药用多糖美白淡斑霜制备工艺研究及功能评价

目的:优选药用多糖美白淡斑霜的组方及制剂处方工艺.方法:通过实验观察,采用单因素实验法,测定其最佳黏度和稳定性,进而筛选药用多糖美白淡斑霜最佳处方工艺,收集受试者意见反馈.结果:茯苓、白芷和甘草多糖在浓度达到1 mg·mL^(-1)时,对DPPH自由基的清除效果分别达到了74.96%、69.17%和77.52%;最佳制备工艺为黄原胶5 g、苯甲酸钠0.05 g、柠檬酸0.05 g、甘油10 g、二甲基硅油2 g、单硬脂酸甘油酯1.5 g、葡萄籽油1 g、甜杏仁油1 g、杏桃仁油1 g、十六醇3 g、生育酚2 g、吐温-601.5 g、氯化钠3 g、茯苓多糖0.1 g、白芷多糖0.1 g、甘草多糖0.1 g、白玉兰精油1~2滴、去离子水适量,将水相和油相同时放于80℃水浴加热5 min~10 min,将水相注入油相快速搅拌混合,80℃下进行乳化至凝得霜剂;产品质量评价符合标准;人体试用评价结果优秀.结论:该工艺制得的药用多糖美白淡斑霜质量稳定、外观性状良好,易涂抹,保湿效果、滋润性及美白效果较好.

屠宰生猪胸膜炎的病原检测

在屠宰场内,经常可以看到屠宰生猪存在不同程度的胸膜炎病变。这些胸膜上的炎症往往由胸膜肺炎病变持续感染发展而来。试验从宏观角度上统计屠宰生猪出现胸膜炎病变的发生情况,并对胸膜肺炎病变肺脏进行病原菌的分离鉴定。采用屠宰场胸膜炎评估系统(SPES),选取某集约化生猪养殖场的9个畜群,每个畜群随机抽取200份肺脏样品,进行胸膜炎的评价,并随后检测胸膜肺炎的病原菌。其中不同程度的胸膜炎病例占调查肺脏总数的52.1%。打分SPES>1的病变肺脏比例为24.0%。从胸膜肺炎病变肺脏中分离出胸膜肺炎放线杆菌26株,副猪嗜血杆菌9株,多杀性巴氏杆菌11株和猪链球菌15株。

鸡源沙门菌PFGE分型及耐药性研究

为了解某规模化养鸡场沙门菌的流行情况及耐药现状,对分离于该场的病、死鸡42株沙门菌进行血清型鉴定,K-B药敏纸片法检测分离菌的药物敏感性,采用脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)对分离菌进行PFGE分型研究。结果显示,42株鸡源沙门菌可分为4种血清型,其中以肠炎沙门菌为优势血清型;分离菌对四环素、氨苄青霉素和萘啶酸普遍耐药,耐药率均在60%以上,4重以上耐药菌株占88.9%;42株鸡源沙门菌可分为7个PFGE型,各型间相似性较高,部分型菌株间相似性高达90%以上。结果表明,该养殖场鸡源沙门菌的耐药性普遍存在,且以多重耐药为主,PFGE分型结果表明,该场流行的沙门菌可能是由少数菌株传播引起的。

鸡新城疫病毒的分离鉴定与交叉免疫保护试验

为了评价疫苗免疫保护效果,进而筛选出最佳的免疫方案,将分离到的鸡新城疫病毒(Newcas-tle disease virus,NDV)流行毒株制备成灭活疫苗进行交叉免疫保护试验研究。把采集到的疑似发生新城疫的病鸡肺、气管环等组织经处理后接种10日龄SPF鸡胚进行病毒的分离和增殖,并用血清学和分子生物学方法进行毒株的鉴定;用分离到的NDV/Chicken/TC/1/2011毒株制成油乳剂灭活苗,与La Sota疫苗以不同的疫苗组合免疫SPF鸡,进行交叉免疫保护试验。结果显示,共分离到9株新城疫病毒,其F蛋白裂解位点的氨基酸均为112 R-R-Q-K-R-F117,表现为强毒株的分子特征,与致病指数结果一致。分离株灭活苗组和分离株灭活苗+La Sota弱毒苗对试验鸡的免疫保护力最高,其次是La Sota灭活苗+La Sota弱毒苗和LaSota灭活苗,La Sota弱毒苗对试验鸡的免疫保护力最低。NDV分离株与疫苗株La Sota存在明显抗原性差异,这将对新城疫疫苗的发展和疾病控制策略制定至关重要。

肉鸡源致病性大肠埃希菌中β-内酰胺类抗生素耐药基因的检测

为了解大型肉鸡养殖场致病性大肠埃希菌(Escherichia coli,E.coli)对β-内酰胺类抗生素中的头孢菌素类抗生素的耐药性变化,以及β-内酰胺酶耐药基因的携带情况及耐药基因与耐药性的相关性,从陕西省的部分规模化养鸡场的病、死鸡中分离鉴定并保存108株致病性E.coli。采用K-B药敏纸片法检测致病性E.coli分离株对7种β-内酰胺类药物的药敏性,PCR方法检测3种β-内酰胺酶耐药基因,用DNA Star软件对获得的耐药基因序列与GenBank中的相关序列进行比对。结果显示,鸡源致病性E.coli分离株对头孢派酮、头孢他啶、头孢噻肟、头孢唑啉、头孢曲松、头孢呋肟、头孢噻吩的耐药率分别为83.3%、18.5%、72.2%、92.6%、88.9%、90.1%和95.7%。三重以上耐药菌株占88.9%。β-内酰胺酶基因tem和ctx-m的检出率分别为98.1%和74.1%,未检测到shv基因。结果表明,快大型肉鸡致病性E.coli对β-内酰胺类抗生素的耐药性普遍存在,以多重耐药为主。耐药基因tem和ctx-m的检出率与其耐药性呈正相关。

