移能力变化;分别以0、2、4、6μg/mL的SFSP作用于SMMC-7721细胞,培养24 h后采用吖啶橙/溴乙双荧光染色法观察SMMC-7721细胞凋亡情况,免疫荧光法观察细胞形态。取对数生长期的HL-7702细胞,分别加入0、2.5、12.5、25、50、100μg/mL的SFSP,测算细胞增殖抑制率及IC50。结果 0.625、1.25、2.5、5μg/mL的SFSP作用于SMMC-7721细胞24、48、72 h后,细胞增殖受到不同程度的抑制,SFSP对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用呈现时间与剂量依赖性(P均<0.05);SFSP在24、48、72 h时的IC_(50)值分别为3.75、1.56、0.95μg/mL。0、2、4、6μg/mL的SFSP作用于SMMC-7721细胞后,细胞划痕愈合率逐渐减小,凋亡细胞逐渐增多(P均<0.05)。SFSP作用后,SMMC-7721细胞出现皱缩,呈圆形或纺锤形,微管蛋白β荧光强度降低并高度聚集,观察到大量阻滞于分裂周期中的细胞。0、2.5、12.5、25、50、100μg/mL的SFSP作用于HL-7702细胞后,细胞增殖受到不同程度的抑制,SFSP作用24 h的IC50为47.6μg/mL,低于作用于SMMC-7721细胞24 h时的IC_(50)(3.75μg/mL)。结论 SFSP可抑制SMMC-7721细胞增殖与迁移,诱导其凋亡,阻滞其细胞周期,且对正常肝细胞毒性作用较小。

对广西壮药酸荔枝茎叶皮核化学成分预试验

考察了广西壮药酸荔枝茎、叶、树皮、核的化学成分。通过化学成分系统预试验测得结果,表明茎、叶、树皮、核中可能含有有机酸、鞣质、皂苷、糖、多糖、苷类、氨基酸、多肽、蛋白质、生物碱、酚类、蒽醌类和黄酮类等化学成分,为进步进行广西壮药酸荔枝的生物活性成分研究与发提供实验依据。

裂果薯皂苷的特征图谱及总皂苷中有效组分的抗肿瘤活性研究

采用高效液相色谱紫外及蒸发光散射检测器建立裂果薯总皂苷(SFSP60%)的特征图谱,乙腈-水为流动相梯度洗脱,检测波长203 nm,柱温30℃,流速1 m L/min,进样量10μL。以ELSD色谱图中SFSP60%色谱峰为参照,采用面积归一法计算出裂果薯皂苷Ⅰ(SPHSⅠ)相对百分比为84.28%,裂果薯皂苷Ⅱ(SPHSⅡ)为3.02%,化合物1为2.21%,化合物2为6.31%,化合物3为2.73%,化合物1~3可能是母核类似的皂苷类化合物。取对数生长期的人肝癌SMMC-7721细胞,给药组分别加入0、0.25、0.5、2、4μg/m L的SFSP60%、SPHSⅠ、SPHSⅡ和SPHSⅠ+Ⅱ(SPHSⅠ和SPHSⅡ各占比96.54%、3.46%)培养24 h、48 h、72 h,采用MTT法观察并计算细胞增殖抑制率和IC50。结果显示给药组对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用呈现时间与剂量依赖性(P均<0.05),且活性大小:SFSP60%<SPHSⅠ、SPHSⅡ<SPHSⅠ+Ⅱ。证明在总皂苷中是SPHSⅠ和SPHSⅡ发挥主要抗肿瘤作用,且抗肿瘤作用是各组分共同作用的结果。为裂果薯中有效组分的抗肿瘤活性研究提供了参考以及有效组分的合理配比提供了新思路。

表没食子儿茶素没食子酸酯烷基化衍生物合成及其体外抗癌活性

目的:设计合成表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)烷基化程度较高的衍生物,对其进行简单构效分析,并对衍生物抑制肝癌细胞增殖的药理活性进行初步筛选,旨在选出结构较稳定药效较好的EGCG衍生物。方法:以EGCG,(CH_3CH_2O)_2SO_2为原料,通过乙基化反应合成EGCG衍生物,采用噻唑蓝(MTT)法,细胞密度1×10~8/m L,将EGCG衍生物3,4稀释成4个浓度,对SMMC-7721细胞其质量质量浓度分别为60,80,100,150 mg·L^(-1)和30,40,50,60 mg·L^(-1),对Hep G2细胞其质量浓度为60,80,100,150 mg·L^(-1)和20,30,40,50 mg·L^(-1),作为药物组,并设空白组,每个浓度组设4个复孔,加药后继续培养24 h,测定乙基化EGCG对肝癌细胞SMMC-7721,Hep G2的影响。结果:合成4个EGCG衍生物,其结构通过~1H-NMR,^(13)C-NMR,~2DNMR,质谱等方法进行结构鉴定,均为未见文献报道的新化合物,乙基化EGCG产物3,4对肝癌细胞SMMC-7721,Hep G2增殖均有抑制作用。结论:乙基化EGCG产物3,4对肝癌细胞SMMC-7721,Hep G2均有抑制作用,其中4的抑制作用比EGCG明显增强。