苦丁茶冬青的RAPD影响因素及实验条件的优化

以苦丁茶冬青为材料研究随机扩增多态DNA (RAPD)的影响因素及各种实验条件优化。研究结果表明 :模板DNA的浓度适宜范围为 2 0ng 反应～ 80ng 反应RAPD均可得到一致的结果 ;dNTPs的适宜浓度范围为 2 0 0 μmol L～ 4 0 0 μmol L ;Mg2 + 适宜浓度范围为 1 5mmol L～2 0mmol L ;其合适的复性温度为 35～ 37℃ ;2min的延伸时间 ,4 5次热循环。按照此优化的RAPD条件进行重复实验 ,实验结果重现性良好 ,因而确定了苦丁茶冬青RAPD反应体系之最佳的实验条件。