基于HPLC指纹图谱和分子对接技术研究清热颗粒治疗上呼吸道感染的物质基础及作用机制

目的:基于HPLC指纹图谱和网络药理学分析清热颗粒治疗上呼吸道感染的物质基础及作用机制。方法:建立清热颗粒的HPLC指纹图谱并进行相似度评价,采用聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)等化学识别模式,筛选出对指纹图谱差异化影响较大的共有峰,并以共有峰中指认出的化学成分开展网络药理学分析;使用Cytoscape软件筛选出清热颗粒治疗上呼吸道感染的核心靶点,结合GO及KEGG富集结果绘制“成分-靶点-通路”网络图,预测清热颗粒的药效成分并分析其作用机制;采用AutoDock Tools软件、CMD命令程序对关键靶点和成分进行分子对接验证。结果:建立了10批清热颗粒的HPLC指纹图谱,相似度大于0.9;CA、OPLS-DA化学识别模式将10批样品分为3类,PCA获得了4个主成分;通过对照品指认了10个共有峰,以其中的7个关键化合物开展网络药理学分析,7个关键化合物可通过多个靶点及通路发挥作用,且核心靶点与相关化合物的对接结合能均小于-5 kcal/mol。结论:清热颗粒可调控ACTB、MMP9、HSP90AA1、CASP3、AKT1、ESR1等核心靶点,调节IL-17、TNF等信号通路从而发挥治疗上呼吸道感染的作用;秦皮乙素、绿原酸、新绿原酸可能是清热颗粒的核心药效成分。

壮药白花蛇舌草水提物对MDA-MB-231乳腺癌裸鼠移植瘤的抑制及免疫调节作用研究

目的观察白花蛇舌草水提物对MDA-MB-231乳腺癌裸鼠移植瘤的抑制及免疫调节作用,并探讨其作用机制。方法取6只正常BALB/c-nu雌性裸鼠作为正常组;取30只BALB/c-nu雌性裸鼠复制MDA-MB-231乳腺癌移植瘤模型,将造模成功裸鼠随机分为模型组、环磷酰胺组及白花蛇舌草水提物低、高剂量组,每组6只。环磷酰胺组给予环磷酰胺25 mg/kg腹腔注射,每7 d注射1次;白花蛇舌草水提物低、高剂量组分别按照1500 mg/(kg·d)、6000 mg/(kg·d)灌胃白花蛇舌草水提物溶液,正常组和模型组灌胃等体积灭菌注射用水,均1次/d。各组均连续干预21 d,监测裸鼠活动状况,每间隔2 d测量1次肿瘤大小。干预结束后,测量体重、瘤重与脾重,计算脾脏指数、抑瘤率;HE染色观察移植瘤的病理学形态;脾淋巴细胞增殖试验评价脾脏中T淋巴细胞和B淋巴细胞的增殖能力;血液分析仪测定外周血中白细胞数目和淋巴细胞占比;ELISA法检测血清中白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;Western blot法测定模型组和白花蛇舌草水提物低、高剂量组裸鼠肿瘤组织中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路蛋白及凋亡相关蛋白[B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱天冬氨酸蛋白酶-7(Caspase-7)、半胱天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)]表达情况。结果与正常组比较,模型组裸鼠脾脏指数、外周血中白细胞数量均明显升高(P均<0.05),脾脏T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖能力指数、外周血淋巴细胞占比及血清中IL-2、IL-6、IFN-γ、TNF-α水平均明显降低(P均<0.05);肿瘤组织中肿瘤细胞密集丰富排列无序,肿瘤细胞异型性明显。与模型组比较,白花蛇舌草水提物高、低剂量组裸鼠脾脏指数、脾脏T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖能力指数、外周血淋巴细胞占比及血清中IL-2、IL-6、IFN-γ、TNF-α水平均明显升高(P均<0.05),瘤重、外周血中白细胞数量均明显降低(P均<0.05);肿瘤组织中肿瘤细胞数目大量减少,细胞凋亡,组织结构破损;肿瘤组织中p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt、mTOR、Bcl-2蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05),Bax、Caspase-7、Caspase-9蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05)。环磷酰胺组裸鼠脾脏指数、瘤重、脾脏T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖能力指数、外周血白细胞数量和淋巴细胞占比均明显低于模型组(P均<0.05);肿瘤组织中肿瘤细胞数量明显减少。结论白花蛇舌草水提物可显著抑制MDA-MB-231乳腺癌裸鼠移植瘤生长,诱导乳腺癌细胞发生凋亡,增强移植瘤裸鼠免疫功能,其机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR通路激活,下调凋亡相关蛋白表达、上调促凋亡蛋白表达相关。