陕西省avian-like H1N1猪流感病毒的遗传进化分析

【目的】监测陕西省猪流感的流行与传播情况,为猪流感研究提供参考。【方法】从生猪养殖场和屠宰场表观健康猪中随机采取猪鼻/气管拭子样本,经SPF鸡胚分离,对HA阳性样本进行猪流感病毒RT-PCR鉴定。测定分离株全基因序列,通过MEGA4构建基因进化树,并进行遗传变异分析。【结果】从500份样本中分离鉴定出6株H1N1流感病毒,病毒分离率为1.2%。获得6个核苷酸相似性为98.3%—99.1%的分离株全基因序列。遗传进化分析表明6个分离株都位于avain-like H1N1猪流感病毒谱系,与中国江苏,辽宁,山东和香港等地H1N1猪流感病毒株同源性达97%—99%。6个分离株的8个基因片段均在蛋白受体结合位点、潜在糖基化位点等处发生核苷酸变异,这将会影响猪流感病毒的抗原特性、宿主适应性和致病力。【结论】首次从西北地区表观健康猪中分离到H1N1猪流感病毒,并获得6个分离株的全基因序列。遗传进化分析表明,6个分离株为avain-like H1N1猪流感病毒,且多处氨基酸位点发生变异。

灵芝多糖有效成分提取工艺与生物药效分析

灵芝多糖是多孔菌种灵芝属真菌菌丝体的次生代谢产物,存在于灵芝属真菌的菌丝体和子实体中。灵芝多糖是灵芝的最有效成分之一,因此受到科技工作者的特别重视。基于此,列举分析灵芝多糖有效成分提取方法和灵芝多糖的生物作用研究综述。

背角无齿蚌钙调蛋白基因的克隆及Ca^(2+)和Cd^(2+)对其表达的影响

钙调蛋白(CaM)是Ca^(2+)结合蛋白,参与程序性细胞死亡、自噬、肌肉收缩、炎症和免疫应答等多种生物学过程。为探讨Ca^(2+)和Cd^(2+)对背角无齿蚌(Anodonta woodiana)的生理效应,克隆出AwCaM1全基因序列,分析Ca^(2+)和Cd^(2+)对AwCaM1表达的影响。结果显示,背角无齿蚌AwCAM1 cDNA全长由692个碱基组成,包含一个516 bp开放阅读框编码的172个氨基酸的多肽链,AwCaM1氨基酸序列包含有4个Ca^(2+)结合EF-手形结构域。Ca^(2+)处理后,肝胰脏中AwCaM1表达水平在0.01、0.02、0.04和0.08 mg·L^(-1)处理组呈时间和剂量依赖性方式上调;Cd^(2+)处理后,肝胰脏中AwCaM1表达水平在8 mg·L^(-1)和16 mg·L^(-1)处理组增加了65.04%(P<0.01)以上。与对照组相比,Ca^(2+)处理后鳃中AwCaM1表达水平增加了79.41%(P<0.01)以上,Cd^(2+)处理后AwCaM1表达水平增加了88.23%(P<0.01)以上。与对照组相比,外套膜中AwCaM1表达水平在0.16 mg·L^(-1)的Ca^(2+)处理组增加了1.69倍以上(P<0.01),AwCaM1表达水平在8 mg·L^(-1)和16 mg·L^(-1)的Cd^(2+)处理组增加了1.65倍(P<0.01)以上。以上结果表明,Ca^(2+)和Cd^(2+)处理对背角无齿蚌AwCaM1表达水平具有显著的诱导作用,其原因与钙的吸收和胁迫效应有关。

布鲁菌S2疫苗株免疫牛与牛种、羊种布鲁菌自然感染牛ELISA鉴别诊断方法的建立

为建立区分猪种布鲁菌S2疫苗株接种奶牛与布鲁菌自然感染奶牛,BLAST比对分析羊种、牛种、猪种、犬种、沙林鼠种和绵羊种6种布鲁菌基因序列,发现repA-related基因是猪种布鲁菌与牛种及羊种布鲁菌的差异基因。设计引物PCR扩增获得repA-related基因片段,克隆并原核表达得到了布鲁菌repA-related融合蛋白,以repA-related蛋白建立间接ELISA检测方法。用repA-related蛋白间接ELISA检测猪种S2疫苗株接种动物血清为阳性,检测牛种和羊种布鲁菌自然感染动物血清为阴性。repA-related蛋白间接ELISA能从试管凝聚实验(SAT)及常规ELISA检测阳性的奶牛血清样本中,区分出S2疫苗接种牛与牛种布鲁菌感染牛。