TGF-β潜态相关肽及其截短体抑制TGF-β1诱导的LX-2细胞纤维化研究

目的转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)潜态相关肽(latent assotiated peptide,LAP)及其截短体抑制TGF-β1诱导的LX-2细胞纤维化研究。方法LAP全长命名为LAP-F,LAP截短体命名为LAP-B。用TGF-β1对LX-2处理进行纤维化模型的建立。分组后分别加入LAP-F和LAP-B多肽。control组:在正常情况下进行培养;TGF-β组:加入终浓度10 ng/mL的TGF-β1;TGF-β+LAP-F组:造模后加入终浓度60μg/mL的LAP-F;TGF-β+LAP-B组:造模后加入终浓度60μg/mL的LAP-B多肽。通过Western blot进行纤维化指标FN和α-SMA的蛋白水平检测。细胞免疫荧光实验检测细胞中FN和α-SMA的蛋白水平。结果Western blot结果显示,与control组细胞相比,TGF-β组细胞中纤维化相关蛋白FN的蛋白表达水平明显升高(P<0.001),纤维化相关蛋白α-SMA的蛋白表达也明显升高(P<0.01)。与TGF-β组相比,TGF-β+LAP-B组细胞中FN的蛋白表达明显降低(P<0.01),α-SMA的蛋白表达也明显降低(P<0.01)。与TGF-β组相比,TGF-β+LAP-F组细胞中FN的蛋白表达水平明显降低(P<0.01),α-SMA的蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。与TGF-β组相比,TGF-β+LAP-F组细胞中FN和α-SMA蛋白荧光强度更低。免疫荧光的结果显示与control组细胞相比,TGF-β组细胞中FN和α-SMA的蛋白荧光强度更高,这意味着纤维化相关蛋白表达增多。与TGF-β组相比,TGF-β+LAP-B组细胞中FN和α-SMA蛋白荧光强度更低。与TGF-β组相比,TGF-β+LAP-F组细胞中FN和α-SMA蛋白荧光强度更低。结论LAP-F和LAP-B两种多肽都具有抗LX-2细胞纤维化能力,为后续研究提供基础。

基于创新型人才培养的基因工程课程教学实践与思考

培养创新型人才顺应我国当前科学研究和创新发展的趋势,是我国当前社会进步和经济发展的必然要求。在当前时代背景下,普通高等院校基因工程课程也要进行教学内容更新与教学方法改革,以达到创新型人才的培养目标。本文对基于创新型人才培养的基因工程课程进行教学实践与思考。

心肌纤维化的发生机制及治疗研究进展

心肌纤维化以心脏中非收缩性细胞外基质异常沉积在心肌中为主要特征,并且在各种病理生理条件下,心肌纤维化可以造成心脏收缩和舒张功能障碍,是多种心血管疾病发生发展到某一阶段的主要病理表现,它破坏心肌结构,扰乱心肌兴奋收缩耦联,并损害其收缩和舒张功能,导致并加重心律失常和心功能障碍,从而使心脏疾病进一步发展,最终导致心力衰竭,并且影响心力衰竭患者的临床进程和结局。目前多项研究表明,心肌纤维化的致病因素很多,但其发生发展的具体病理机制尚未明确,需要进一步的研究探索。研究表明炎症细胞因子和趋化因子、活性氧、肾素-血管紧张素-醛固酮系统、基质蛋白和生长因子等与心肌纤维化密切相关。本文就心肌纤维化的发生中涉及的分子机制及其治疗选择的研究进展进行综述。

BthC2c1系统剪切基因的初步研究

目的评估热噬淀粉芽孢杆菌(Bacillus thermoamylovorans C2c1,BthC2c1)系统的基因编辑能力。方法分别将BthC2c1、SpCas9与相应的sgRNA表达质粒转染人肾上皮细胞293T和鸡成纤维细胞DF-1;显微注射技术将制备的BthC2c1-sgRNA、SpyCas9-sgRNA复合物注射入小鼠胚胎内;T7E1实验检测基因剪切效率。结果293T和DF-1细胞中SpCas9可以剪切底物,BthC2c1剪切底物不明显;为小鼠胚胎设计的SpyCas9-sgRNA和BthC2c1-sgRNA在体外均可以剪切底物,在体内SpyCas9系统可以检测到剪切,BthC2c1剪切底物不明显。结论Cas9系统可以在293T和DF-1细胞和小鼠胚胎中剪切基因,BthC2c1的剪切能力较弱。