基于TLR4/NLRP3信号通路探讨偏瘫口服液对缺血性脑卒中大鼠的改善作用

目的探讨偏瘫口服液对缺血性脑卒中模型大鼠的改善作用及机制。方法将40只大鼠随机分为假手术组、模型组、银杏叶片组(阳性对照,5.76 mg/kg)和偏瘫口服液低、高剂量组(1.5、6.0 g/kg)。除假手术组外,其余各组均采用改良线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型。造模成功后,各组大鼠分别连续给予相应药物治疗5 d。实验期间,监测大鼠活动并进行神经功能评分;末次给药后,分析脏器指数;采用ELISA法检测脑组织白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;试剂盒法测定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽(GSH)水平;以苏木素-伊红(HE)染色法比较缺血区脑组织病理学特征;通过Western blot法测定大鼠脑组织中凋亡相关蛋白及TLR4/NLRP3信号通路相关蛋白的表达水平。结果相较于假手术组,模型组大鼠神经功能评分、脑指数、脾指数以及脑组织IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA含量均显著升高(P<0.01),而脑组织SOD、GSH水平均显著降低(P<0.01);脑组织出现结构松弛、大量排列不规则空洞、细胞核固缩等典型病变。与模型组比较,偏瘫口服液高剂量组和银杏叶片组大鼠神经功能缺损评分、脑指数、脾指数,以及脑组织IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA水平均显著下降(P<0.05),而脑组织SOD、GSH含量均明显上升(P<0.01),脑组织病理明显改善。与假手术组相比,模型组脑组织中Bax、TLR4、p-NF-κB、NF-κB与NLRP3蛋白表达均显著上调(P<0.01),Bcl-2蛋白表达显著下调(P<0.01);与模型组相比,偏瘫口服液低、高剂量组可有效地逆转上述脑组织损伤的蛋白表达趋势。结论偏瘫口服液对缺血性脑卒中模型大鼠具有良好的治疗作用,其机制可能与调节TLR4/NLRP3信号通路、抑制神经炎症反应和氧化应激相关。

外感止咳颗粒的提取及制备工艺研究

目的:对外感止咳颗粒的提取及制备工艺进行考察。方法:采用正交试验设计,以升麻素苷浓度及干浸膏得率为评价指标。分别对加水倍量、提取时间、提取次数等因素进行考察,优化外感止咳颗粒的提取工艺;以休止角成型率、溶化率为指标,考察了浸膏密度,辅料种类和辅料比例,优选最佳成型工艺。结果:最佳提取工艺为8倍量水,加热回流提取3次,每次1h;最佳成型工艺为稠膏相对密度1.25(80℃),采用乳糖和淀粉作为辅料,浸膏∶乳糖∶淀粉=1∶2.5∶1.5。结论:优选的工艺稳定,合理可行。

缩泉丸配伍机制研究

目的探讨缩泉丸配伍的机制,确定各味药物在方中的作用。方法对缩泉丸进行全拆方研究,分别为正常对照组、模型对照组、缩泉丸全方组、益智仁组、乌药组、山药组、益智仁+乌药组、益智仁+山药组、乌药+山药组。除正常对照组外,各组用D-半乳糖诱导亚急性衰老模型,造模给药后各组用尿动力仪检测膀胱功能,用ELISA法测定与尿液生成相关的水通道蛋白AQP2、神经内分泌激素ALD和ADH的含量。结果缩泉丸全方对模型大鼠尿液生成相关的AQP2、ADH、ALD含量及尿液储存排泄相关的BLPP、ALPP、BC及MVP、PVR、EV都有显著影响(P<0.01),且与各拆方组比较作用最强。单味药比较益智仁作用最强,能提高模型大鼠尿中AQP2含量、升高血清中ALD含量,提高衰老膀胱BLPP、ALPP、MVP、PVR、EV(P<0.01～0.05);乌药对尿液生成方面作用显著,能升高模型大鼠尿中AQP2、血清中ADH含量,能升高衰老膀胱BLPP、MVP、PVR、EV(P<0.01～0.05),与益智仁配伍后增效,能显著增高模型大鼠尿中AQP2含量(P<0.01);山药能显著改善衰老膀胱功能,对模型大鼠BLPP、ALPP、MVP、PVR、EV升高有显著作用(P<0.01),与乌药配伍后药效显著增强,对所测指标均有显著作用(P<0.01～0.05)。结论研究结果与缩泉丸"益智仁为君,乌药为臣,山药为佐"的传统配伍诠释相符。

黄芪破壁粉粒增强免疫功能及抗疲劳作用的研究

目的观察黄芪破壁粉粒对小鼠免疫调节的作用和抗疲劳的作用,并与黄芪饮片进行比较。方法取SPF级KM种小鼠,采用炭粒廓清法、免疫器官质量法测定不同剂量黄芪破壁粉粒的免疫指标;采用小鼠负重游泳实验观察不同剂量黄芪破壁粉粒的抗疲劳作用。结果黄芪破壁粉粒能够增加小鼠吞噬指数、吞噬系数及显著提高小鼠免疫器官指数;并能延长小鼠负重游泳时间。结论黄芪破壁粉粒具有增强小鼠免疫及抗疲劳的作用。与黄芪饮片比较,黄芪破壁粉粒较低剂量即可达到大剂量黄芪饮片的效果。

缩泉丸提取部位的尿动力学研究

【目的】基于尿动力学探讨缩泉丸及其提取物缩尿的作用机制。【方法】采用水提、醇沉、水蒸汽蒸馏法提取缩泉丸。选用SD大鼠以D-半乳糖诱导亚急性衰老模型,随机分为模型对照组、缩泉丸组、水提物组、挥发油组、醇沉物组。造模时间持续8周,第3周开始同时灌胃给予相应药物,空白对照组、模型对照组给予等容积蒸馏水,给药周期为8周。每隔1周对动物进行24 h尿量测定,末次给药后,收集24 h尿液测定水通道蛋白2(AQP2)的含量,最后1周进行5 h水负荷实验。末次给药后对各组大鼠进行尿动力学检测。【结果】与空白对照组比较,模型对照组24 h尿量、5 h水负荷尿量均显著增加,尿中AQP2含量显著减少,膀胱漏尿点压(BLPP)、腹压漏尿点压(ALPP)、最大膀胱排尿压(MVP)显著降低,最大尿道压(MUP)、尿道闭合压(MUCP)显著增加,膀胱顺应性(BC)显著增加(P<0.05或P<0.01)。与模型对照组比较,缩泉丸组及醇沉物组尿量显著降低,缩泉丸组、水提物组、醇沉物组尿中AQP2含量均显著增加,缩泉丸组及水提物组BLPP、MVP均显著升高,BC显著降低(P<0.05或P<0.01);醇沉物组BLPP、ALPP均显著升高(P<0.05或P<0.01)。挥发油组尿动力学各项指标与模型组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。【结论】缩泉丸可改善亚急性衰老大鼠的尿动力学异常,3种提取物中醇沉物的整体效果较好,可能通过其多糖成分改善人体整体功能而起作用。

D-半乳糖致肾虚多尿动物模型研究

【目的】探索D-半乳糖(D-Ga1)致肾虚多尿动物模型的合适剂量,为该种模型应用于衰老所致肾虚多尿证的研究提供参考。【方法】将筛选后的SD大鼠随机分为4组,分别为正常对照组,D-半乳糖125、150、175 mg.kg-1.d-1剂量组;采用D-半乳糖连续注射8周,停止注射后继续观察1周,以24 h总尿量及水负荷5 h后尿量为直接观测指标,同时采用尿动力仪检测膀胱储尿及排尿功能以探索D-Ga1致肾虚多尿动物模型的合适剂量。【结果】从各组大鼠24 h总尿量及水负荷5 h后尿量观察,D-Ga1 150 mg.kg-1.d-1剂量组增加尿量作用更显著。从尿动力参数观察,D-Ga1 150 mg.kg-1.d-1剂量组对大鼠膀胱漏尿点压(BLPP)、腹压漏尿点压(ALPP)、顺应性(BC)、最大膀胱排尿压(MVP)、残余尿量(PVR)、排尿效率(EV)的影响更显著,且其改变趋势与衰老动物尿动力学的变化相符。【结论】D-Ga1 150 mg.kg-1.d-1剂量组在对尿液的生成、膀胱储存及排泄功能的影响方面更符合衰老所致肾虚多尿动物模型的制备。

南部沿海珠海地区儿童过敏性疾病9478项次阳性过敏原谱分析

目的分析南部沿海珠海地区儿童过敏性疾病的过敏原谱,为诊治及预防儿童过敏性疾病提供参考。方法回顾性分析2016年1月~2017年3月珠海市妇幼保健院门诊因过敏临床症状或疑似有过敏原因就诊的2146例患儿,进行食物类与吸入物过敏原皮肤点刺试验(SPT),阳性结果共9478项次,按年龄(<1岁、1~<3岁、3~<6岁、6~14岁)和季节(春、夏、秋、冬)分组,分析南部沿海珠海地区儿童过敏性疾病过敏原谱的流行特点。结果9478项次阳性SPT结果中(食物类20种、吸入类11种),食物类阳性占比为72.23%,吸入类阳性占比为27.77%。食物类阳性过敏原前9位顺位:牛奶、鸡蛋、小虾、鸡蛋清、鸡蛋黄、花生、核桃、鳕鱼、蟹肉;吸入类阳性过敏原前9位顺位:螨Ⅰ(粉尘螨)>螨Ⅱ(屋尘螨)>蟑螂>羽毛>霉菌Ⅰ>禾本科>猫上皮>乳胶>狗上皮。食物类过敏四季均以牛奶、鸡蛋最为常见,食物类过敏尤其以<1岁组最高发;吸入物类过敏四季均以螨Ⅰ(粉尘螨)、螨Ⅱ(屋尘螨)最为常见,吸入物类过敏尤其以6~14岁组最高发。食物类与吸入类过敏原均以冬、春季为主。过敏原反应强度+,以<1岁组最多见;过敏原++和过敏原++++,则以6~14岁组为主。结论珠海地区儿童过敏性疾病的过敏原谱因年龄、季节、过敏原反应强度不同而异。应结合儿童过敏性疾病临床症状与SPT检测特征性结果,对不同年龄和季节儿童过敏性疾病实施临床预防诊治干预。

乳腺癌术后化疗的护理

目的总结乳腺癌术后化疗的护理措施,减少化疗后毒副作用的发生。方法对42例乳腺癌术后化疗患者采取针对性护理措施。结果42例患者中白细胞减少42例,胃肠道反应32例,脱发32例,局部静脉炎10例,无肝肾功能异常发生。结论采取了科学有效的护理措施,减轻患者的痛苦,提高其生活质量的作用。

临床干预对乳腺癌康复的效果评价

目的:探讨临床干预对乳腺癌康复的影响。方法:对200例乳腺癌手术后康复期患者分成对照组和干预组,对照组采用传统的护理方法,干预组在治疗过程中实施护理干预并跟踪调查。结果:干预组术后不舒适及并发症发生率明显低于对照组,干预组在生活自理、心理状态、掌握疾病知识、积极参与与治疗、社交活动方面明显高于对照组。结论:临床护理干预可降低乳腺癌患者术后不适及并发症,提高病人的生存质量。

以问题为中心教学法在内科护理学教学中的应用及评价

目的通过在内科护理学教学中应用以问题为中心教学法(PBL)并评价教学效果,探索医学教育新方法。方法用随机法将护理专业原两个教学班共109人重新分成两个新教学班,分别作为试验组(n=54)和对照组(n=55),对试验组在传统教学法基础上实施PBL完成内科护理学课程全部课堂教学,而对照组用传统教学法完成内科护理学课程全部课堂教学,比较两组学生考试成绩和学生对教学评价。结果学生考试成绩试验组优于对照组,学生对教学评价试验组优于对照组(P均<0.05)。结论以问题为中心教学法在内科护理学教学中的应用取得很好的教学效果,值得推广。

山西、河南、陕西三省交界处黄河流域的数种狼蛛(蜘蛛目:狼蛛科)

本文记述了采自晋、豫、陕三省交界处黄河流域的8种狼蛛,其中一种为新种Pardosa dukouensis sp.nov,采自山西风陵渡口及陕西西安草滩。

实现教师角色转换 在中职卫校中推进问题教学法

以问题为中心教学法（简称PBL）作为一种医学教育改革新途径，重点培养学生掌握解决问题的能力，我国医学教育工作者主张采用PBL。PBL在中职卫校应用具有能培养学生浓厚的学习兴趣、提高学生学习效率、提高学生学习主观能动性、培养学生良好职业道德和素质及促进教师业务水平提高等优势，然而在中职卫校推进PBL教学法，客观要求实现教师角色转换，即由知识传授者向学习指导者转变、由单一传授型教师向教学科研型教师转变、由学生品德培养者向未来生活设计者转变。

珠海地区哮喘、鼻炎及皮炎儿童变应原检测结果分析及指导

目的了解珠海地区儿童变应原情况,确认变应性疾病的主要诱因,指导临床治疗。方法采用22种标准化变应原,对珠海地区2487例0～18岁患有哮喘、鼻炎或皮炎的儿童进行皮肤点刺实验。结果 2487例儿童患者中,1855例(74.59%)皮肤点刺试验为阳性反应。在阳性反应的患者中,35.10%对粉尘螨过敏,40.85%对户尘螨过敏;而对海鲜类的海虾、海蟹的阳性率分别为35.59%和24.53%;儿童常见的食入性过敏原如花生、牛奶、鸡蛋等的阳性率接近30%,分别是30.00%,29.71%,29.03%。通过分年龄段分析,我们发现在0～3岁儿童中,主要过敏原为食入性过敏原如海鲜、牛奶、花生、鸡蛋等;而在4～7岁儿童中,这几种食入性过敏原阳性率增加的同时,吸入性过敏原如户尘螨和粉尘螨的阳性率大幅升高;而在8～18岁患者中,主要过敏原则为吸入性过敏原。结论食入性过敏原是0～3岁过敏性疾病儿童的主要过敏原,4～7岁儿童中除了食入性过敏原阳性率高外,吸入性过敏原主要是尘螨类开始成为主要过敏原,而在8～18岁患者的主要过敏原为吸入性过敏原。

以问题为中心的教学模式在卫生职校的应用

以问题为中心教学法（Problem—Based Learning，简称PBL）作为一种医学教育改革新途径，已被国内外许多医学院校采用。为构建全新的以问题为中心的卫生职业教育教学模式和课程体系，我校开展了PBL在卫生职校的应用及效果评价项目研究。本文对我校推广应用PBL取得的教学效果进行了总结。

以问题为中心教学法在护生集中见习中的应用

目的通过在中职护生毕业实习前集中见习教学中应用以问题为中心（PBL）教学法并评价其教学效果，探索医学教育新方法。方法随机将护理专业2个教学班共106人分为实验组和对照组各53人。实验组实施PBL教学法，对照组采用传统教学法，比较2组学生对教学效果的评价。结果实验组教学效果优于对照组（P〈0．05）。结论PBL教学法在中职护生集中见习教学中的应用取得很好的效果，值得推广。

心电图诊断学视图直观加问题驱动教学法实践初探

心电图图形的产生基于心电活动的连续性变化,对于从事专业研究的专家来说,心电活动无疑是研究的基础。但对于从事临床一线工作的医务人员来说,他们只需要能迅速判断异常心电图,并不在意它如何产生。在正确连接导联线的前提下,不同个体心电图图形变化的产生原理是一致的,

以问题为中心的教学模式应用研究及体会

以问题为．中心教学法（Problem-Based Learning，简称PBL）是医学教育改革的一种新途径，具有能培养学生浓厚的学习兴趣、学习的主观能动性，提高学生学习效率，培养学生良好的职业道德和素质，促进教师业务水平提高等优势，已被国内外许多医学院校采用。为构建以问题为中心的卫生职业教育教学模式和课程体系，我校开展了PBL在教学中的应用及效果评价项目研究。

谈化疗时护士的自我防护

癌症是严重威胁着人类健康和生命的常见病、多发病，根据世界卫生组织报告，无论在发达或发展中国家，癌症发病率和死亡率在世界范围呈上升趋势，癌症正在超过心血管疾病将成为死亡原因的第1位，化疗作为一种全身治疗在癌症的综合治疗中愈来愈占有重要地位，和外科治疗、放射治疗具有同样重要意义。